【摘要】目的:研究蒙藥索布如#8226;札特巴水提取物對(duì)催老小鼠的抗氧化作用。方法:索布如#8226;札特巴用蒸餾水超聲波輔助提取。1月齡的ICR(InstituteofCancerResearcch，ICR)小鼠分為5組，正常對(duì)照組和衰老模型組用生理鹽水灌胃，給藥組用索布如#8226;札特巴提取物分別以每天16，8，4mg/kg的劑量灌胃，連續(xù)灌胃50天后測(cè)定小鼠血漿丙二醛(MDA)含量，超氧化歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性以及肝指數(shù)、脾指數(shù)等指標(biāo)。結(jié)果:中、高劑量給藥組可顯著降低血漿MDA水平，增強(qiáng)SOD、GSH-Px的活性，并可抑制小鼠肝指數(shù)和脾指數(shù)的降低。結(jié)論:索布如#8226;札特巴水提取物對(duì)催老小鼠有一定的抗氧化作用。

【關(guān)鍵詞】抗氧化作用;蒙藥;索布如#8226;札特巴

【中圖分類(lèi)號(hào)】R29【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1007-8517(2010)16-183-2

蒙藥是我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)藥的重要組成部分，純屬天然藥物。這些藥物多數(shù)化學(xué)成分不明、藥理作用不詳，僅憑藥典、經(jīng)驗(yàn)使用。要想發(fā)展蒙醫(yī)藥學(xué)，必須利用現(xiàn)代的科學(xué)技術(shù)手段，對(duì)蒙藥進(jìn)行成分分析，揭示它的生物效應(yīng)，對(duì)其藥理及毒理進(jìn)行研究，找到蒙藥獨(dú)特療效的科學(xué)依據(jù)。蒙藥索布如#8226;札特巴是由石榴、豆蔻、廣棗等8味蒙藥材組成?！懊伤幷洹敝杏杏涊d其具有祛寒、除濕等功能。臨床上主要用來(lái)治療痰、寒、氣三型的心臟病[1]。但迄今未見(jiàn)對(duì)其藥理學(xué)方面的研究報(bào)道。本課題組前期研究了索布如#8226;札特巴體外抗氧化活性，發(fā)現(xiàn)其水提取物和乙醇提取物都具有良好的體外抗氧化作用[2]。為進(jìn)一步探討此藥的藥理作用，我們采用采用D-半乳糖致亞急性衰老的小鼠模型，檢測(cè)了索布如#8226;札特巴對(duì)催老模型小鼠血漿MDA含量，SOD、GSH-Px活性以及肝指數(shù)、脾指數(shù)等指標(biāo)，以期揭示索布如#8226;札特巴抗氧化作用機(jī)理。

1材料與方法

1.1材料與儀器

蒙藥索布如#8226;札特巴由內(nèi)蒙古中蒙醫(yī)院提供。D-半乳糖由上海試劑二廠提供;丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)測(cè)試盒由南京建成生物工程研究所提供;實(shí)驗(yàn)用水為二次石英亞沸蒸餾水。主要儀器有，LabTechUV1000紫外可見(jiàn)分光光度、KQ3200V型超聲波清洗器、FA2104N電子天平等。

1.2提取方法

準(zhǔn)確稱取樣品1.00g于100ml錐形瓶中，加入蒸餾水15ml，浸泡6h，超聲輔助提取(12kHz，10min)，過(guò)濾，濾液用冷凍干燥儀干燥，稱重保存。

1.3小鼠衰老模型的建造及給藥方法

1月齡的ICR小鼠，體重26±2.1g，雄性，50只，由內(nèi)蒙古科技大學(xué)醫(yī)學(xué)部動(dòng)物室提供。小鼠在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下(25℃，濕度65%)適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后隨機(jī)分為5組，即正常對(duì)照組、衰老模型組、給藥高、中、低劑量組[3]。除正常對(duì)照組外，其余各組小鼠每天皮下注射D-半乳糖1g/kg，持續(xù)六周，正常對(duì)照組小鼠每天皮下注射等量生理鹽水。造模7天后開(kāi)始，高、中、低劑量組用索布如#8226;札特巴提取物分別以每天16，8，4mg/kg的劑量灌胃，正常對(duì)照組及模型組用等量生理鹽水灌胃，連續(xù)六周。

