羅永富

P53基因與食管癌的相關(guān)性分析

羅永富

目的通過檢測(cè)食管鱗癌組織的P53蛋白表達(dá)情況，并分析P53基因與食管癌的相關(guān)性。方法收集2007年1月至2010年6月在我院進(jìn)行治療的食管癌患者66例，用免疫組織化學(xué)方法對(duì)患者癌組織的P53蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，并分析其表達(dá)陰性與陽性與患者生存率的關(guān)系。結(jié)果P53基因陽性患者的5年生存率為25.0%，陰性的生存率為47.1%。結(jié)論食管鱗癌組織P53蛋白的表達(dá)可能對(duì)該類患者預(yù)后有影響。

食管癌;組織;P53;預(yù)后

食道癌又叫食管癌，是發(fā)生在食管上皮組織的惡性腫瘤，占所有惡性腫瘤的2%［1］。本研究檢測(cè)65例食管鱗癌組織P53蛋白的表達(dá)，并分析其與食管癌的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料2007年1月至2010年6月在湖南省腫瘤醫(yī)院進(jìn)行治療的食管癌患者66例，其中男45例，女21例;年齡33～76歲，平均57.5歲?；颊呤中g(shù)前后經(jīng)病理檢查證實(shí)為鱗癌，組織切緣病理檢查示陰性，術(shù)前均未進(jìn)行放化療等輔助治療;收住院后手術(shù)經(jīng)左側(cè)入胸進(jìn)行切除，進(jìn)行左頸部吻合并清掃胸內(nèi)及腹腔內(nèi)淋巴結(jié);患者術(shù)后病理分期:Ⅰ期7例，Ⅱ期21例，Ⅲ期38例;胸中段癌41例;胸下段癌25例。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料和方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)材料P53(D07)單克隆抗體購(gòu)自SantaCruz公司，LSAB試劑盒(K0681通用型)購(gòu)自Dako公司。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)方法①烤片，68℃，20 min。②常規(guī)二甲苯脫蠟，梯度酒精脫水;二甲苯Ⅰ20 min-二甲苯Ⅲ20 min～100%酒精Ⅰ10 min～100%Ⅲ10 min～95%5 min～80%5 min～70%5 min。③阻斷滅活內(nèi)源性過氧化物酶:3%H2O237℃孵育10 min，PBS沖洗3×5 min。④抗原修復(fù):置0.01 m枸櫞酸緩沖液(PH 6.0)中用煮沸(95℃，15～20 min)，自然冷卻20 min以上，再用冷水沖洗缸子，加快冷卻至室溫，PBS沖洗3×5 min。⑤正常羊血清工作液封閉，37℃10 min，傾去勿洗。⑥滴加一抗4℃冰箱孵育過夜，PBS沖洗3×5 min(用 PBS緩沖液代替一抗作陰性對(duì)照);滴加生物素標(biāo)記二抗，37℃孵育30 min，PBS沖洗3×5 min。⑦滴加辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉素卵白素工作液，37℃孵育30 min，PBS沖洗3 ×5 min。⑧DAB/H2O2反應(yīng)染色，自來水充分沖洗后，蘇木素復(fù)染，常規(guī)脫水，透明，干燥，封片。

1.2.3 P53 蛋白陽性標(biāo)準(zhǔn):細(xì)胞核著色呈棕黃色為陽性細(xì)胞(+)，否則為陰性細(xì)胞(-)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

P53基因陽性患者的5年生存率為25.0%，陰性的生存率為47.1%。

表1 P53基因多態(tài)性與食管癌的相關(guān)性分析

3 討論

食管癌惡性程度高、病程進(jìn)展迅速、易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移、預(yù)后極差，中晚期患者5年生存率僅10%左右［2］。盡管早期食管癌5年生存率可達(dá)90%以上，但由于早期食管癌患者無明顯特異臨床癥狀，缺乏高危人群(無癥狀)預(yù)警和早期發(fā)現(xiàn)的特異指標(biāo)和有效手段。臨床上首次被確診的食管癌患者中，95%以上均為中晚期。因此，闡明食管癌癌變的分子機(jī)制，建立適用于大規(guī)模高危人群預(yù)警和早期診斷的簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)和特異的分子指標(biāo)和手段，對(duì)于降低食管癌的發(fā)病率和死亡率、提高診治水平具有重要意義，已成為食管癌研究領(lǐng)域的重大課題［3］。

P53基因是因編碼一種分子質(zhì)量為53 kDa的蛋白質(zhì)而得名，是一種抗癌基因。其表達(dá)產(chǎn)物為基因調(diào)節(jié)蛋白(P53蛋白)，當(dāng)DNA受到損傷時(shí)表達(dá)產(chǎn)物急劇增加，可抑制細(xì)胞周期進(jìn)一步運(yùn)轉(zhuǎn)。一旦P53基因發(fā)生突變，P53蛋白失活，細(xì)胞分裂失去節(jié)制，發(fā)生癌變，人類癌癥中約有一半是由于該基因發(fā)生突變失活。

但是事物必然有它的兩個(gè)方面，P53是一個(gè)重要的抗癌基因使癌細(xì)胞自殺，防止癌變;還具有幫助細(xì)胞基因修復(fù)缺陷的功能。這種功能對(duì)于受化療藥物作用而受傷的癌細(xì)胞，則起修復(fù)作用，而不是使癌細(xì)胞自殺。造成被修復(fù)的癌細(xì)胞在治療后成為新的腫瘤。研究表明，P53基因陽性患者的5年生存率為25.0%，陰性的生存率為47.1%。食管鱗癌組織P53蛋白的表達(dá)可能對(duì)該類患者預(yù)后有影響。

［1］呂宗舜，黃象謙.食管癌的診斷進(jìn)展.世界華人消化雜志，2010，8:1017-1019．

［2］王東旭，李偉.食管癌病因?qū)W進(jìn)展.世界華人消化雜志，2010，8:1029-1030．

［3］李健，趙治國(guó)，馮常煒，等.中國(guó)河南林州市食管鱗狀細(xì)胞癌組織中Ras蛋白的表達(dá).世界華人消化雜志，1999，7:714．

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