方鐵鈞，周群，狄麗莎，譚兆軍，鄧景屹

（1.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院口腔科，沈陽(yáng) 110004；2.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院兒童牙科，沈陽(yáng)110002；3.中國(guó)科學(xué)院金屬研究所，沈陽(yáng) 110016）

碳纖維增強(qiáng)碳與碳化硅雙基體陶瓷基復(fù)合材料作為口腔種植體材料的細(xì)胞毒性

方鐵鈞1，周群1，狄麗莎2，譚兆軍1，鄧景屹3

（1.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院口腔科，沈陽(yáng) 110004；2.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院兒童牙科，沈陽(yáng)110002；3.中國(guó)科學(xué)院金屬研究所，沈陽(yáng) 110016）

目的通過體外細(xì)胞培養(yǎng)法評(píng)價(jià)碳纖維增強(qiáng)碳與碳化硅雙基體陶瓷基復(fù)合材料（C/C-SiC）對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡的影響。方法 用實(shí)驗(yàn)材料不同濃度浸提液培養(yǎng)小鼠成纖維細(xì)胞L929，采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞的相對(duì)增殖度；采用急性溶血試驗(yàn)檢測(cè)材料對(duì)血細(xì)胞的溶血作用，計(jì)算溶血率；采用流式細(xì)胞儀、Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)陰性對(duì)照組、100%C/C-SiC組、純鈦組、陽(yáng)性對(duì)照組的細(xì)胞散點(diǎn)圖，計(jì)算正常細(xì)胞、早期凋亡、晚期凋亡和壞死細(xì)胞的比例。結(jié)果 C/C-SiC復(fù)合材料的細(xì)胞毒性為1級(jí)，溶血率為0.156%，無明顯溶血反應(yīng)，與陰性對(duì)照組和純鈦組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。C/C-SiC組4個(gè)象限細(xì)胞比例與純鈦組和陰性對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），陽(yáng)性對(duì)照組的早期凋亡、正常細(xì)胞比例與其他任一組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 C/C-SiC復(fù)合材料有生物安全性基礎(chǔ)，無細(xì)胞毒性，無溶血反應(yīng)。

細(xì)胞毒性；溶血反應(yīng)；MTT；成纖維細(xì)胞L929；復(fù)合材料；凋亡

目前口腔種植體材料大部分是鈦和鈦合金材料，金屬種植體本身的缺點(diǎn)是與骨組織的彈性模量相差較大，易形成應(yīng)力集中和骨吸收。碳纖維復(fù)合材料如碳纖維增強(qiáng)碳基體復(fù)合材料（C/C），由于碳元素有優(yōu)異的生物相容性能，具有與人體骨非常接近的彈性模量［1，2］，能有效減少應(yīng)力屏蔽效應(yīng)導(dǎo)致的骨吸收［3］，而且材料具有穩(wěn)定的化學(xué)性質(zhì)和高強(qiáng)度的機(jī)械性能，是一種潛在的骨修復(fù)和替代材料。但是C/C復(fù)合材料長(zhǎng)期置于體內(nèi)，其游離出來的碳顆粒會(huì)沉積到皮膚，造成“黑膚效應(yīng)”［4］。C/C-SiC是以C/C為胚體，用化學(xué)氣相滲透技術(shù)把SiC基體通過氣相滲透而制得。C/C-SiC克服了C/C碳顆粒易脫落易氧化的缺點(diǎn)，具有更出色的各種性能。C/C-SiC作為生物醫(yī)學(xué)材料的應(yīng)用研究還未見報(bào)道。本研究采用中國(guó)科學(xué)院金屬研究所提供的C/C-SiC，利用體外細(xì)胞毒性手段，初步探究該材料作為口腔種植體材料的可行性。

1 材料與方法

1.1 材料、儀器與試劑

C/C-SiC、純鈦、純鉛（中國(guó)科學(xué)院金屬研究所），L929小鼠成纖維細(xì)胞（中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)中心），Annexin V-FITC/PI、MTT、DMSO（美國(guó) Sigma 公司），IX70倒置顯微鏡（日本Olympus公司），酶標(biāo)檢測(cè)儀（奧地利Tecan公司），流式細(xì)胞儀（美國(guó)BD公司）。

