趙娜 李紹章 楊雪海 魏金濤 黃少文

發(fā)酵可以改變飼料原料化學(xué)結(jié)構(gòu)、提高飼料中真蛋白的含量（羅明朗，1996）、消除抗?fàn)I養(yǎng)因子，產(chǎn)生多種生物活性物質(zhì)，提高飼料利用率，體外消化測定法可以更簡便、快速、準(zhǔn)確地對飼料營養(yǎng)價值進行評定，估測體內(nèi)消化率，較好地比較飼料消化性的優(yōu)劣。

本試驗通過體外消化測定法對發(fā)酵飼料原料營養(yǎng)價值進行評定，比較不同飼料原料發(fā)酵后消化性的優(yōu)劣，為在實際生產(chǎn)中科學(xué)選擇發(fā)酵原料配方提供理論依據(jù)。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗設(shè)計

試驗分7組14個處理。以玉米、玉米淀粉、豆粕等組成7種原料（見表1）進行液態(tài)發(fā)酵或不發(fā)酵，對其進行體外消化率的測定。

1.2 發(fā)酵樣品的制備

稱取原料20 g，加入66.67 ml水，接入植物乳桿菌106cfu/g DM，25℃發(fā)酵24 h，50℃烘干后返潮、粉碎。過50目篩，裝入樣品袋密封，低溫保存。

表1 原料組成

1.3 試劑

胃蛋白酶(1∶3 000)、胰酶(1∶250)購自武漢谷歌生物科技有限公司；氯霉素；乙醇、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、鹽酸等常規(guī)試劑均為分析純。

1.4 試驗方法

1.4.1 體外消化操作步驟

消化試驗參照Boisen等(1995)體外模擬消化方法和侯小峰（2005）方法改進。

胃消化階段：準(zhǔn)確稱取1 g樣品（精確至0.000 1 g），置于100 ml具塞三角瓶中，向瓶中加入15 ml磷酸緩沖液（0.2M，pH值6.0），小心混合均勻后，加入10ml 0.2 M HCl溶液，將食糜pH值調(diào)整至2.0，加入1 ml新鮮的胃蛋白酶鹽酸溶液，并使pH值仍保持在2.0。加入0.5 ml細菌生長抑制劑（0.5%氯霉素溶液），用橡膠塞封口。置于40℃恒溫搖床中（120次/min），消化時間為4 h。

小腸消化階段：待胃消化階段結(jié)束后，向食糜中加入10 ml磷酸緩沖液（0.2 M，pH值6.8）和5 ml 0.6M的NaOH溶液，調(diào)整食糜pH值至6.5，然后加入1 ml豬胰酶溶液，并使pH值仍保持在6.5。置于40℃恒溫搖床中（120次/min），消化時間為4 h。

小腸消化期結(jié)束后將所有食糜轉(zhuǎn)移至過濾器內(nèi)無氮濾紙中，沖洗殘渣，干燥，測定粗蛋白質(zhì)、干物質(zhì)含量。

1.4.2 粗蛋白質(zhì)的測定

用FOSS公司2300型全自動凱氏定氮儀測定。

1.5 數(shù)據(jù)處理

所得數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS13.0和Excel 2003分析，進行t檢驗。

2 試驗結(jié)果與分析

各原料發(fā)酵前后CP含量變化見表2，CP體外消化率變化見表3，DM體外消化率見表4。

表2 各原料發(fā)酵前后CP含量（%）

表3 各原料發(fā)酵前后CP體外消化率（%）

表4 各原料發(fā)酵前后DM體外消化率（%）

表2結(jié)果顯示，發(fā)酵可以稍微提高原料中CP的含量，但差異并不顯著（P＞0.05）。這與本試驗中接種的益生菌菌種有關(guān)，植物乳桿菌對提高原料中CP含量效果不明顯。而楊建雄等（1993）將玉米粉接種枯草桿菌和熱帶假絲酵母發(fā)酵72 h后蛋白質(zhì)含量由7.56%增長到28.47%。

由表3可以看出，各組原料經(jīng)發(fā)酵后CP體外消化率均得到提高。這可能是飼料原料經(jīng)植物乳桿菌發(fā)酵后改善了原料中蛋白質(zhì)品質(zhì)，可被消化酶消化利用的部分增加，提高了CP的體外消化率。

表3顯示出較明顯的規(guī)律：發(fā)酵前玉米或玉米淀粉含量高的原料CP體外消化率較高。原料發(fā)酵后隨玉米的比例減少，CP消化率增加的比例下降。玉米、玉米豆粕3∶1組發(fā)酵前后粗蛋白質(zhì)消化率變化顯著（P＜0.05）。這可能是玉米提供了糖分，促進了發(fā)酵過程中蛋白品質(zhì)的改善；也可能是玉米中粗蛋白質(zhì)含量較低，也就是CP基數(shù)較低，所以CP消化率提高較大。

本試驗中，玉米、玉米豆粕3∶1經(jīng)植物乳桿菌發(fā)酵后干物質(zhì)消化率得到顯著提高（P＜0.05）。說明植物乳桿菌對提高飼料原料中可被消化酶和水溶性物質(zhì)效果較為明顯。

3 小結(jié)

飼料原料經(jīng)植物乳桿菌體外消化后CP含量略有提高；玉米含量高的混合原料經(jīng)發(fā)酵后CP體外消化率和DM體外消化率得到明顯提高。

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