徐顯利,吳玉堂,田曉蕾

(黑龍江農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)職業(yè)學(xué)院,黑龍江 牡丹江 157041)

食用菌是可供人們食用的大型真菌,且是一種藥食兩用價(jià)值很高的菌類,其食味獨(dú)特,營(yíng)養(yǎng)豐富,具有祛濕、利尿、健脾胃、明目、抗衰老、降低膽固醇、提高機(jī)體免疫力、防癌和抗癌的特殊功能,還可治療頭暈、頭痛、腹瀉、嘔吐等癥。食用菌因其多方面的作用及其獨(dú)特的口味,越來(lái)越受到人們的喜愛(ài)。本文采用苯酚-硫酸法對(duì)猴頭菇、真姬菇、茶薪菇三種食用菌中的總糖含量進(jìn)行測(cè)定,其測(cè)定原理為食用菌中水溶性糖和水不溶性糖經(jīng)鹽酸溶液水解后轉(zhuǎn)化成還原糖,水解物在硫酸的作用下,迅速脫水生成糖醛衍生物,并與苯酚反應(yīng)生成橙黃色溶液,反應(yīng)產(chǎn)物在490nm處比色,定量。本文同時(shí)又對(duì)超聲波提取時(shí)間及水浴回流時(shí)間對(duì)總糖含量測(cè)定的影響進(jìn)行探索。

1 儀器與材料試劑

1.1 儀器:CAV264C型電子天平(上海奧豪斯儀器有限公司),GZX-9140MBE型數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱(上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠),T6新世紀(jì)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司),植物樣品粉碎機(jī),斡旋振蕩器,電熱恒溫水浴鍋、超聲波清洗器。

1.2 試劑:濃鹽酸、濃硫酸、5%苯酚溶液、0.1mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液、

1.3 材料:猴頭菇、真姬菇、茶薪菇均采自黑龍江農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)職業(yè)學(xué)院食用菌基地

2 測(cè)定方法

2.1 試樣的制備

取鮮樣用手撕或刀切成小塊,50℃鼓風(fēng)干燥,待樣品半干后再逐步升溫至80℃,烘至發(fā)脆后在干燥器內(nèi)冷卻,立即粉碎。粉碎樣品過(guò)80目篩子。未能過(guò)篩部分再次粉碎或經(jīng)研缽研磨后再次過(guò)篩,直至全部樣品過(guò)篩為止。

2.2 總糖供試品溶液制備及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

2.2.1 總糖供試品溶液的制備。準(zhǔn)確稱取三種試樣各0.5g,將試樣小心倒入 250mL錐形瓶中,加 50mL水和15 mL濃鹽酸。裝上冷凝回流裝置,置100℃水浴及超聲波中水解,水解時(shí)間分別設(shè)定為2h、3h、4h。冷卻至室溫后過(guò)濾。再用蒸餾水洗滌濾渣,合并濾液及洗液,用水定容至250mL,此溶液即為試樣總糖測(cè)試液。

2.2.2 總糖測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。分別吸取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL 的 0.1mg/mL 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液至10mL具塞刻度試管中,用蒸餾水補(bǔ)至1.0mL。向試管中加入 1.0mL 5%苯酚溶液,然后快速加入5.0mL濃硫酸,反應(yīng)液靜止放置10min。使用斡旋振蕩器使反應(yīng)液混合,然后將試管放置于30℃水浴鍋中反應(yīng)20min。取適量反應(yīng)液于分光光度計(jì)490nm處測(cè)吸光度值。

2.2.3 樣品測(cè)定。準(zhǔn)確吸取試樣總糖測(cè)試液0.2mL于10mL具塞試管中,用蒸餾水補(bǔ)至1.0mL,按上述標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方法操作,以空白溶液調(diào)零,測(cè)吸光度值,繪制總糖標(biāo)準(zhǔn)曲線(如上圖),以標(biāo)準(zhǔn)曲線換算總糖含量。

3 測(cè)定結(jié)果

表1 不同處理時(shí)間的吸光度變化

表2 不同處理時(shí)間的總糖百分含量 %

4 結(jié)論

有以上兩個(gè)表可知,提取時(shí)間對(duì)總糖測(cè)定有一定的影響,在一定范圍內(nèi),總糖含量隨提取時(shí)間的增長(zhǎng)而增多,以提取3h為宜,而相同的處理時(shí)間超聲波提取效果次于水浴回流。所以食用菌總糖含量測(cè)定以水浴回流3h為最佳。

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