(廣東藥學(xué)院藥科學(xué)院，廣州 510006)

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

氣相色譜儀：6820型,配FID檢測(cè)器、Aglient Cerity工作站，美國(guó)安捷倫公司；

樟腦(批號(hào)110747-200507)、薄荷腦(批號(hào)110728-200506)、環(huán)己酮內(nèi)標(biāo)物(批號(hào)111674-200401) 對(duì)照品：北京中國(guó)食品藥品檢定研究院；

六神祛暑水(批號(hào)DN5001～DN5010)：廣州星群(藥業(yè))有限公司；

乙醇等所有試劑均為分析純。

1.2 溶液制備

(1)對(duì)照品溶液制備

分別精密稱取樟腦對(duì)照品、薄荷腦對(duì)照品、內(nèi)標(biāo)物環(huán)己酮適量，各加70%乙醇，制成含樟腦1.011 mg/mL、薄荷腦0.996 8 mg/mL、環(huán)己酮1.790mg/mL的溶液。

(2)供試品溶液的制備

精密吸取六神祛暑水0.2 mL、1.790 mg/mL的環(huán)己酮內(nèi)標(biāo)溶液1 mL于10 mL容量瓶中，以70%乙醇定容。

第三，改變以往零散經(jīng)營(yíng)、松散合作的簡(jiǎn)單團(tuán)隊(duì)協(xié)作方式，通過股份合作組建大型商業(yè)企業(yè)，運(yùn)行現(xiàn)代企業(yè)管理制度。要把眾多中小閩商或以行業(yè)、或以地域?yàn)閱挝宦?lián)合起來，組建大型商業(yè)企業(yè)或商貿(mào)城，用現(xiàn)代企業(yè)形式實(shí)現(xiàn)互助合作共同經(jīng)營(yíng)，把閩商的團(tuán)隊(duì)協(xié)作納入現(xiàn)代企業(yè)管理，建立股權(quán)分散但經(jīng)營(yíng)權(quán)集中的現(xiàn)代企業(yè)制度，有利于參與市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)，又避免自相競(jìng)爭(zhēng)。這樣，閩商團(tuán)隊(duì)協(xié)作就上升到現(xiàn)代企業(yè)制度和企業(yè)文化的高度。這需要政府出面協(xié)調(diào)運(yùn)作，從金融服務(wù)、科技中介服務(wù)、投資環(huán)境服務(wù)、公共服務(wù)等多方面入手，整合閩商力量。

(3)陰性對(duì)照溶液的制備

按處方組成，取除樟腦、薄荷腦外的其余藥味，按1.2(2)方法操作制成不含樟腦、薄荷腦的六神祛暑水。

1.3 色譜條件

色譜柱：ZB-FFAP石英毛細(xì)管 (30 m×0.25 mm, 0.25 μm,)，美國(guó)Phenomenex公司；色譜柱升溫程序：起始溫度80℃，保持1 min，以8℃/min升至120℃，再以15℃/min升至180℃，保持2 min，然后以30℃/min升至220℃，保持3 min；氣化室及檢測(cè)器溫度均為250℃；載氣：氮?dú)?，流量? mL/min；進(jìn)樣量：1 μL；分流比：5∶1。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜圖

在1.3色譜條件下分別取樟腦對(duì)照品、薄荷腦對(duì)照品、內(nèi)標(biāo)物環(huán)己酮溶液的混合液，供試品溶液和陰性對(duì)照溶液進(jìn)樣分析，色譜圖如圖1所示。

結(jié)果表明,樟腦理論塔板數(shù)不低于1.3×106，薄荷腦理論塔板數(shù)不低于2.0×106。供試品溶液中樟腦、薄荷腦、內(nèi)標(biāo)物環(huán)己酮峰形對(duì)稱性好且分離良好，與相鄰色譜峰的分離度高達(dá)43，陰性對(duì)照品溶液未見干擾。

2.2 內(nèi)標(biāo)物與升溫方式的選擇

與采用萘為內(nèi)標(biāo)物的分析方法相比[2]，內(nèi)標(biāo)物環(huán)己酮在樟腦、薄荷腦之前出峰，采用程序升溫，可以縮短分析時(shí)間且分離度符合藥典要求。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍

精密吸取一定體積樟腦對(duì)照品溶液，加入一定體積的環(huán)己酮溶液，配制成含樟腦0.040 44、0.101 1、0.202 2、0.303 3、0.505 5 mg/mL，均含環(huán)己酮0.179 0 mg/mL的70%乙醇對(duì)照品溶液。分別精密吸取1 μL上述溶液注入色譜儀，按1.3色譜條件分別進(jìn)行分析，測(cè)定其樟腦及環(huán)己酮峰面積，以樟腦濃度(c)為橫坐標(biāo)，兩者峰面積之比(Ai/As)為縱坐標(biāo)，繪制樟腦標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1—環(huán)己酮(內(nèi)標(biāo))； 2—樟腦； 3—薄荷腦a—對(duì)照品； b—供試品； c—陰性對(duì)照品圖1 氣相色譜圖