1.2 材料的制備與浸提液的提取

1.2.1 MTT法和Annexin V-FITC/PI雙染法浸提液提?。篊/C-SiC、純鈦、純鉛利用線切割技術(shù)制成5mm×5mm×2mm大小。取C/C-SiC片、純鈦片、純鉛片各30片，常規(guī)超聲波清洗，蒸餾水清洗，烘干后放入75%乙醇浸泡24h，濾紙上干燥，紫外線正反面各照射30min后置于浸提容器內(nèi)，按樣本表面積與浸提液比例為3cm2/mL加入RPMI1640培養(yǎng)液，在37℃恒溫器浸提72h。

1.2.2 溶血試驗(yàn)浸提液提?。簩/C-SiC片、純鈦片常規(guī)清潔，高溫高壓蒸汽消毒，干燥，按材料量與無菌生理鹽水之比為5g/10mL的標(biāo)準(zhǔn)，每個(gè)試管加入10mL生理鹽水，生理鹽水全部覆蓋材料（C/C-SiC組n=3，純鈦組n=3），同時(shí)設(shè)置對(duì)照組，每個(gè)試管10mL無菌生理鹽水作為陰性對(duì)照組（n=3），每個(gè)試管10mL蒸餾水作為陽(yáng)性對(duì)照組（n=3），共4組。將所有組置于37℃恒溫水浴浸提30min后分別收集于無菌離心管中，放4℃冰箱保存。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 MTT法：將L929小鼠成纖維細(xì)胞經(jīng)3次傳代后取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)末期細(xì)胞，用0.5%胰蛋白酶消化，配制成2×104/mL的細(xì)胞懸液，取5塊96孔培養(yǎng)板，每孔加入100μL細(xì)胞懸液，于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h。吸除原培養(yǎng)液，每孔分別加入100μLRPMI1640液（陰性對(duì)照組）、鉛浸提液（陽(yáng)性對(duì)照組）、純鈦浸提液（純鈦組）、100%、50%和 25%的C/C-SiC浸提液（100%C/C-SiC組、50%C/C-SiC組、25%C/C-SiC組），濃度用RPMI1640液稀釋控制，以沒有細(xì)胞只有RPMI1640液（空白對(duì)照組）作為調(diào)零孔，共7組，每組6孔，繼續(xù)培養(yǎng)。分別于24、48、72、96、120h后取出一塊板，倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)情況，每孔加入20μLMTT溶液，繼續(xù)培養(yǎng)4h，吸除孔內(nèi)的培養(yǎng)液，加入200μLDMSO溶液，搖床上低速振蕩10min，用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀測(cè)定各孔的吸光度值（Optical density，OD），波長(zhǎng)為 490nm，比較各組OD值的差異，計(jì)算細(xì)胞相對(duì)增殖率（relative growth rate，RGR），根據(jù)RGR判定材料的細(xì)胞毒性。RGR≥100%的細(xì)胞毒性等級(jí)為0級(jí)；75%～99%為1級(jí)；50%～74%為2級(jí)；25%～49%為3級(jí)；1%～24%為4級(jí)；＜1%為5級(jí)。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)是0、1級(jí)為合格；2級(jí)應(yīng)結(jié)合細(xì)胞形態(tài)評(píng)價(jià)；3、4、5級(jí)為不合格。

1.3.2 溶血試驗(yàn)：每20mL新鮮兔全血中加入1mL2%（20g/L）草酸鉀生理鹽水溶液，調(diào)整生理鹽水用量，使稀釋后兔血0.2mL在10mL蒸餾水中在545nm 處的 OD值為（0.8±0.3），使用前配制，于 4℃冰箱儲(chǔ)存。每試管中加入抗凝兔血0.2mL，輕輕搖勻后置于37℃恒溫水箱中60min后各試管1500r/min離心5min，吸取上清液，在紫外分光光度計(jì)上于545nm波長(zhǎng)測(cè)量OD值，計(jì)算溶血率。評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)：溶血率＞5%時(shí)，可判斷材料具有溶血作用。

