楊超燕， 唐春萍， 沈志濱， 丘俊文， 陳燕思

(廣東藥學(xué)院中藥學(xué)院，廣東廣州510006)

香丹注射液又稱復(fù)方丹參注射液，是由丹參、降香兩味中藥經(jīng)提取精制而成，具有擴(kuò)張冠脈、增加冠脈血液量、保護(hù)心肌缺血缺氧、清除自由基、保護(hù)肝損害、鎮(zhèn)靜、改善血液流變學(xué)等作用，主要用于心絞痛，也可用于心肌梗塞［1］。前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明香丹注射液ADE配伍組(16 g生藥/kg)對(duì)小鼠常壓耐缺氧存活的時(shí)間具有延長(zhǎng)作用且優(yōu)于香丹注射液組［2］;對(duì)垂體后葉素致大鼠心肌缺血具有較好的改善作用［3］，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)幾種小鼠動(dòng)物缺氧模型考察香丹注射液ADE配伍組對(duì)缺氧模型動(dòng)物的保護(hù)作用，從抗整體小鼠缺氧作用方面初步探討香丹注射液改善心腦血管作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，為其在心腦血管方面的臨床應(yīng)用提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究依據(jù)。

1 試驗(yàn)材料

1.1 試劑與藥品 香丹注射液提取部位配伍ADE低、中、高劑量(8、16、32 g生藥/kg)組，均由廣東藥學(xué)院中藥學(xué)院中藥化學(xué)教研室提供;美托洛爾注射液(廣州白云山天心制藥股份有限公司，081101);鹽酸異丙腎上腺素注射液(上海禾豐制藥有限公司，070701)。

1.2 動(dòng)物 NIH小鼠，SPF級(jí)，體質(zhì)量18～22 g，雄性，由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供(合格證號(hào):2008A021)。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 藥液的制備 取香丹注射液的石油醚萃取部分(A)、正丁醇萃取部分(D)和水萃取部分(E)組合配得ADE配伍組，作為樣品溶液。

2.2 對(duì)小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間的影響 取60只小鼠，隨機(jī)分5組:生理鹽水對(duì)照組，美托洛爾陽(yáng)性組，ADE高、中、低劑量(32、16、8 g生藥/kg)組，每組12只，各組iv給藥，每日1次，連續(xù)給藥3 d，末次給藥3 min后，將小鼠分別放入125 mL磨口廣口瓶?jī)?nèi)密封，立即計(jì)時(shí)，以停止呼吸為標(biāo)準(zhǔn)，觀察小鼠存活時(shí)間。由表1可知，ADE高、中、低劑量組都有明顯延長(zhǎng)小鼠存活時(shí)間的作用。見(jiàn)表1。

表1 香丹注射液ADE配伍組對(duì)小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間的影響(±s，n=12)

表1 香丹注射液ADE配伍組對(duì)小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間的影響(±s，n=12)

注:與生理鹽水組比較:*P＜0.05，＊＊P＜0.01(t檢驗(yàn))。

/min生理鹽水 ——組別 劑量/(g生藥/kg) 小鼠存活時(shí)間17.08±1.84美托洛爾組 2 mg 59.48±18.15＊＊ADE高劑量組 32 21.03±4.39*ADE中劑量組 16 20.72±4.34*ADE低劑量組 8 20.08±3.97*

2.3 對(duì)亞硝酸鈉中毒小鼠存活時(shí)間的影響 取50只小鼠，隨機(jī)分5組:同2.2項(xiàng)，每組10只，各組iv給藥，每日1次，連續(xù)給藥3 d，末次給藥3 min后，各組小鼠均腹腔注射亞硝酸鈉250 mg/kg，觀察小鼠存活時(shí)間。由表2可知，ADE低、中、高劑量(8、16、32 g生藥/kg)組對(duì)亞硝酸鈉中毒致小鼠存活時(shí)間無(wú)顯著性影響，表明ADE配伍組對(duì)亞硝酸鈉中毒致小鼠組織缺氧無(wú)保護(hù)作用。見(jiàn)表2。

表2 香丹注射液ADE配伍組對(duì)亞硝酸鈉中毒小鼠存活時(shí)間的影響(±s，n=10)

表2 香丹注射液ADE配伍組對(duì)亞硝酸鈉中毒小鼠存活時(shí)間的影響(±s，n=10)

注:與生理鹽水組比較:*P＜0.05(t檢驗(yàn))。

/min生理鹽水 ——組別 劑量/(g生藥/kg) 小鼠存活時(shí)間27.28±6.52美托洛爾組 2 mg 32.80±5.05*ADE高劑量組 32 24.95±2.11 ADE中劑量組 16 24.25±2.37 ADE低劑量組825.56±5.29

