張 雷，靳守東，王曉玲，盧 燕#(.首都醫(yī)科大學附屬北京兒童醫(yī)院，北京 00045;.中國人民解放軍總后勤部衛(wèi)生部藥品儀器檢驗所，北京 0007)

富馬酸盧帕他定(fumarate rupatadine)是西班牙Uriach制藥公司研制的具抗組胺和抗血小板活化因子(PAF)雙重作用的抗過敏藥物，適應證為季節(jié)性和常年性過敏性鼻炎。PAF可引起支氣管的收縮和血管通透性的增強，從而導致流涕和鼻充血。目前，臨床上使用的抗過敏藥均只有抗組胺活性，而沒有PAF拮抗作用，盧帕他定是既具有抗阻胺作用又拮抗PAF活性的抗過敏藥［1，2］。由于其生產工藝使用到甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃、氯仿、甲苯9種溶劑，故須對此9種溶劑的殘留量加以控制。本文采用頂空氣相色譜法同時對9種殘留溶劑進行測定［3］，操作簡便，重現性好，結果準確可靠。

1 儀器與試藥

PE-9000氣相色譜儀、PE TurboMatrix 16頂空進樣器、FID檢測器;富馬酸盧帕他定為國內仿制產品，批號為090316、090318、090319，所用試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗

色譜柱為 DB-624(30 m×0.32 mm×1.8 μm)石英毛細管柱;柱溫起始溫度為30℃，保持10 min，然后以20℃·min-1率升至90℃，保持3 min，然后以40℃·min-1的速率升至210℃，保持1 min，氣化室溫度為200℃，檢測器溫度為300℃;載氣為氮氣，柱頭壓力為 10 psi，分流比為 5∶1，氫氣流速為 30 mL·min-1，空氣流速為300 mL·min-1;頂空氣化室溫度為60℃，定量環(huán)溫度65℃，連接管溫度170℃，加壓時間3 min，定量環(huán)平衡時間0.5 min，樣品平衡時間35 min，頂空進樣1.0 mL。理論板數按甲苯峰計應＞2 000，各相鄰峰的分離度應符合要求。

2.2 對照品溶液的配制

精密量取甲醇 950 μL、乙醇 1 580 μL、乙腈 130 μL、二氯甲烷 113 μL、正己烷 110 μL、乙酸乙酯 1 390μL、四氫呋喃 203 μL、氯仿 10 μL、甲苯 257 μL，置 100 mL 量瓶中，加二甲亞砜溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備液，再從中精密量取1 mL置10 mL量瓶中，加二甲亞砜稀釋至刻度，搖勻，精密量取2 mL置20 mL頂空進樣瓶中，加蓋密封，作為對照品溶液，見圖1。

2.3 專屬性

待測的9種殘留溶劑、空白溶劑二甲亞砜及樣品均能有效分離，互不干擾，能夠準確測出待測溶劑的殘留量。

2.4 精密度試驗

圖1 氣相色譜圖Fig 1 Gas chromatogram

將對照品溶液連續(xù)重復進樣6次，計算甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃、氯仿、甲苯峰面積的RSD(%)分別為 2.1、1.6、4.2、3.6、4.4、2.3、2.8、4.7、3.2。

2.5 線性范圍及標準曲線

分別精密量取對照品儲備液各 0.6、0.8、1.0、1.2、1.4 mL置10 mL量瓶中，加二甲亞砜稀釋至刻度，搖勻。以各溶液濃度(mg·mL-1)為橫坐標，峰面積為縱坐標進行線性回歸，結果見表1，結果表明，在各自的濃度范圍內均線性良好。

表1 標準曲線的回歸方程Tab 1 Regression equation of standard curve

2.6 最低檢測限試驗

將9種溶劑用二甲亞砜逐步稀釋，直到檢測峰高為基線噪聲的2～3倍為止，結果甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃、氯仿、甲苯的檢測限(ng)分別為1.5、1.2、4.1、6.0、2.9、2.5、1.8、7.4、1.1。

2.7 回收率試驗

采用加樣回收率法，精密稱取樣品500 mg，分別加入3個不同濃度的對照品，按樣品測定方法進行測定，結果見表2。

表2 回收率試驗結果(n=3)Tab 2 Results of recovery rate test(n=3)

2.8 樣品測定

精密稱取3批樣品(批號:090316、090318、090319)各 500 mg置20 mL頂空進樣瓶中，精密加入二甲亞砜2 mL，60℃水浴加熱使溶解，加蓋密封，作為供試品溶液。測定結果表明，3批樣品中甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃、氯仿、甲苯均未檢出。

3 討論

根據樣品溶解情況以及《中華人民共和國藥典(二部)》(2005年版)［4］和人用藥品注冊技術要求國際協(xié)調會(ICH)［5］殘留溶劑的限度要求確定對照品溶液的配制濃度(甲醇≤3 000 ppm、乙腈≤410 ppm、二氯甲烷≤600 ppm、正己烷≤290 ppm、四氫呋喃≤720 ppm、氯仿≤60 ppm、甲苯≤890 ppm，均為二類溶劑;乙醇、乙酸乙酯≤5 000 ppm，為三類溶劑)。配制時通過各溶劑的密度換算，采用量取方法比稱量方法省時省力。選擇DB-624(30 m×0.32 mm×1.8 μm)石英毛細管柱及適當的柱溫等色譜條件，使得本法可以同時檢測9種有機溶劑，并能與空白溶劑有效分離。

根據《中華人民共和國藥典(二部)》(2005年版)［4］和ICH［5］殘留溶劑的限度要求，本法規(guī)定甲醇量不得過 0.3%、乙腈不得過0.041%、二氯甲烷不得過0.06%、正己烷不得過0.029%、四氫呋喃不得過0.072%、氯仿不得過0.006%、甲苯不得過0.089%、乙醇和乙酸乙酯不得過0.5%。樣品測定結果表明:3批樣品(批號:090316、090318、090319)中 9種殘留溶劑均未檢出，3批樣品均符合規(guī)定?！吨腥A人民共和國藥典(二部)》(2005年版)附錄Ⅷ P［4］規(guī)定精密度 RSD≤10%，本法連續(xù)進樣6次，結果均符合中國藥典的要求。本法操作簡便，分離度、重現性良好，結果準確可靠，因此本法適用于富馬酸盧帕他定中9種殘留溶劑的檢測。

［1］卜 今，陳志強.盧帕他定—新型的組胺 H1受體和血小板活化因子受體雙重拮抗劑［J］.中國中西醫(yī)結合皮膚性病學雜志，2006，5(3):182.

［2］符傳山.HPLC法測定富馬酸盧帕他定的含量［J］.中國熱帶醫(yī)學，2009，9(7):1352.

［3］潘棟輝，楊 敏，徐宇平，等.頂空氣相色譜法測定依匹必利原料藥中有機溶劑殘留量［J］.中國藥房，2009，20(25):1976.

［4］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)［S］.2005年版.北京:化學工業(yè)出版社，2005:附錄56.

［5］周海鈞.藥品注冊的國際技術要求(質量部分)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2000:87.