王亞軍

（中農(nóng)威特生物科技股份有限公司，甘肅蘭州 730046）

牛病毒性腹瀉/黏膜病的診斷及防制

王亞軍

（中農(nóng)威特生物科技股份有限公司，甘肅蘭州 730046）

牛病毒性腹瀉/黏膜病簡稱病毒性腹瀉或黏膜病，1946年由Olafson等在紐約首次發(fā)現(xiàn)，牛病毒性腹瀉病(BVD)是由牛病毒性腹瀉病毒引起的牛傳染病,其特征是急性糜爛性口炎、消化道黏膜糜爛壞死、胃腸炎和腹瀉。在多數(shù)牛群中感染率高，但臨床發(fā)病率低。本病呈全球性分布，各養(yǎng)牛業(yè)發(fā)達國家均有流行。我國存在著嚴(yán)重的污染。

一、病原學(xué)

本病的病原是牛腹瀉病毒, 是單股RNA，屬于黃病毒科瘟病毒屬。病毒粒子略呈圓形,但也常呈變形性。有囊膜,病毒表面有明顯纖突。病毒粒子直徑為50～80 nm。英國將53個毒株區(qū)分為7個不同血清型。病毒可在胎牛的腎、脾、睪丸、氣管、鼻甲、肺、皮膚等組織細(xì)胞中生長。常用的是胎牛的腎、鼻甲的原代細(xì)胞或二倍體細(xì)胞,有的毒株有致細(xì)胞病變作用,有的毒株則沒有。根據(jù)病毒對細(xì)胞的病變效應(yīng),將病毒分為兩個生物型,即致細(xì)胞病變型(CP)和非致細(xì)胞病變型(N CP)。病毒對溫度敏感,56℃很快可以滅活,在低溫下穩(wěn)定,真空凍干的病毒在-60℃～-70℃可保存多年。對乙醚、氯仿、胰酶、pH值3敏感。急性高熱期病牛的血液含有大量病毒。常采集流產(chǎn)胎兒的脾和骨髓分離病毒，本病毒能在胎牛腎、睪丸、肺、胎羊睪丸和豬腎細(xì)胞上生長傳代。本病毒與豬瘟病毒和邊界病毒同屬，有密切的抗原關(guān)系。

二、流行病學(xué)

（一）傳染源 病牛和帶毒牛是本病的主要傳染源，帶毒牛的分泌物或排泄物包括鼻汁、唾液、精液、糞尿、淚液及乳汁均可分離出病毒。病牛急性發(fā)熱期，血液中含有大量病毒，一般可保持21 d，隨著中和抗體的出現(xiàn)，血液中病毒逐漸消失，脾、骨、髓、腸系膜淋巴結(jié)和直腸組織含毒量較高。

（二）傳播途徑 直接或間接接觸均可傳播本病。主要由于攝食被病毒污染的飼料、飲水而感染，也可由于病畜咳嗽、劇烈呼吸噴出的傳染性飛沫而使易感動物感染，另外通過運輸工具，飼養(yǎng)用具或者通過自然界的某些宿生如鹿、羊、豬也可以傳播本病。應(yīng)用被病毒污染的其他疫苗或未經(jīng)消毒的注射器，也可引起本病，帶毒公牛能長期從精液中排出病毒，通過配種可傳染給母牛。暫時感染或持續(xù)性感染的母?？梢酝ㄟ^胎盤傳染給胎兒，可引起流產(chǎn)及犢牛的先天損失，也可能產(chǎn)下貌似正常的持續(xù)性感染的犢牛，持續(xù)性感染母牛其后裔也常是持續(xù)感染牛，便形成母性持續(xù)感染家族。

（三）易感動物 不同品種、性別、年齡的牛都有易感性，特別是幼齡牛，急性病例中6個月至2歲牛較多。綿羊、山羊雖然自然感染，產(chǎn)生抗體，但很少有癥狀。美國的白尾鹿和驢鹿也有自然感染報道。近年來研究表明，BVDV可自然感染豬，并引起類似豬瘟的癥狀和病理變化。

（四）流行特點 大多數(shù)呈隱性感染。根據(jù)各國血清學(xué)的調(diào)查，牛群中有高度的感染率。本病在冬末和春天發(fā)生較多，新發(fā)病牛群呈暴發(fā)流行，發(fā)病后可獲得長期堅強免疫，老疫區(qū)為散發(fā)。

三、癥狀

牛病毒性腹瀉/黏膜病根據(jù)癥狀不同將其分為以下幾種類型。

（一）黏膜病型 主要侵害犢牛和青年牛， 發(fā)病突然，病牛體溫升高，當(dāng)病程進一步發(fā)展時， 鼻鏡干燥，表皮剝落， 腹瀉持續(xù)數(shù)周， 糞便水樣， 瓦灰色， 惡臭， 內(nèi)含大量粘液和氣泡， 病后幾天鼻鏡、舌、 齒齦、腭、 口腔黏膜充血并有潰瘍； 腹瀉時糞便呈黃色水樣， 惡臭， 多因脫水死亡。

