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        不同粒徑的人參總皂苷脂質(zhì)體的制備

        2011-02-02 06:06:02陳新梅
        藥學(xué)研究 2011年4期
        關(guān)鍵詞:總皂苷卵磷脂分布圖

        陳新梅

        (山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,山東濟(jì)南 250355)

        粒徑是評(píng)價(jià)脂質(zhì)體質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)之一,粒徑的大小能影響脂質(zhì)體的吸收[1]、體內(nèi)分布[2]、組織靶向性[3]、穩(wěn)定性[4]、療效及毒性[5]。本研究以人參總皂苷 (TSPG)為模型藥制備脂質(zhì)體,采用超聲、加入吐溫 -80、泊洛沙姆、PEG-4000、PEG-6000等方法來(lái)制備不同粒徑的人參總皂苷脂質(zhì)體。

        1 材料

        1.1 儀器 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 (上海亞榮生化儀器廠);UV-3010紫外分光光度計(jì) (日本島津);SB 2200型超聲儀 (上海必能信超有限公司);AWM 2000型激光粒度散射儀 (英國(guó)馬爾文公司)。

        1.2 試藥 蛋黃卵磷脂 (上海太偉藥業(yè)有限公司);膽固醇(南京奧多福尼生物科技有限公司,進(jìn)口分裝);人參總皂苷(吉林省宏久生物科技股份有限公司)。

        2 方法

        2.1 UV法測(cè)定 TSPG的含量 具體測(cè)定方法參考文獻(xiàn)[6]。

        2.2 薄膜分散法制備不同粒徑的 TSPG脂質(zhì)體 精密稱取處方量的蛋黃卵磷脂、膽固醇、TSPG溶解于 10 mL無(wú)水乙醇,40℃減壓蒸發(fā)成膜,10 mL PBS緩沖液水化薄膜,形成乳白色的乳狀液。

        2.2.1 超聲法 (編號(hào) 1) 按照 2.2項(xiàng)下的制備工藝制備TSPG脂質(zhì)體,將其置于超聲儀中超聲 10 min,即得。

        2.2.2 加入 Tween-80(編號(hào) 2) 稱取處方量蛋黃卵磷脂、膽固醇、TSPG,按照所制得的脂質(zhì)體乳狀液體積的 1%量取Tween-80加入。然后按照 2.2項(xiàng)下的制備工藝制備 TSPG脂質(zhì)體,即得。

        2.2.3 加入 PEG-4000(編號(hào) 3) 稱取處方量蛋黃卵磷脂、膽固醇、TSPG,按照所用蛋黃卵磷脂的 5%量取 PEG-4000加入。然后按照 2.2項(xiàng)下的制備工藝制備 TSPG脂質(zhì)體,即得。

        2.2.4 加入 PEG-6000(編號(hào) 4) 稱取處方量蛋黃卵磷脂、膽固醇、TSPG,按照所用蛋黃卵磷脂的 5%量取 PEG-6000加入。然后按照 2.2項(xiàng)下的制備工藝制備 TSPG脂質(zhì)體,即得。

        2.2.5 加入泊洛沙姆 (編號(hào) 5) 稱取處方量蛋黃卵磷脂、膽固醇、TSPG,按照 2.2項(xiàng)下的制備工藝,使用含 5%泊洛沙姆的 PBS緩沖液制備 TSPG脂質(zhì)體,即得。

        2.2.6 加入泊洛沙姆、Tween-80(編號(hào) 6) 稱取處方量蛋黃卵磷脂、膽固醇、TSPG,按照所制得的脂質(zhì)體乳狀液體積的1%量取 Tween-80加入。按照 2.2項(xiàng)下的制備工藝,使用含 5%泊洛沙姆的 PBS緩沖液制備 TSPG脂質(zhì)體,即得。

        2.2.7 加入泊洛沙姆、Tween-80,并進(jìn)行超聲 (編號(hào) 7)按照 2.2.6項(xiàng)的制備工藝制備 TSPG脂質(zhì)體,將其置于超聲儀中超聲 10 min,即得。

        2.3 不同粒徑的 TSPG脂質(zhì)體包封率、載藥量 取 TSPG脂質(zhì)體 1 mL置于透析袋內(nèi),透析袋外為 PBS緩沖液 100 mL。在 37℃、300 r·min-1條件下進(jìn)行動(dòng)態(tài)透析試驗(yàn)。分別于 0、1、2、3、4、5、6 h吸取透析袋外液 10 mL,并補(bǔ)加等量新鮮 PBS緩沖溶液。采用UV法測(cè)定透析液中的 TSPG濃度。根據(jù)下式計(jì)算包封率、載藥量:

        包封率%=(1-透析液中 TSPG的含量/脂質(zhì)體中 TSPG的含量)×100%

        載藥量%=(脂質(zhì)體中 TSPG的含量/固體膜材的總投入量)×100%

        2.4 粒徑的測(cè)定 將制備的 TSPG脂質(zhì)體乳狀液充分振搖后,分別取適量用AWM 2000型激光粒徑測(cè)定儀測(cè)其粒徑及分布。

        3 結(jié)果與分析

        3.1 輔料對(duì) TSPG含量測(cè)定的影響 TSPG的最大吸收波長(zhǎng)見(jiàn)圖 1。泊洛沙姆、PEG-4000、PEG-6000、吐溫 -80溶液在 200~400 nm的 UV掃描圖見(jiàn)圖 2~5,TSPG在 202 nm處呈現(xiàn)最大吸收,泊洛沙姆、PEG-4000、PEG-6000、Tween -80在此處無(wú)吸收,對(duì) TSPG的含量測(cè)定無(wú)影響。

        圖1 100μg·mL-1人參總皂苷溶液在200~400 nm的紫外掃描圖

        圖 2 5%泊洛沙姆溶液 200~400 nm的紫外掃描圖

        圖 3 2.5%PEG-4000溶液 200~400 nm的紫外掃描圖

        圖 4 2.5%PEG-6000溶液 400~200 nm的紫外掃描圖

        圖 5 1%吐溫 -80溶液 400~200 nm的紫外掃描圖

        3.2 不同粒徑的 TSPG脂質(zhì)體的包封率與載藥量見(jiàn)表 1。

        表 1 不同粒徑 TSPG脂質(zhì)體的包封率與載藥量

        3.3 TSPG脂質(zhì)體的粒徑 TSPG脂質(zhì)體的粒徑結(jié)果見(jiàn)表 2,脂質(zhì)體粒徑分布見(jiàn)圖 6~11。

        表 2 不同方法制備的人參總皂苷脂質(zhì)體的粒徑

        圖 6 粒徑分布圖(編號(hào) 1)

        圖 7 粒徑分布圖(編號(hào) 2)

        圖 8 粒徑分布圖(編號(hào) 3)

        圖 9 粒徑分布圖(編號(hào) 4)

        圖 10 粒徑分布圖(編號(hào) 5)

        圖 11 粒徑分布圖(編號(hào) 6)

        圖 12 粒徑分布圖(編號(hào) 7)

        4 討論

        本研究采用超聲法、加入吐溫 -80、泊洛沙姆、PEG-4000、PEG-6000等的方法制備了不同粒徑的 TSPG脂質(zhì)體。超聲法利用超聲波在液體中的分散效應(yīng),使液體產(chǎn)生空化的作用,達(dá)到減小粒徑的目的;吐溫 -80、泊洛沙姆屬于表面活性劑,能降低脂質(zhì)體的粒徑;PEG-4000和 PEG-6000常作為長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體的修飾材料,因此本研究也考察了其對(duì)粒徑的影響。不同粒徑的脂質(zhì)體,其包封率和載藥量亦有差別,因此在考察脂質(zhì)體的粒徑時(shí),必須同時(shí)結(jié)合包封率和載藥量同時(shí)判定才具有意義。

        [1] 孫維彤,鄒偉偉,李愛(ài)國(guó),等.脂質(zhì)體粒徑對(duì)促進(jìn)托氟啶口服吸收的影響 [J].山東大學(xué)學(xué)報(bào) (醫(yī)學(xué)版),2007, 45(6):639-643.

        [2] 周衛(wèi),平其能,王麗杰.羥喜樹堿脂質(zhì)體的粒徑對(duì)組織分布的影響[J].中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2005,36(2):125 -128.

        [3] 楊莉斌,胡榮.抗腫瘤藥物脂質(zhì)體粒徑對(duì)腫瘤靶向性的影響[J].國(guó)外醫(yī)學(xué) (藥學(xué)分冊(cè)),2007,34(3):174-177.

        [4] 鄒佳,于彬,宋陽(yáng),等.粒徑和質(zhì)量濃度對(duì)輔酶 Q10脂質(zhì)體光解動(dòng)力學(xué)的影響[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2010,27 (1):24-28.

        [5] 王金戌,李春雷,張?zhí)m,等.粒徑對(duì)米托蒽醌脂質(zhì)體療效及毒性的影響 [J].河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2008,29(4): 555-556.

        [6] 陳新梅.人參總皂苷脂質(zhì)體的制備及質(zhì)量評(píng)價(jià)[J].齊魯藥事,2001,30(2):63-64.

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