1.4各種指標(biāo)的測(cè)定方法

實(shí)驗(yàn)小鼠于末次給藥停藥2天后斷食12小時(shí)。稱體重，眼眶取血，肝素抗凝，分離血漿立即進(jìn)行指標(biāo)檢測(cè)。同時(shí)迅速取出肝、脾，稱重。MDA、SOD及GSH-Px的測(cè)定按照試劑盒的說(shuō)明進(jìn)行。臟器指數(shù)按下式計(jì)算:臟器指數(shù)=臟器重量(g)/體重(g)·100%。

1.5數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用±s表示，采用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，組間比較用單因素方差分析。

2結(jié)果

2.1索布如#8226;札特巴提取物對(duì)衰老模型小鼠肝指數(shù)、脾指數(shù)的影響

從表1可以看出，衰老模型組小鼠肝指數(shù)與脾指數(shù)都降低，肝指數(shù)明顯低于正常組(P<0.01)，而造模7天后開(kāi)始灌服索布如#8226;札特巴水提取物8，16mg/kg，可顯著抑制肝指數(shù)的降低(P<0.01)，對(duì)脾指數(shù)的降低也有一定的抑制作用(表1)。

2.2索布如#8226;札特巴提取物對(duì)小鼠血漿MDA、SOD、GSH-Px的影響

從表1可看出，模型組小鼠血漿中MDA含量明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01)，SOD與GSH-Px活性明顯低于正常對(duì)照組(P<0.05)。這些結(jié)果表明，衰老模型組小鼠體內(nèi)自由基代謝異常。索布如#8226;札特巴提取物高、中劑量組均能顯著降低衰老小鼠血漿中MDA含量(P<0.01)，并能顯著提高SOD(P<0.05)，高劑量組能顯著提高GSH-Px活性(P<0.05)。上述結(jié)果表明索布如#8226;札特巴可提高機(jī)體抗氧化物酶的活力，降低脂質(zhì)過(guò)氧化水平(表1)。

3討論

D-半乳糖衰老模型是按照衰老的代謝學(xué)說(shuō)建立的，表現(xiàn)出與自然衰老相似的一系列生理生化改變，其主要表現(xiàn)為機(jī)體氧化水平明顯增加，心肝腦肺脾腎等臟器指數(shù)降低[4，5]。

MDA可反映生物膜氧化的程度，通過(guò)測(cè)定MDA可以間接反應(yīng)機(jī)體氧化水平和老化程度[6]。而抗氧化酶SOD和GSH-Px的活性是反映機(jī)體抗氧化能力的重要指標(biāo)。SOD能促使超氧化物陰離子自由基變?yōu)檫^(guò)氧化氫和氧離子，從而減少脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，使機(jī)體細(xì)胞和組織免受損害[7]。GSH-Px是機(jī)體重要的催化過(guò)氧化氫分解的酶，可起到保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整的作用。本研究發(fā)現(xiàn)，衰老模型組血漿MDA值高于正常對(duì)照組，而給藥組的值低于模型對(duì)照組，這說(shuō)明索布如#8226;札特巴可減輕生物膜的受損程度，維持生物膜的正常功能而起到抗衰老的作用。并且，索布如#8226;札特巴提取物可以抑制D-半乳糖導(dǎo)致的血漿SOD、GSH-Px活性的降低，說(shuō)明索布如#8226;札特巴可以提高模型血漿中SOD、GSH-Px的活性、清除自由基，具有一定的延緩衰老的作用。

臟器指數(shù)是臟器重占體重的百分?jǐn)?shù)。過(guò)量注射D-半乳糖會(huì)引起糖代謝紊亂，使機(jī)體過(guò)氧化反應(yīng)增強(qiáng)，產(chǎn)生大量自由基損害了肝臟，使肝指數(shù)發(fā)生明顯變化[3，4，5]。本實(shí)驗(yàn)中模型組小鼠與正常組相比，其肝指數(shù)明顯降低，而高劑量組均可提高肝指數(shù)，表明索布如#8226;札特巴可以降低肝臟的受損程度，保護(hù)肝臟。脾臟是機(jī)體的免疫器官，脾臟中有T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞，與細(xì)胞免疫、體液免疫均有密切關(guān)系[3]。模型對(duì)照組的脾指數(shù)低于正常對(duì)照組而索布如#8226;札特巴高劑量組的脾指數(shù)高于模型對(duì)照組接近正常對(duì)照組，說(shuō)明索布如#8226;札特巴對(duì)脾臟也有一定的保護(hù)作用。

綜上所述，索布如#8226;札特巴提取物中含有有益于健康的抗氧化活性成分，具有良好的抗氧化能力，能在一定程度上延緩由于注射D-半乳糖引起的小鼠體內(nèi)抗氧化能力的降低。提示索布如#8226;札特巴在抗衰老，防治老年性疾病方面具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

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