（二） 腹瀉型 表現(xiàn)為間歇性腹瀉、 進行性消瘦， 可發(fā)生跛行、 球節(jié)部皮膚發(fā)紅腫脹， 腹瀉初呈水樣，后內(nèi)含血液和粘液， 并常見排出成片的腸黏膜。

（三）胎兒感染型 懷孕母牛感染后，發(fā)生流產(chǎn)、 死胎、 木乃伊或胎兒發(fā)生小腦發(fā)育不全、 眼睛失明等先天性缺陷。

四、病理變化

本病的特征性損害是食道黏膜糜爛。鼻鏡、鼻孔有糜爛及淺潰瘍。齒銀、上腭、舌面兩側(cè)及頰黏膜也有糜爛。牛極度消瘦,尸僵完全,個別的皮下有紫黑色出血斑,肌肉呈熟肉樣,關(guān)節(jié)囊有淡黃色積液;鼻腔內(nèi)有淡黃色膠凍樣滲出物,氣管內(nèi)有大量膿性分泌物,生前病情嚴(yán)重的有肺出血、 水腫或?qū)嵶?切面有干酪樣物; 心腫大,心包膜有塊狀和條索狀充血,心包積液, 有的胸腔內(nèi)有大量積液;膽囊稍腫大,食道黏膜有縱向排列的條狀出血斑;靠近賁門的瘤胃黏膜有爛斑, 整個瘤胃黏膜呈淡紫紅色;十二指腸黏膜有較規(guī)則的縱向排列的出血條紋,空腸和回腸有點狀或斑狀出血,黏膜呈片狀脫落; 盲腸和大結(jié)腸末端有縱向排列的出血條紋;全身淋巴結(jié)黑灰色。

五、診斷

根據(jù)流行病學(xué)資料、臨床癥狀和特征性病變可以做出初診,確診需作病原學(xué)鑒定和血清學(xué)檢查。由于本病可以發(fā)生持久性的病毒血癥,血液是最好的病毒分離材料,也可采取病畜的骨髓、脾、淋巴結(jié)及呼吸道、眼、鼻分泌物等用于分離病毒。

（一）實驗室診斷1.病原學(xué)檢查。

（1）病料采集。急性發(fā)熱期可采集血液、眼鼻分泌物、尿液；死亡動物可采集甲狀腺、脾臟、腸系膜淋巴結(jié)、骨髓等材料作為病料。

（2）染色鏡檢。病料制成超薄切片或用細(xì)胞培養(yǎng)物制片，負(fù)染后在電鏡下觀察病毒粒子的形態(tài)特征，病毒粒子呈圓形或球形，具有多形性，有囊膜。

（3）分離培養(yǎng)。病料接種于犢牛睪丸、腎、鼻甲細(xì)胞、胎牛肺細(xì)胞等牛源細(xì)胞，培養(yǎng)后可產(chǎn)生細(xì)胞病變：細(xì)胞變圓，間距增大，胞漿內(nèi)出現(xiàn)大小不等邊緣整齊的空泡，細(xì)胞逐漸脫落，形成空斑。

（4）動物接種試驗。選6～8月齡的易感犢牛4頭，分2組。一組用豬瘟疫苗免疫，另一組不免疫作為對照。病料懸液經(jīng)口服或注射同時接種2組犢牛，隔離觀察，免疫組犢牛不發(fā)病，而對照組犢牛則出現(xiàn)本病癥狀。也可用2頭公犢牛，牛病毒性腹瀉/黏膜病和牛傳染性鼻氣管炎病毒中和試驗檢測陰性后，每頭犢牛接種分離毒50 ml(靜脈注射40 ml，滴鼻10 ml)。接種后每天進行臨床觀察和體溫檢測，定期采血做血清中和抗體測定和病毒回收試驗。

2.血清學(xué)試驗。用于牛病毒性腹瀉/黏膜病診斷的血清學(xué)方法有病毒中和試驗、補體結(jié)合試驗、瓊脂擴散試驗、免疫熒光試驗等。

（二）類癥鑒別 本病應(yīng)與牛瘟、口蹄疫、 傳染性水皰性口炎、 傳染性鼻氣管炎、 副結(jié)核病、 惡性卡他熱、 藍(lán)舌病等相鑒別, 其區(qū)別要點如下。

1.牛瘟?？谇火つび袎乃佬圆∽? 有腹瀉, 這一點與黏膜病相似,但牛瘟腹瀉劇烈, 小腸黏膜有壞死性炎癥, 病死率很高。而黏膜病腹瀉糞便從水樣逐步變?yōu)檎吵? 小腸黏膜主要是卡他性炎癥, 腸淋巴結(jié)腫大, 病死率不高, 病程比牛瘟長。

2.口蹄疫。在口腔唇內(nèi)面、 齒齦、 頰部黏膜以及蹄冠皮膚、 趾間、乳頭等處出現(xiàn)水皰為其特征, 病死率低,傳染性強。而黏膜病口腔黏膜雖有糜爛病灶, 但無明顯水皰過程。 此外, 黏膜病病牛會發(fā)生嚴(yán)重的腹瀉, 腹瀉可呈持續(xù)性, 病程長,有一定的病死率。