精密吸取一定體積薄荷腦對(duì)照品溶液，加入一定體積的環(huán)己酮溶液，配制成含薄荷腦對(duì)照品 0.049 84、0.099 68、0.149 5、0.199 4、0.249 2 mg/mL，均含環(huán)己酮0.179 0 mg/mL的70%乙醇對(duì)照品溶液。分別精密分別吸取1 μL上述溶液注入色譜儀，按1.3色譜條件分別進(jìn)行分析，測(cè)定其薄荷腦及環(huán)己酮峰面積，以薄荷腦濃度(c)為橫坐標(biāo)，兩者峰面積之比(A薄/A環(huán))為縱坐標(biāo)，繪制薄荷腦標(biāo)準(zhǔn)曲線。實(shí)驗(yàn)表明，樟腦和薄荷腦分別在0.040 44～0.505 5 mg/mL、0.049 84～0.249 2 mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，樟腦線性方程為A樟/A環(huán)=6.029c+0.122 6；薄荷腦線性方程為A薄/A環(huán)=6.592c+0.023 1；相關(guān)系數(shù)分別為0.999 9、0.999 4。

2.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品溶液(批號(hào)DN51001)在室溫下放置，分別在0、1、2、3、4、5、6、24 h進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得樟腦與環(huán)己酮峰面積比平均值A(chǔ)樟/A環(huán)=1.535，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.0%；薄荷腦與環(huán)己酮峰面積比平均值A(chǔ)薄/A環(huán)=0.854 4，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.1%。測(cè)定結(jié)果在24 h內(nèi)較穩(wěn)定。

2.5 重復(fù)性試驗(yàn)

精密取同一批號(hào)(批號(hào)DN51001)樣品6份，按1.2(2)制備供試品溶液。取1 μL供試品溶液注入色譜儀，在1.3色譜條件下測(cè)定其樟腦及環(huán)己酮峰面積比和薄荷腦與環(huán)己酮峰面積比，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算樣品中樟腦與薄荷腦的含量。樟腦平均含量為11.52 mg/mL，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.91%；薄荷腦的平均含量為6.180 mg/mL，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.4%，結(jié)果表明該方法重復(fù)性良好。

2.6 回收試驗(yàn)

精密取同一批號(hào)(DN51001)的樣品0.1 mL 6份，分別加入樟腦對(duì)照品0.995 6 mg、薄荷腦對(duì)照品0.475 0 mg和適量的內(nèi)標(biāo)物環(huán)己酮，以70%乙醇定容于10 mL容量瓶。吸取1 μL該溶液注入色譜儀，按1.3色譜條件進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見表1。 樟腦平均回收率為99.18%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.79%；薄荷腦平均回收率為99.65%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.5%，結(jié)果表明本方法準(zhǔn)確可靠。

表1 回收試驗(yàn)結(jié)果

2.7 含量測(cè)定

取10個(gè)批號(hào)(DN51001～DN51010)的六神祛暑水樣品，按1.2(2)制備供試品溶液，吸取1 μL溶液注入色譜儀，按1.3色譜條件測(cè)定，結(jié)果見表2。

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果 mg/(5mL)

2.8 耐用性試驗(yàn)

換用FFAP石英毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm, 0.50 μm，中科院蘭州化物所色譜技術(shù)研究開發(fā)中心)，按1.2(2)制備供試品溶液，在1.3色譜條件下進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算的樟腦理論塔板數(shù)為2.6×105，薄荷腦理論塔板數(shù)為4.8×105,樟腦和薄荷腦的分離度為15.6。雖然塔板數(shù)和分離度比進(jìn)口色譜柱差，但仍能滿足定量要求。

3 結(jié)語(yǔ)

實(shí)驗(yàn)所建立的六神祛暑水中樟腦、薄荷腦的毛細(xì)管氣相色譜法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確且重現(xiàn)性好，可用于六神祛暑水質(zhì)量控制。

[1] 曾常青，郭敏儀，陳航萍.六神祛暑水的薄層鑒別研究[J]. 廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2007，3(23)：237.

[2] 何鳳云，黃芳，楊慧，等. 毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定樟腦薄荷柳酯乳膏中樟腦、薄荷腦和水楊酸甲酯[J]. 化學(xué)分析計(jì)量，2008，17(4)：54-55.

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