劉益慶，陳乃江

(江蘇省連云港市藥品檢驗(yàn)所，江蘇 連云港 222006)

高效液相色譜法測定維U顛茄鋁鎂片中硫酸阿托品含量

劉益慶，陳乃江

(江蘇省連云港市藥品檢驗(yàn)所，江蘇 連云港 222006)

目的用高效液相色譜法測定維U顛茄鋁鎂片中硫酸阿托品的含量。方法采用Phenomenex C18色譜柱(250 mm×4.6mm，5 μm)，以0.5%三乙胺溶液(0.2%四氫呋喃，用冰醋酸調(diào)pH至6.10)－乙腈(80∶20)為流動相，檢測波長為210 nm，柱溫為室溫。結(jié)果硫酸阿托品質(zhì)量濃度在 24.18～290.16 μg/mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好(r=0.999 8)，平均回收率為 97.21%，RSD=1.1%(n=5)。結(jié)論該法簡便、快速、準(zhǔn)確且專屬性強(qiáng)，可用于產(chǎn)品的質(zhì)量控制。

維U顛茄鋁鎂片;硫酸阿托品;高效液相色譜法;含量

維U顛茄鋁鎂片為復(fù)方制劑，組分有維生素U、氫氧化鋁、三硅酸鎂和顛茄流浸膏。目前，還沒有特定的方法能用來對顛茄流浸膏成分進(jìn)行定量分析，故建立定量方法極為重要。顛茄流浸膏的定量難在提取，因?yàn)榫SU顛茄鋁鎂片中的顛茄流浸膏成分很少，要盡可能地提取完全，才能準(zhǔn)確地定量。雖經(jīng)過多次摸索，筆者也只能檢測出硫酸阿托品成分。本試驗(yàn)以硫酸阿托品含量為指標(biāo)，用高效液相色譜(HPLC)法對顛茄流浸膏進(jìn)行了定量分析。

1 儀器與試藥

2695－2996型高效液相色譜儀(美國Waters公司);BP211d型電子分析天平(德國賽多利斯公司);超聲波發(fā)生器(上海吉理超生儀器廠)。硫酸阿托品對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號為100040－200510);維U顛茄鋁鎂片(山東新星藥業(yè)有限公司，批號為 20090918，20091028，20100101);陰性樣品(自制);乙腈(色譜醇)，水(超純水)，三乙胺、冰醋酸、四氫呋喃(分析純)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱:Phenomenex C18柱(250 mm × 4.6 mm ，5 μm);流動相:0.5%三乙胺溶液(0.2%四氫呋喃，用冰醋酸調(diào) pH至6.10)－乙腈(80∶20);檢測波長:210 nm;柱溫:室溫。

2.2 溶液制備

精密稱取硫酸阿托品對照品36.27 mg，加甲醇至100 mL量瓶，超聲溶解并用甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。取本品25片，研磨成細(xì)粉，置分液漏斗中，加稀乙醇150 mL，振搖使溶解，加氨試液5 mL，迅速用氯仿振搖提取3次，每次15 mL，合并氯仿液，水層用1 mol/L氫氧化鈉溶液提取，再用氯仿振搖提取10次，每次20 mL，合并所有的氯仿液，水浴蒸干，殘?jiān)眉蛹状既芙獠⒍哭D(zhuǎn)移至5 mL的量瓶，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜過濾，作為供試品溶液。取陰性對照品，重復(fù)以上操作，制成陰性對照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

系統(tǒng)適用性試驗(yàn):分別吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照品溶液各10 μL，注入液相色譜儀測定。理論板數(shù)按硫酸阿托品峰計(jì)算不低于3 000，并且阿托品峰與其他成分峰分離良好。陰性對照品溶液色譜中，在與供試品溶液色譜中硫酸阿托品相應(yīng)位置上未出現(xiàn)吸收峰，表明處方中其他成分對硫酸阿托品色譜峰測定無干擾(圖1)。