1.3.3 Annexin V-FITC/PI雙標(biāo)記流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期末細(xì)胞，配制成1×106/mL的細(xì)胞懸液，取12孔培養(yǎng)板，每孔加入1mL細(xì)胞懸液，于CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h，吸除孔內(nèi)培養(yǎng)液，分別加入RPMI1640液（陰性對(duì)照組）、100%C/C-SiC浸提液（100%C/C-SiC組）、純鈦浸提液（純鈦組）、鉛浸提液（陽(yáng)性對(duì)照組）1mL，共4組，每組6孔，培養(yǎng)48h后，吸除浸提液，胰酶消化細(xì)胞，加入1mL冷PBS，在 4℃、1000r/min離心10min，冷 PBS清洗 2次。將細(xì)胞重懸于400μL緩沖液，加入5μLAnnexin V-FITC輕輕搖勻，避光室溫下反應(yīng)15min，加入10μLPI，避光室溫反應(yīng)5min，1h內(nèi)上流式細(xì)胞儀檢測(cè)，選擇488nm氬離子激光源。觀察各組細(xì)胞流式細(xì)胞儀散點(diǎn)圖，計(jì)算各組正常、早期凋亡、晚期凋亡和壞死細(xì)胞的含量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 L929細(xì)胞形態(tài)學(xué)

在倒置顯微鏡下觀察，24～120h陰性對(duì)照組、純鈦組、各濃度C/C-SiC組的細(xì)胞密度增加。120h時(shí)細(xì)胞長(zhǎng)滿培養(yǎng)板底部，呈重疊狀態(tài)，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，呈梭形或多角形，形態(tài)規(guī)則，核分裂相多見，僅見到個(gè)別細(xì)胞皺縮、變圓。24h時(shí)陽(yáng)性對(duì)照組細(xì)胞數(shù)量少，且大部分細(xì)胞已皺縮，形態(tài)極不規(guī)則，細(xì)胞間隙變大，細(xì)胞中可見顆粒樣物質(zhì)，120h時(shí)幾乎所有陽(yáng)性對(duì)照組細(xì)胞已脫落死亡。見圖1。

2.2 MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果

陰性對(duì)照組、純鈦組及25%、50%、100%C/CSiC組的OD值隨時(shí)間的推移逐漸增大，從96h開始細(xì)胞的增長(zhǎng)進(jìn)入平臺(tái)期，而陽(yáng)性對(duì)照組細(xì)胞的OD值隨時(shí)間的推移逐漸減少，至120h已基本達(dá)到空白對(duì)照組的OD值水平。見圖2。

隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，陰性對(duì)照組、純鈦組、25%、50%、100%C/C-SiC組的OD值也相應(yīng)增加，與培養(yǎng)時(shí)間成正線性關(guān)系，顯示細(xì)胞生長(zhǎng)較快。陽(yáng)性對(duì)照組隨著時(shí)間的增加OD值減少，表示細(xì)胞生長(zhǎng)受到抑制及破壞。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，各時(shí)間點(diǎn)陽(yáng)性對(duì)照組與其他組比較OD值的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），25%、50%、100%C/C-SiC組與陰性對(duì)照組和純鈦組比較、純鈦組與陰性對(duì)照組比較，OD值的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。純鈦組及25%、50%、100%C/C-SiC組細(xì)胞毒性為0或1級(jí)，表現(xiàn)出很輕微的細(xì)胞毒性，陽(yáng)性對(duì)照組細(xì)胞毒性為2～4級(jí)，表現(xiàn)出很明顯的細(xì)胞毒性。見表2。

