郭鵬盧 建李軍 羅四維 趙國琦

動物消化道是機體營養(yǎng)物質消化、吸收和動物免疫、生理調節(jié)等的重要場所。有機酸會影響動物的消化道生態(tài)環(huán)境，可降低消化道pH值，同時破壞革蘭氏陰性菌的細胞壁，減少有害菌，促進有益菌，抑制有害菌發(fā)酵，提高消化酶活性等作用（Dibner，2002；Gunal，2006；Owens，2008；AI-Kassi，2009）[1-4]。本試驗旨在研究在飼料中添加以乳酸和磷酸為主的復合酸化劑對不同日齡不同消化段的pH值、酶活性的影響，為酸化劑在實際生產中應用提供理論依據。

1 材料和方法

1.1 試驗日糧

試驗基礎日糧以玉米、豆粕、魚粉、棉籽粕等為主要原料，參照美國NRC(1994)肉雞營養(yǎng)需要標準配制而成?；A日糧組成及其營養(yǎng)水平見表1。

復合酸化劑由上海美農有限公司提供，白色粉狀。主要成分為乳酸（65%）、磷酸（30%）及其它幾種有機酸等（5%）復合而成。1%復合酸化劑水溶液pH值為2.19（測定值）。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平

1.2 試驗動物

選用420只1日齡健康AA(Arbor Acres)商品代肉仔雞，隨機分為4組，每組3個重復，每個重復35只。4種試驗日糧分別是在基礎日糧中添加0、0.1%、0.2%、0.3%的復合酸化劑配制而成。試驗期42 d，自由采食、自由飲水。

1.3 樣品采集

試驗期21和42 d，每個重復隨機取2只，測定不同消化段pH值、腺胃和肌胃內容物的蛋白酶活性以及十二指腸和空腸內容物的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。

1.4 測定方法

用載玻片側刮腺胃黏膜及黏膜下黏液0.2 g左右，取肌胃內容物0.5 g左右，腸道內容物0.3 g左右，按1∶9加入0.9%的生理鹽水，在冰浴條件下充分勻漿。勻漿后置于已提前預溫的4℃冷凍離心機中，3 000 r/min離心10 min，吸取上清液。腺胃和肌胃蛋白酶活性的測定采用安森法。十二指腸和空腸總蛋白酶活性的測定采用福林-酚法。十二指腸和空腸的淀粉酶活性測定采用碘-淀粉比色法（南京建成生物工程研究所提供的淀粉酶測定試劑盒）。

十二指腸和空腸脂肪酶活性的測定依據Sullivan的方法稍作修改后進行[5]，操作方法如下，取100 ml的三角瓶4個，每瓶加入5 ml的0.025 mol/l磷酸鹽緩沖液和4.0 ml聚乙烯醇橄欖油乳化液，38℃水浴中保溫5 min，然后兩個瓶中各加小腸液1 ml，從加小腸液開始精確計時15 min，取出后立即加入95%乙醇15 ml以終止酶作用，加3滴1%的酚酞指示劑，另外兩個瓶作對照，反應完成后加1 ml小腸液。用0.005 mol/l的氫氧化鈉溶液滴定。

1.5 數據處理

試驗數據組間差異采用SPSS15.0軟件中的Oneway Anova進行方差分析，采用LSD法進行多重比較，以平均值±標準差表示。

2 結果與分析

2.1 復合酸化劑對21 d肉仔雞消化道pH值的影響（見表2）

表2 復合酸化劑對21 d肉仔雞消化道pH值的影響

由表2可見，與對照組相比較，日糧中添加0.2%復合酸化劑組顯著降低了嗉囊、腺胃、肌胃和十二指腸的pH值（P＜0.05），添加0.3%復合酸化劑組顯著降低了嗉囊和腺胃的pH值（P＜0.05），添加0.1%復合酸化劑組對各消化段pH值影響不顯著（P＞0.05），添加不同含量復合酸化劑均對空腸、回腸和盲腸pH值影響不顯著（P＞0.05）。由此可見，日糧中添加0.2%復合酸化劑能夠有效降低消化道前段的pH值。

2.2 復合酸化劑對42 d肉仔雞消化道pH值的影響（見表3）

表3 復合酸化劑對42 d肉仔雞消化道pH值的影響

由表3可見，日糧添加0.3%復合酸化劑顯著降低試驗期42 d的空腸pH值（P＜0.05），添加不同含量復合酸化劑對其他消化段pH值影響均不顯著（P＞0.05）。0.1%、0.2%和0.3%復合酸化劑組嗉囊的pH值分別比對照組降低7.36%、9.55%、12.68%，但差異不顯著（P＞0.05），0.1%和0.2%復合酸化劑組的空腸pH值分別比對照組降低1.40%和2.79%，但差異不顯著（P＞0.05）。此外，與對照組相比較，0.1%、0.2%和0.3%復合酸化劑組腺胃、肌胃、十二指腸和盲腸的pH值均有下降，但與對照組相比較差異不顯著（P＞0.05）。由此可見，長期添加復合酸化劑對消化道pH值的影響不如短期添加效果明顯，這可能與試驗動物日齡增加而添加劑量不變有關。

2.3 復合酸化劑對肉仔雞腺胃、肌胃總蛋白酶活性的影響（見表4）

表4 復合酸化劑對肉仔雞腺胃、肌胃蛋白酶活性的影響(U/g)

由表4可見，不同日齡各組間腺胃、肌胃的蛋白酶活性差異均不顯著(P＞0.05)。21 d日糧添加復合酸化劑對肉仔雞腺胃、肌胃的蛋白酶活性略有降低，但與對照組差異不顯著(P＞0.05)。42 d日糧添加復合酸化劑對肉仔雞腺胃、肌胃蛋白酶活性影響不顯著(P＞0.05)。