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:精密量取對照品溶液，分別制成質(zhì)量濃度為24.18，48.36，72.54，145.08，290.16μg/mL的溶液，依次進(jìn)樣10 μL測定峰面積。以峰面積(Y)對質(zhì)量濃度(X)進(jìn)行回歸，得到回歸方程 Y=14 739 X+42 898，r=0.999 8(n=5)。結(jié)果表明，硫酸阿托品質(zhì)量濃度在24.18～290.16 μg/mL 范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

圖1 高效液相色譜圖

精密度試驗(yàn):取同一質(zhì)量濃度的對照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，測定其峰面積。結(jié)果峰面積的 RSD為1.0%(n=5)，表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一供試品溶液，分別于 0，2，4，6，8，12，20 h 時進(jìn)樣，測定峰面積。結(jié)果的 RSD為0.8%(n=7)，表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

重現(xiàn)性試驗(yàn):取同一批樣品5份，按供試品溶液制備方法制備溶液并依法測定。結(jié)果的 RSD為1.8%(n=5)，表明方法重現(xiàn)性良好。

加樣回收試驗(yàn):取已知含量的樣品適量，加入對照品溶液，依法測定含量，計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

表1 硫酸阿托品加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

2.4 樣品含量測定

取3批樣品，按供試品溶液制備方法制備供試品溶液，測定峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算含量。結(jié)果批號為 20100101，20090918，20091025的樣品中硫酸阿托品含量分別為0.044 61，0.044 68，0.044 57 mg/g。

3 討論

維U顛茄鋁鎂片所含的顛茄流浸膏成分很少，必須多次反復(fù)地提取，才有可能提取完全。筆者試過很多方法:用甲醇超聲溶解，蒸干后用氯仿－水萃取;用環(huán)己烷超聲提取;水溶后加乙腈，蒸干后氯仿萃取。幾種方法的效果都不是太好。最后發(fā)現(xiàn)用稀乙醇溶解，氨試液中和，氯仿萃取，水層調(diào)節(jié)好pH，再繼續(xù)萃取，能得到比較完全的硫酸阿托品成分。

關(guān)于流動相，筆者比較了水－甲醇，緩沖鹽－乙腈，水－緩沖鹽－乙腈。通過不斷地摸索、調(diào)節(jié)流動相的比例和pH，最后選定0.5%三乙胺溶液(0.2%四氫呋喃，用冰醋酸調(diào)節(jié) pH至6.10)－乙腈(80 ∶20)。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:425－426.

[2]中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)(第六冊)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2002:224－225.

[3]劉文英.藥物分析[M].第5版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2002:183.

[4]汪茂田，謝培山，王忠東，等.天然有機(jī)化合物提取分離與結(jié)構(gòu)鑒定[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2004:112－140.

Determination of Atropine Sulfate in Vitamin U，Aluminium Hydroxide and Mangesium Trisilicate Tablets by HPLC

Liu Yiqing，Chen Naijiang
(Lianyungang Institute for Drug Control，Lianyungang， Jiangsu， China 222006)

ObjectiveTo establish a HPLC method for the determination of atropine sulfate in Vitamin U，Aluminium Hydroxide and Mangesium Trisilicate Tablets.Methods The HPLC system consisted of the Gemini Phenomenex C18column(250 mm × 4.6mm，5 μm)，with 0.5% triethylamine solution(0.2% tetrahydrofuran，adjusting pH value to 6.10 with glacial acetic acid)－ acetonitrile(80 ∶20)as the mobile phase and the detection wavelength of 210 nm.Results The linear range of atropine was 24.18 － 290.16 μg/mL(r=0.999 8).The mean recovery rate was 97.21%，RSD=1.1%(n=5).Conclusion This method is proved to be simple，rapid，accurate and exclusive.

Vitamin U，aluminium hydroxide and mangesium trisilicate tablets;atropine sulfate;HPLC;content

R927.2;R975+.7

A

1006－4931(2011)10－0035－02

劉益慶，男，藥師，主要從事藥品檢驗(yàn)與研究工作，(電話)0518－85836781(電子信箱)liuyiqing510@163.com。

2010－06－17;

2010－11－09)