3.傳染性水皰性口炎。口腔有水皰及糜爛面, 而黏膜病口腔黏膜雖也會有糜爛病灶, 但無明顯水皰過程,而且水皰性口炎除可感染偶蹄獸外, 還可感染單蹄獸,且在自然情況下發(fā)病率低, 發(fā)生死亡者極少, 也沒有腹瀉的癥狀。

4.惡性卡他熱。在口腔黏膜也有糜爛, 鼻黏膜和鼻鏡有壞死病變,此點易與黏膜病相混淆。但惡性卡他熱有幾個本身的主要特點: 一是呈散發(fā)性; 二是全身癥狀重; 三是眼瞼、 頭部腫脹, 眼球發(fā)生特異的上翻狀態(tài),眼角膜渾濁; 四是病死率高。這幾點可與黏膜病相區(qū)別。

5.傳染性鼻氣管炎。傳染性鼻氣管炎又稱壞死性鼻炎。 特征是上呼吸道黏膜發(fā)生炎癥, 而引起膿性鼻漏,鼻黏膜高度充血及出現(xiàn)淺表性潰瘍和壞死, 此點與黏膜病的鼻鏡與口腔黏膜表面糜爛有時易于混淆。但黏膜病的特征癥狀之一即嚴(yán)重的腹瀉以及剖檢時可見胃腸道卡他性、出血性、 潰瘍性乃至壞死性炎癥,而傳染性鼻氣管炎病變主要在呼吸道黏膜呈現(xiàn)炎性變化及淺潰瘍。

6.藍(lán)舌病。本病病牛由于在口唇出現(xiàn)水腫以及硬腭、唇、舌、頰部及鼻鏡有輕微糜爛,因而在臨床上易于黏膜病相混淆。但黏膜病常發(fā)生劇烈腹瀉為其特征癥狀之一,此點藍(lán)舌病是沒有的。

7.副結(jié)核病。副結(jié)核病在臨床上以腹瀉為其特征,腹瀉可以從間歇性腹瀉發(fā)展到持續(xù)性腹瀉, 繼之變?yōu)樗畼拥膰娚錉罡篂a。由于嚴(yán)重腹瀉, 病牛高度貧血和消瘦,并伴有下頜、 胸垂、 腹部水腫, 最后多衰竭死亡。從腹瀉角度看, 在臨床上與黏膜病進行鑒別診斷有一定困難。但應(yīng)注意的是, 黏膜病除有持續(xù)性或間歇性腹瀉外, 其口腔黏膜會反復(fù)發(fā)生壞死和潰瘍, 此點副結(jié)核病沒有。另外, 可用副結(jié)核菌素進行皮內(nèi)反應(yīng), 黏膜病病牛應(yīng)為陰性反應(yīng), 以此也可以區(qū)分。

六、防制

尚無有效療法，但加強護理和對癥治療（尤其為補液）可減少死亡。自然感染后牛群中出現(xiàn)的中和抗體率較高，產(chǎn)生長久的（22月）的免疫力。加強口岸檢疫，嚴(yán)禁從有病國家引進種牛、種羊等動物。從國外引進種用動物時必須進行血清學(xué)檢查，并隔離觀察，避免引入帶毒牛羊。國內(nèi)牛羊調(diào)撥或轉(zhuǎn)運時，也應(yīng)進行嚴(yán)格檢疫，防止本病的發(fā)生和流行。

國外多應(yīng)用弱毒苗，如通過胎牛腎細(xì)胞傳代培育的OreganC24，豬睪丸細(xì)胞連續(xù)傳代致弱的疫苗株，兔體連續(xù)傳代致弱的疫苗株，單獨應(yīng)用或與IBR、副流感3-型疫苗聯(lián)用。疫苗主要用6～8月齡犢牛接種，孕牛禁用。也可用于豬瘟兔化弱毒疫苗進行免疫。但反之用BVDV疫苗免疫預(yù)防豬瘟效果不確實。減毒活疫苗及滅活疫苗可提供有效的保護,通常疫苗在6～10月齡、初乳免疫力消失時接種。

免疫應(yīng)嚴(yán)格遵守生產(chǎn)廠家推薦的使用方法和接種計劃。有證據(jù)顯示,給免疫耐受、持續(xù)感染牛接種一種弱的細(xì)胞病變BVD病毒疫苗可導(dǎo)致嚴(yán)重的黏膜病。滅活疫苗較安全。

加強飼養(yǎng)衛(wèi)生管理,防止本病的傳播。發(fā)生本病時，對病牛要隔離治療或急宰，消毒污染環(huán)境、用具。對未發(fā)病牛群進行保護性限制。

七、建議

在奶牛胚胎移植過程中，影響到同期發(fā)情率及受胎率的因素很多，其中受體牛的營養(yǎng)狀況至關(guān)重要，且對于養(yǎng)殖場來講易于控制， 提高受體牛的營養(yǎng)狀況并保持良好膘情及體況是對欲開展胚胎移植養(yǎng)殖場的一個重要要求。