2.4 復合酸化劑對21d肉仔雞腸道酶活性的影響（見表5）

表5 復合酸化劑對21 d肉仔雞腸道酶活性的影響（U/ml）

由表5可見，日糧添加0.2%和0.3%復合酸化劑可以顯著提高試驗期21 d十二指腸的蛋白酶和淀粉酶活性（P＜0.05），各試驗組間十二指腸的脂肪酶活性和空腸的蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活性相比較差異不顯著(P＞0.05)。其中，0.1%、0.2%和0.3%復合酸化劑組的十二指腸蛋白酶活性分別比對照組提高6.92%（P＞0.05）、15.96%（P＜0.05）和20.24%（P＜0.05），十二指腸淀粉酶活性分別比對照組提高10.85%（P＞0.05）、40.97%（P＜0.05）和32.53%（P＜0.05）。

2.5 復合酸化劑對42 d肉仔雞腸道酶活性的影響（見表6）

由表6可見，日糧添加0.2%復合酸化劑可以顯著提高試驗期42 d十二指腸淀粉酶活性（P＜0.05），添加0.3%復合酸化劑可以顯著提高十二指腸蛋白酶活性（P＜0.05），各試驗組間十二指腸的脂肪酶活性和空腸的蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活性相比較差異不顯著(P＞0.05)。

表6 復合酸化劑對42 d肉仔雞腸道酶活性的影響（U/ml）

3 討論

3.1 復合酸化劑對肉仔雞消化道pH值的影響

研究表明，復合酸化劑可以降低動物消化道內容物pH值，但結果報道差異較大。馬紅艷等[6]在日糧中添加復合酸化劑，降低了21、42 d肉雞空腸和盲腸內容物pH值，并改善了微生物環(huán)境。朱碧泉等[7]報道，添加0.2%復合酸化劑對21 d和42 d肉雞肌胃、腺胃、十二指腸和空腸內容物pH值無顯著影響，但顯著降低了盲腸內容物pH值。Paul等（2007）[8]研究表明，添加0.3%的甲酸銨和丙酸鈣對42 d肉仔雞嗉囊、腺胃、肌胃、十二指腸、空腸和回腸的pH值均無顯著影響。Abdel-Fattah等（2008）[9]研究表明，酸化劑對42 d肉雞消化道（嗉囊、十二指腸、空腸和回腸）pH值無顯著影響。Reza Mahdavi等（2009）[10]也發(fā)現，添加丁酸對肉雞回腸內容物pH值無顯著影響。本研究發(fā)現，添加復合酸化劑組對消化道前段pH值影響較為明顯，長期添加復合酸化劑對消化道pH值的影響不如短期添加效果明顯，這可能與酸化劑的種類以及試驗動物日齡增加而添加劑量不變有關。

3.2 復合酸化劑對肉仔雞消化道酶活性的影響

酶活性的提高或降低可能是由于pH值的改變引起的，胃內容物pH值穩(wěn)定在適宜范圍內才能維持正常消化生理。高pH值顯著抑制胃蛋白酶原的活化及胃蛋白酶的活性。當胃內容物pH值為2.0時，胃蛋白酶活化迅速，其適宜pH值為2.0～3.5；當pH值提高到4.0時，活化速度顯著降低；當pH值＞6.0時，胃蛋白酶失活。胃內容物pH值影響飼料蛋白的消化，加入酸化劑，可直接降低食糜的pH值，達到適宜酸堿度，有效的激活胃蛋白酶原，刺激消化酶的分泌，有利于飼料中營養(yǎng)成分的消化吸收，即提高飼料利用率，又增強體質，提高抗病能力（侯水生等，1998）[11]。李鵬等（2009）[12]報道，添加乳酸型酸化劑，可顯著降低仔豬胃和十二指腸食糜pH值，顯著提高仔豬胃蛋白酶和胰蛋白酶活性。朱曉萍等（2007）[13]研究表明，添加生物酸化劑顯著地促進了豬胃酸和胃蛋白酶的分泌，提高了胰蛋白酶和淀粉酶的活性。冷向軍等（2002）[14]研究表明，添加0.25%復合酸顯著提高了十二指腸內容物中胰蛋白酶和淀粉酶活性。

本試驗研究發(fā)現，不同日齡各組間腺胃、肌胃的蛋白酶活性差異均不顯著；試驗期21 d，日糧添加0.2%和0.3%復合酸化劑可以顯著提高十二指腸的蛋白酶和淀粉酶活性；試驗期42 d，日糧添加0.2%復合酸化劑可以顯著提高十二指腸淀粉酶活性，添加0.3%復合酸化劑可以顯著提高十二指腸蛋白酶活性；各試驗組間十二指腸的脂肪酶活性和空腸的蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活性相比較差異不顯著。pH值的變化對酶的活性有一定的影響，同時，其他因素（如溫度、采食量、日糧組成和各種抗營養(yǎng)因子等）也會對酶的活性有一定的影響（陳朝江，2005）[15]。動物體內生理環(huán)境復雜，酸化劑提高酶活性的調控機理有待進一步的研究。

4 小結

本研究結果表明，添加復合酸化劑組對消化道前段pH值影響顯著；而長期添加復合酸化劑對消化道pH值的影響不如短期添加效果明顯；日糧中添加0.2%復合酸化劑能夠有效降低消化道前段的pH值，并能提高十二指腸蛋白酶和淀粉酶的活性。

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