表1不同培養(yǎng)時(shí)間點(diǎn)各組的OD值（±s）Ta b.1ODv a l u e a t d i f f e r e n t c u l t u r e t i m e p o i n t s（±s）Gr o u p 24h 48h 72h 96h 120h Bl a n k c o n t r o l g r o u p 0.139±0.009 0.166±0.009 0.207±0.037 0.197±0.021 0.231±0.034Ne g a t i v e c o n t r o l g r o u p 0.696±0.0361） 0.848±0.0371） 0.921±0.0321） 1.231±0.1751） 1.205±0.1021）Po s o t i v e c o n t r o l g r o u p 0.516±0.025 0.394±0.015 0.379±0.033 0.415±0.036 0.324±0.016Ti t a n i u m g r o u p 0.690±0.0241） 0.768±0.0501） 0.862±0.1111） 1.241±0.0831） 1.202±0.1031）25%C/C-Si Cg r o u p 0.691±0.0371） 0.793±0.0561） 0.768±0.0601），2） 1.248±0.0371） 1.258±0.2011）50%C/C-Si Cg r o u p 0.643±0.0421） 0.699±0.0371），2） 0.789±0.0381），2） 1.169±0.0761） 1.079±0.0911）100%C/C-Si Cg r o u p 0.641±0.0311） 0.694±0.1191） 0.804±0.1961） 1.026±0.1411） 1.195±0.1741）1）P ＜ 0.01v s p o s i t i v e c o n t r o l g r o u p；2）P ＜ 0.05v s n e g a t i v e c o n t r o l g r o u p.

2.3 溶血試驗(yàn)結(jié)果

C/C-SiC樣品與純鈦的溶血率均為0.156%，小于5%，C/C-SiC樣品無明顯的溶血反應(yīng)存在。

2.4 Annexin V-FITC/PI雙標(biāo)記流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果

100 %C/C-SiC組、純鈦組、陰性對(duì)照組均有大量活細(xì)胞集中于左下象限，早期凋亡細(xì)胞量少，陽(yáng)性對(duì)照組右下象限可見明顯增多的早期凋亡細(xì)胞。100%C/C-SiC組4個(gè)象限的細(xì)胞比例與純鈦組和陰性對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），陽(yáng)性對(duì)照組的早期凋亡、正常細(xì)胞含量與其他任一組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見圖3，表3。

表2不同培養(yǎng)時(shí)間點(diǎn)各組細(xì)胞RGR與細(xì)胞毒性等級(jí)Ta b.2RGRa n d c y t o t o x i c i t y l e v e l a t d i f f e r e n t c u l t u r e t i me p o i n t s 24h 48h 72h 96h 120h RGR（%） Cytotoxicity RGR（%） Cytotoxicity RGR（%） Cytotoxicity RGR（%） Cytotoxicity RGR（%） Cytotoxicity Negative control group 100.00 0 100.00 0 100.00 0 100.00 0 100.00 0Positive control group 67.68 2 33.43 3 24.09 4 21.08 4 9.55 4Titanium group 98.92 1 88.27 1 91.74 1 100.97 0 99.69 125%C/C-SiCgroup 99.10 1 91.94 1 78.57 1 101.64 0 105.44 050%C/C-SiCgroup 90.48 1 78.15 1 81.51 1 94.00 1 87.06 1100%C/C-SiCgroup 90.13 1 77.42 1 83.61 1 80.17 1 98.97 1Group

表3流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果（±s，%）Ta b.3Th e r e s u l t s o f f l o wc y t o me t r y（±s，%）Cells Negative control group Titanium group 100%C/C-SiCgroup Positive control group V-/PI-（LL）89.07±0.161）88.19±1.261）88.16±0.851）81.94±0.79V+/PI-（LR）5.35±0.411）6.05±0.571）5.35±0.151）12.86±0.90V+/PI+（UR） 5.07±0.24 5.29±0.90 5.13±0.89 4.75±0.14V-/PI+（UL） 0.51±0.16 0.47±0.08 0.35±0.12 0.45±0.131）P＜0.05vs positive control group.