2.4 對(duì)異丙腎上腺素性心肌缺氧模型小鼠常壓耐缺氧的影響 取72只小鼠，隨機(jī)分6組:生理鹽水對(duì)照組，模型組，美托洛爾陽(yáng)性組，ADE高、中、低劑量組，每組12只，各組iv給藥，每日1次，連續(xù)給藥3 d。于第3天除正常組小鼠腹腔注射生理鹽水外，其余各組小鼠腹腔注射鹽酸異丙腎上腺素15 mg/kg造模。20 min后，各組小鼠iv給藥后3 min，將小鼠分別放入250 mL磨口廣口瓶?jī)?nèi)密封，立即計(jì)時(shí)，以停止呼吸為標(biāo)準(zhǔn)，觀察小鼠存活時(shí)間。結(jié)果表明ADE高劑量組能顯著提高小鼠異丙腎上腺素模型耐缺氧的能力，顯著延長(zhǎng)小鼠存活時(shí)間;ADE高、中、低劑量組對(duì)15 min、20 min小鼠存活率也有提高作用，但與模型組無(wú)顯著性差異。見(jiàn)表3。

表3 香丹注射液ADE配伍組對(duì)異丙腎上腺素性心肌缺氧模型小鼠的存活時(shí)間及存活率的影響(±s，n=12)

表3 香丹注射液ADE配伍組對(duì)異丙腎上腺素性心肌缺氧模型小鼠的存活時(shí)間及存活率的影響(±s，n=12)

注:與生理鹽水組比較:*P＜0.05;與模型組比較:△P＜0.05;△△P＜0.05(t檢驗(yàn))。

組別 劑量/(g生藥/kg) 小鼠存活時(shí)間/min 15 min存活鼠/只 存活率/%20 min存活鼠/只 存活率/%正常組 ——22.06±4.45 12 100 7 58.3模型組 —— 18.18±4.71* 9 75 4 33.3美托洛爾組 2 mg 66.32±10.87△△ 12 100 12 100 ADE高劑量組 32 22.15±2.31△ 12 100 9 75 ADE中劑量組 16 21.06±3.60 12 100 6 50 ADE低劑量組819.95±4.54 11 91.7 5 41.7

3 討論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:香丹注射液ADE配伍組有明顯延長(zhǎng)小鼠常壓存活時(shí)間的作用，說(shuō)明其能改善機(jī)體的心、腦等主要器官缺氧供能不足情況。

香丹注射液ADE配伍高劑量組能顯著延長(zhǎng)小鼠對(duì)異丙腎上腺素引起的心肌耗氧增加所致心肌缺血的存活時(shí)間，可確定其對(duì)心肌缺血具有明顯的改善作用。

在亞硝酸鈉致小鼠中毒存活實(shí)驗(yàn)中，亞硝酸鈉使正常二價(jià)鐵血紅蛋白轉(zhuǎn)變?yōu)槿齼r(jià)鐵血紅蛋白，破壞血紅蛋白攜氧能力，造成腦和機(jī)體重要器官、組織供氧不足而死亡，一般具有升高血漿血紅蛋白量作用的受試物可以延長(zhǎng)小鼠亞硝酸鈉中毒存活時(shí)間［4］，但ADE配伍組對(duì)亞硝酸鈉中毒致小鼠組織缺氧無(wú)明顯的保護(hù)作用，提示香丹注射液ADE配伍組不能改善血漿血紅蛋白量。

根據(jù)香丹注射液ADE配伍組的高效液相圖譜可知，其主要化學(xué)成分量的多少依次為:丹參素＞迷迭香酸＞丹酚酸B＞丹酚酸D＞丹酚酸C＞原兒茶醛。從3個(gè)缺氧模型實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明香丹注射液ADE配伍組對(duì)小鼠全身性缺氧和異丙腎上腺素所致的心肌缺氧有明顯的改善作用，但關(guān)于其耐缺氧的具體有效成分和機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。

［1］楊 麗.香丹注射液的臨床用途及其不良反應(yīng)［J］.中華實(shí)用醫(yī)藥雜志，2004，14(4):60－61.

［2］楊超燕.香丹注射液抗缺氧有效部位的實(shí)驗(yàn)研究［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2010，21(4):55－56.

［3］尹永芹，朱俊訪，沈志濱，等.神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)分析香丹注射液抗心肌缺血有效成分的譜效相關(guān)性研究［J］.中草藥，2009，40(8):1284－1287.

［4］彭雪芹，陳 文，李麗燕，等.馬鹿茸血口服液對(duì)小鼠耐缺氧作用的影響［J］. 石河子大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，26(4):477－479.