賀安娜, 李愛民, 譚曉利, 劉 玲, 劉光華

(懷化學(xué)院1.生命科學(xué)系; 2.民族藥用植物資源研究與利用湖南省重點實驗室;3.湘西藥用植物與民族植物學(xué)湖南省高校重點實驗室,湖南懷化 418008)

虎耳草(Saxifraga stolonifera)為虎耳草科多年生草本植物,又名石荷葉、金線吊芙蓉、老虎耳等[1].主要分布于華南、西南至陜西和河南南部等山區(qū)陰濕地帶,我國臺灣及日本、朝鮮也有分布.全草可入藥,具有消炎、解毒之功效,民間常用于治療中耳炎等病癥[2],有良好的藥用價值.但虎耳草的生物學(xué)研究報道甚少,目前國內(nèi)外對虎耳草的研究集中在化學(xué)成分[3]及藥理方面[4],鮮見其生藥學(xué)顯微鑒定方面的報道.本文對虎耳草進行顯微鑒定研究,為進一步開發(fā)、利用和制定其藥材標準提供參考依據(jù).

1 材料與方法

1.1 研究區(qū)概況

研究區(qū)位于位于湖南省西南部,雪峰山脈和武陵山脈之間 (27°32′N、109°58′E), 平均海拔 300～400 m,屬中亞熱帶季風(fēng)濕潤氣候,年均氣溫約16.5℃,降水量1 563mm,無霜期272 d左右.土壤類型主要為變質(zhì)母巖.

1.2 研究材料

供試材料虎耳草于2010年3月用新株盆栽,植于直徑為15 cm的塑料花盆中,選用林下的腐殖質(zhì)層土,每盆3株,置于懷化學(xué)院生物園蔭棚內(nèi),噴頭常規(guī)灑水.在5月下旬對其進行實驗觀察.

1.3 實驗方法

隨機采集虎耳草全株進行觀察,選取代表性部位在Olympus BX-60生物顯微鏡下放大觀測.隨后選取不同部位的新鮮組織,用FAA固定液固定,乙醇脫水,二甲苯透明,石蠟包埋,使用Leica RM-2145型切片機切片,橫切片厚度10μm,番紅染色,拍照.

2 結(jié)果

2.1 性狀鑒別

圖1 虎耳草表面體式觀察圖 (8×)

全草密被柔毛 (圖1);葉基生;葉片虎耳狀圓形,邊緣有鋸齒,上面深綠色,葉脈周圍色淺,下面淡綠色略帶紫;葉柄長,可達10 cm,基部紫紅色;匍匐莖發(fā)達,紫紅色,常有氣生根,可生成新的植株;花莖高達25 cm,直立,有分枝;圓錐狀花序;花白,花瓣5,下方2瓣長,披針形,上方3瓣較小,卵形,基部有黃色斑點;雄蕊10;子房球形,下位;蒴果卵圓形,先端2深裂,呈喙?fàn)?

2.2 顯微鑒別

2.2.1 葉表面觀 上表皮細胞類多角形,壁稍平直,無氣孔,密被多細胞組成的非腺毛;下表皮細胞不規(guī)則形,壁微彎曲,氣孔內(nèi)可見清晰的葉綠體 (每個保衛(wèi)細胞約6～10個葉綠體),由3～4個副衛(wèi)細胞構(gòu)成,為不等式.見圖2、圖3.

圖2 虎耳草葉上表皮詳圖 (400×)

圖3 虎耳草葉下表皮詳圖 (400×)

2.2.2 葉橫切面 上表皮細胞1列,細胞扁長方形,外壁未見明顯角質(zhì)層,排列整齊.柵欄組織細胞呈橢圓形,內(nèi)含較多的葉綠體,3-4列,排列較疏松.海綿組織占比例最多,細胞最大,呈不規(guī)則的扁形,排列很疏松.主脈維管束外韌型;木質(zhì)部略呈半月形,導(dǎo)管呈徑向排列.葉下表皮1列,細胞類長方形或類圓形.上、下表皮常見非腺毛.見圖4、圖5.

圖4 虎耳草葉橫切詳圖 (400×)

圖5 虎耳草葉橫切簡圖 (100×)

圖6 葉柄橫切詳圖 (400×)

圖7 葉柄橫切簡圖 (100×)

2.2.3 葉柄橫切面 葉柄的橫切呈橢圓形,被非腺毛.表皮內(nèi)部有2～3層厚角組織.葉柄的大部分細胞為基本組織,該類細胞較大,無規(guī)則型,排列疏松.基本組織內(nèi)有三個維管束排列成弧形,中間的維管束較大,外韌型.見圖6、圖7.

圖8 虎耳草匍匐莖橫切詳圖 (400×)

圖9 虎耳草根橫切圖 (100×)

2.2.4 匍匐莖橫切面 表皮外偶見非腺毛.表皮細胞1列,類長方形,排列較整齊.皮層由數(shù)列類不規(guī)則的薄壁細胞組成,占莖的比例最大,且整體細胞大,排列疏松;皮層最外一層和最內(nèi)1～2層細胞稍小,近橢圓形,排列緊密.中柱維管束外韌型,韌皮部所占面積較窄,細胞小,排列緊密,由篩管、韌皮薄壁細胞等組成;木質(zhì)部較寬,由導(dǎo)管、木薄壁細胞等組成;木質(zhì)部與韌皮部之間可見形成層;髓射線細胞較大.髓部明顯,均由薄壁細胞構(gòu)成,細胞較大.見圖8.

2.2.5 根橫切 根橫切外部有較多的已遭破壞的表皮和皮層.皮層細胞較大,僅存1-2層細胞.內(nèi)皮層和中柱鞘細胞排列緊密.中柱維管束是虎耳草根的主要結(jié)構(gòu),且可見維管組織的次生結(jié)構(gòu).見圖9.

3 小結(jié)

通過上述試驗研究,發(fā)現(xiàn)虎耳草全草密被非腺毛,這是虎耳草較典型的外部體態(tài)特征.下表皮有不等式氣孔;葉橫切發(fā)現(xiàn)有海綿組織和柵欄組織柵之分,但葉肉組織排列疏松,富含葉綠體,且海綿組織在葉肉中所占比例最大,該類葉片結(jié)構(gòu)很適合蔭生的環(huán)境;主脈維管束外韌性;葉柄中有三個維管束;根、莖的維管束均為外韌型;根的主要結(jié)構(gòu)為維管束,表皮和大部分皮層已脫落,具有明顯的次生結(jié)構(gòu),能看出其多年生植物的痕跡.以上組織特征可為虎耳草的生藥鑒別提供依據(jù).

[1]中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會.中國植物志 (第34卷第2分冊)[M].北京：科學(xué)出版社,2005：75.

[2]賈敏如,李星煒.中國民族藥志要 [M].北京：中國醫(yī)藥出版社,2005：548.

[3]丁家欣,張秋海,張玲,王遂生.HPLC法測定不同產(chǎn)地與采收期虎耳草中巖白菜素的含量 [J].中國中藥雜志,2002,27(10)：792-793.

[4]Chen Z,Liu YM,Yang S,et al.Studies on the chemical constituents and anticancer activity of Saxifraga stolonifera(L.)Meeb[J].Bioorganic &Medicinal Chemistry,2008,16：1337-1344.