3 討論

C/C的碳纖維在特殊角度下編織而成的，具有一定的韌性，符合天然牙在牙槽窩內(nèi)有一定生理動(dòng)度的特性，Meijer等［5］提出，柔性材料的種植體與骨發(fā)生柔韌的結(jié)合，種植體能更好地把應(yīng)力傳遞到周圍的骨組織，因此它可能是硬性種植體很有前途的替代品。C/C在作為生物材料應(yīng)用方面人們做了較多的研究，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)無細(xì)胞毒性［6，7］，具有很好的細(xì)胞相容性能。在20世紀(jì)90年代初，烏克蘭國(guó)家科學(xué)中心哈里科夫技術(shù)物理研究院就展開了C/C作為人工骨組織替換材料方面的大量研究，用該材料生產(chǎn)的人工骨段、關(guān)節(jié)頭都已成功應(yīng)用于臨床，并且取得良好的效果。然而C/C也有不足之處，如材料表面摩擦或長(zhǎng)期存在體內(nèi)其碳顆粒會(huì)脫落，隨著體液的流動(dòng)部分沉積于體表形成“黑膚效應(yīng)”。C/C-SiC是在C/C的基礎(chǔ)上利用化學(xué)氣相滲透技術(shù)把SiC基體通過氣相滲透制得，其每束碳纖維表面覆蓋一層熱解碳層然后再由氣相滲透的SiC基體覆蓋，成為了一體材料，因此材料有效阻止了熱解碳層的暴露與碳顆粒的脫落，強(qiáng)度也隨之大大提高。

體外細(xì)胞培養(yǎng)法是研究生物相容性的常用方法之一，體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)是評(píng)價(jià)生物安全性最早、最重要且又應(yīng)用廣泛的方法。MTT法是檢測(cè)材料細(xì)胞毒性的常用方法。本實(shí)驗(yàn)選用L929小鼠成纖維細(xì)胞系作為細(xì)胞毒性的試驗(yàn)對(duì)象，該細(xì)胞系具有易培養(yǎng)與傳代、穩(wěn)定、可重復(fù)性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，在細(xì)胞毒性試驗(yàn)中被常規(guī)地選用。實(shí)驗(yàn)對(duì)材料浸提液的3個(gè)稀釋濃度的細(xì)胞毒性進(jìn)行一系列連續(xù)的時(shí)間點(diǎn)監(jiān)測(cè)，這樣更實(shí)際地反映出浸提液濃度及時(shí)間的變化對(duì)細(xì)胞增殖度的影響。MTT結(jié)果中，只有48h時(shí)的50%C/C-SiC組和72h時(shí)的25%C/C-SiC組和50%C/CSiC組的OD值與陰性對(duì)照組的OD值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但這3個(gè)組與純鈦組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。其他的純鈦組、25%C/C-SiC組、50%C/C-SiC組、100%C/C-SiC組與陰性對(duì)照組的OD值差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），表明C/CSiC和純鈦一樣具有良好的細(xì)胞相容性能。陽(yáng)性對(duì)照組與任何一組的OD值差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），說明鉛有明顯細(xì)胞毒性。由于實(shí)驗(yàn)用的C/CSiC來自工業(yè)用材料，不是特殊生產(chǎn)的生物醫(yī)用材料，材料在生產(chǎn)過程中可能會(huì)存在某些雜質(zhì)，雜質(zhì)隨浸提液釋出而對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生影響，這可能是實(shí)驗(yàn)中個(gè)別C/C-SiC組與陰性對(duì)照組OD值的差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的原因之一。

材料植入體內(nèi)后可與血液接觸，若材料存在溶血因素，則會(huì)引起血細(xì)胞的破壞。急性溶血試驗(yàn)作為評(píng)價(jià)與骨和軟組織長(zhǎng)期接觸材料的生物安全性測(cè)試方法之一，比較敏感地反映材料對(duì)紅細(xì)胞的影響。溶血試驗(yàn)也被認(rèn)為是細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)的一個(gè)補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)［8］。按照中國(guó)醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，急性溶血試驗(yàn)陰性對(duì)照組吸光度值不大于0.03、陽(yáng)性對(duì)照組吸光度值在（0.8±0.3）時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果靈敏度較高，本實(shí)驗(yàn)符合這一要求。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見，C/C-SiC與純鈦一樣，其溶血率為0.156%，小于5%，無明顯溶血反應(yīng)存在。

