姜碧

266例男性原發(fā)不孕患者染色體核型及Y染色體微缺失分析

姜碧

目的 對(duì)染色體核型異常及Y染色體微缺失與男性原發(fā)不育相關(guān)性進(jìn)行分析,以探討染色體核型異常Y染色體AZF微缺失檢測(cè)在男性不育中的應(yīng)用價(jià)值。方法 東莞計(jì)劃生育服務(wù)中心男性不育患者266例作為研究對(duì)象，進(jìn)行外周血染色體分析及Y染色體AZF區(qū)域微缺失檢測(cè)。結(jié)果 266例男性原發(fā)不育患者進(jìn)行染色體核型檢查，發(fā)現(xiàn)異常核型50例（18.80%）；進(jìn)行Y染色體微缺失檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)存在Y染色體微缺失24人（9.02%)，其中染色體核型異常的病人也檢出了Y染色體微缺失。結(jié)論 男性原發(fā)不育與染色體核型異常及Y染色體微缺失關(guān)系密切，對(duì)男性原發(fā)不育患者進(jìn)行染色體核型及Y染色體微缺失檢測(cè)是非常重要的。

不孕癥；染色體核型；Y染色體微缺失

不孕癥嚴(yán)重影響家庭幸福和夫妻和睦，是21世紀(jì)危害人類生殖健康的主要疾病之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，其中30%以上的患者是由于遺傳學(xué)異常引起的[1]。只有深入地了解原因，才能有效地采取治療手段及補(bǔ)救措施。本文收集2008～2009年來(lái)東莞計(jì)劃生育服務(wù)中心266例前來(lái)就診的男性不育患者的臨床資料，擬從細(xì)胞及分子水平上深入地探討不育原因，現(xiàn)將其染色體核型分析結(jié)果及Y染色體微缺失情況報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

原發(fā)不育組266例男性患者來(lái)自東莞計(jì)劃生育服務(wù)中心，年齡（28±6）歲，入選標(biāo)準(zhǔn)[2]：同房2a未受孕，有正常性生活未避孕，既往從未妊娠者，并排除全身性疾病患者。

1.2 研究方法

所有患者均進(jìn)行常規(guī)身體及生殖器檢查、精液活率檢查及精子動(dòng)態(tài)分析、性激素檢查、外周血染色體及Y染色體微缺失檢查；必要時(shí)行精漿抗精子抗體和血清抗精子抗體等檢查。AZF微缺失PCR檢測(cè)引物由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司提供，選擇6個(gè)序列特異STS 位點(diǎn):sY84, sY86, sY127, sY134,sY254, sY255，以及SRY和ZFX/Y序列檢測(cè)有效性。外周血培養(yǎng)基由廣州拜迪公司及湖南湘雅醫(yī)科大學(xué)提供，胰酶消化及吉姆薩染色，進(jìn)行外周血染色體核型分型。

2 結(jié)果

2.1 266例男性原發(fā)不育癥患者的染色體核型檢查，發(fā)現(xiàn)異常核型50例（18.80%），異常核型情況及其表型詳見(jiàn)表1。性不育癥患者染色體異常以性染色體數(shù)目異常最常見(jiàn)，多為47，XXY及其嵌合體在有絲分裂過(guò)程中X染色體不分離所致，導(dǎo)致睪丸功能嚴(yán)重受損[3]。我們發(fā)現(xiàn)的1例46，XY,inv（9），可能是由于染色體倒位產(chǎn)生不平衡配子產(chǎn)生的少精，影響受孕。我們還發(fā)現(xiàn)1例46,XY，del（Y）(q11)，該患者還同時(shí)有AZFa,AZFb區(qū)缺失，可能因此表現(xiàn)為無(wú)精，導(dǎo)致不育。

表1 50例男性不育患者的異常染色體核型及其表型

目前，國(guó)內(nèi)外有關(guān)男性不孕癥患者染色體異常的報(bào)道在2.2%～48.3%之間[4]，本文資料中男性原發(fā)不孕組染色體異常的發(fā)生率為18.80%，與文獻(xiàn)基本相符。染色體異常不僅影響精子生成，而且即使通過(guò)輔助生殖受孕，配子形成不平衡染色體的可能也較大，容易導(dǎo)致妊娠失敗或胎兒先天性畸形。因此，患者進(jìn)行必要的染色體檢查是非常有意義的。

男性不育也與Y染色體微缺失關(guān)系密切。其中Yq11在AZF區(qū)在精子發(fā)生過(guò)程中所起的重要作用已經(jīng)得到公認(rèn)。精子的發(fā)生是一個(gè)受到大量基因調(diào)控的精密復(fù)雜的過(guò)程，現(xiàn)大多數(shù)學(xué)者通過(guò)分子缺失分析將q11分為3個(gè)區(qū)間，分別為AZFa、AZFb、AZFc（部分學(xué)者認(rèn)為還有AZFd）。國(guó)內(nèi)外關(guān)于AZF的研究原來(lái)多集中在其對(duì)精子生成和活性的影響上，近年來(lái)有報(bào)道顯示非特發(fā)性不育患者如生殖激素異常、染色體異常、精索靜脈曲張、隱睪等也存在AZF缺失[5-6]。我們?cè)诤诵彤惓?、精索靜脈曲張、隱睪的病人也檢出了AZF缺失。

一般認(rèn)為，Y染色體遠(yuǎn)端缺失（涉及AZFb遠(yuǎn)端和AZFc）可殘留島狀的生精正常區(qū)域[7]。Y染色體的近端缺失，（涉及AZFa和AZFb）表現(xiàn)以唯支持細(xì)胞綜合癥為主的嚴(yán)重生精障礙，因此AZFc區(qū)缺失患者通過(guò)輔助生殖技術(shù)人為傳給下一代的可能性增大，而在早期明確病因，對(duì)于防止其對(duì)下一代的影響也是很有意義的。

總之，我們認(rèn)為，染色體異常及Y染色體微缺失是不孕癥的

表2 男性原發(fā)不育患者的Y染色體微缺失情況

2.2 男性原發(fā)不育癥患者266人進(jìn)項(xiàng)Y染色體微缺失檢測(cè)。發(fā)現(xiàn)存在Y染色體微缺失的男性24人，發(fā)生率為9.02%，其中核型異常8人，具體情況見(jiàn)表2。

3 討論

不孕癥的原因眾多，遺傳因素主要包括Y染色體微缺失、染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目異常等。隨著分子生物學(xué)和基因組技術(shù)的發(fā)展，遺傳性因素越來(lái)越受到重視，染色體異?？捎绊懻{(diào)控精子生成的多種基因功能，與無(wú)精子癥及嚴(yán)重少精子癥的發(fā)生密切相關(guān)。男重要遺傳病因，染色體核型檢查及Y染色體微缺失檢測(cè)可以避免患盲目治療，控制及減少遺傳病的發(fā)生，并可為臨床治療提供初步的參考。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2011.23.023

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