在材料的生物相容性評(píng)價(jià)中，細(xì)胞凋亡的發(fā)生與材料的性質(zhì)或結(jié)構(gòu)有關(guān)，對(duì)凋亡過程的分析有助于了解組織與材料的相互作用［9］。流式細(xì)胞計(jì)量術(shù)被廣泛應(yīng)用于分析細(xì)胞活性，它能夠探測(cè)細(xì)胞凋亡途徑。由散點(diǎn)圖可發(fā)現(xiàn)，陰性對(duì)照組、100%C/C-SiC組、純鈦組大量細(xì)胞集中于左下象限，說明正常細(xì)胞含量多，生長(zhǎng)狀況良好，任二者之間未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，由此可見C/C-SiC不促進(jìn)細(xì)胞的凋亡。而陽(yáng)性對(duì)照組右下象限見明顯增多的早期凋亡細(xì)胞，與其他任一組的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明純鉛浸提液促進(jìn)細(xì)胞的凋亡，具有細(xì)胞毒性。當(dāng)然，本實(shí)驗(yàn)從單一時(shí)間點(diǎn)來檢測(cè)細(xì)胞的凋亡，這可能并不是代表細(xì)胞凋亡的真實(shí)程度，因?yàn)榧?xì)胞凋亡是一個(gè)復(fù)雜并且不同步的過程［9］，所以未來的實(shí)驗(yàn)要把時(shí)間因素對(duì)細(xì)胞凋亡的影響考慮在內(nèi)。

細(xì)胞毒性試驗(yàn)是評(píng)價(jià)材料生物相容性的初級(jí)試驗(yàn)，即一個(gè)篩選試驗(yàn)，確定材料能不能進(jìn)行下一步的研究［10］。目前，C/C-SiC主要應(yīng)用于航天航空和高溫工業(yè)領(lǐng)域，在生產(chǎn)過程中可能存在一些對(duì)人體健康有害的物質(zhì)。因此，在進(jìn)行下一步動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究之前，需要對(duì)有害物質(zhì)的種類和含量進(jìn)行測(cè)定，并設(shè)計(jì)去除有害的雜質(zhì)，研制符合生物醫(yī)用材料標(biāo)準(zhǔn)的生產(chǎn)工藝。

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（編輯 陳 姜，英文編輯 劉寶林）

Cytotoxicity of Carbon Fiber-reinforced C-SiCBinary Matrix Composite（C/C-SiC） for Dental Implant Materials

FANGTie-jun1，ZHOUQun1，DILi-sha2，TANZhao-jun1，DENGJing-yi3
（1.Department of Stomatology，Shengjing Hospital，China Medical University，Shenyang 110004，China；2.Pediatric Dentistry，School of Stomatology，China Medical University，Shenyang 110002，China；3.Institute of Metal Research，Chinese Academy of Sciences，Shenyang 110016，China）

ObjectiveTo evaluate the effect of C/C-SiCcomposite on the growth and apoptosis of mouse fibroblast cells.MethodsMouse fibroblasts （L929）were cultured in a series of elution of specimen，MTTassay was performed to investigate the relative growth rates；Hemolytic reaction of specimen to blood cells was detected by acute hemolysis test；Cell scatter diagrams of elutes of negative control group，100%C/C-SiCgroup，titanium group，positive control group was detected by Annexin V-FITC/PIdouble staining，the viable，early apoptotic，late apoptotic and necrosis cells were calculated.ResultsThe cytotoxicity of C/C-SiCcomposite was grade 1，acute hemolysis rate was 0.156%.There were no significant differences between the negative control group and C/C-SiCgroup or between the titanium group and C/CSiCgroup（P>0.05）；The FACSimages showed that the proportions of cells in four quadrants of titanium group，negative control group were not statistically different from C/C-SiCgroup （P>0.05），there were more early apoptotic cells and less viable cells in positive control group than that of other three groups （P<0.05）.ConclusionThe C/C-SiCcomposite was compatible with tested cells，with a relative background of biological safty.

cytotoxicity；hemolysis；MTT；fibroblast L929；composite；apoptosis

R783.1

A

0258-4646（2011）05-0417-05

doi CNKI：21-1227/R.20110523.1813.003

http://www.cnki.net/kcms/detail/21.1227.R.20110523.1813.003.html

方鐵鈞（1983-），男，碩士研究生.

周群，E-mail：zhouqun_888@163.com

2010-11-04

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2011-05-1815:25