黃彥生 吳 彧 孫 琳 趙士超 段紅艷 吳金濤 王樹人

氧化應(yīng)激與冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（冠心?。┟芮邢嚓P(guān)[1]，冠心病患者血漿氧化還原態(tài)向氧化方向發(fā)生偏移[2]。辛伐他汀除具有調(diào)脂功能以外，還具有抗動脈粥樣硬化的功能，但有關(guān)其對冠心病患者血漿氧化還原態(tài)的影響尚少見報道。本研究對比觀察了辛伐他汀和降膽固醇藥物考來烯胺對冠心病患者調(diào)脂作用及對血管內(nèi)皮功能、氧化還原態(tài)的影響，報告如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 依據(jù)2001年中華醫(yī)學(xué)會心血管病學(xué)分會等制定的冠心病診斷標(biāo)準(zhǔn)，選擇2006年3月—2007年9月河南省人民醫(yī)院心內(nèi)科住院的冠心病患者。排除風(fēng)濕性心臟病、肺心病、原發(fā)性心肌病、心肌炎、大動脈炎、嚴(yán)重的肝、腎功能不全、腎病綜合征、難以控制的糖尿病、惡性腫瘤、精神病及隨訪資料不完整者。將符合納入標(biāo)準(zhǔn)的112例冠心病患者按就診順序，用隨機(jī)數(shù)字表方法分為辛伐他汀組（56例）和考來烯胺組（56例），2組一般情況具有可比性，見表1。

表1 2組患者一般情況比較 （±s）

表1 2組患者一般情況比較 （±s）

均 P>0.05

組別辛伐他汀組考來烯胺組t或 χ2性別（男/女）30/26 29/27 0.856年齡（歲）56.45±11.91 57.24±12.12 0.929病程（年）9.16±8.89 8.97±8.65 1.347體質(zhì)指數(shù)（kg/m2）25.04±2.96 24.98±2.79 1.322

1.2 治療方法 2組均給予β受體阻滯劑、鈣離子拮抗劑、阿司匹林、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑或血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑等常規(guī)藥物治療，辛伐他汀組、考來烯胺組分別有39、41例每早口服5-單硝酸異山梨醇酯緩釋膠囊50 mg。辛伐他汀組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用辛伐他汀（商品名舒降之，杭州默沙東制藥公司生產(chǎn)）20 mg每晚口服；考來烯胺組給予考來烯胺（商品考來烯胺散，厚生藥業(yè)有限公司生產(chǎn)），第1周每天4 g口服，第2周每天8 g口服，第3周及以后每天12 g口服，均連服8周。

1.3 指標(biāo)測定 治療前及治療8周后晨起空腹抽取肘正中靜脈血，分離出血清或血漿備用。

1.3.1 血脂 膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）采用酶法以Beckman試劑測定，低密度脂蛋白膽固醇（LDL－C）采用過氧化氫酶（catalase，CAT）清除法測定。

1.3.2 血管內(nèi)皮功能指標(biāo) 采用特異性放射免疫均相競爭法直接測定血漿中內(nèi)皮素-1（ET-1），ET-1試劑盒購自解放軍總醫(yī)院東亞免疫技術(shù)研究所。一氧化氮（NO）試劑盒購自法國Coulter公司，采用硝酸還原酶法測定血清中NO。所有檢測嚴(yán)格按說明書操作。

1.3.3 氧化還原態(tài)指標(biāo) 還原型谷胱甘肽（reduced glutathione，GSH）和氧化型谷胱甘肽（oxidized glutathione，GSSG）按熒光分光光度法測定。GSH/GSSG氧化還原電位值根據(jù)公式 Eh(GSH/GSSG)＝E0＋（RT/2F）ln（GSSG/GSH2）計算。其中 E0為GSH/GSSH的標(biāo)準(zhǔn)電位值，血液pH=7.4時，標(biāo)準(zhǔn)E0為-264mV，R為氣體常數(shù)，T為絕對溫度，F(xiàn)為Faraday常數(shù)[3]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 全部數(shù)據(jù)采用SPSS 10.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，均數(shù)間的比較采用成組t檢驗或配對t檢驗，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，檢驗水準(zhǔn)為α=0.05。

2 結(jié)果

治療8周后，辛伐他汀組1例因轉(zhuǎn)氨酶升高3倍退出試驗，考來烯胺組3例因惡心腹脹、Q-T間期延長退出試驗。

2.1 2組降脂療效的比較 治療8周后，辛伐他汀組TC、LDL-C和TG明顯減低；考來烯胺組TC和LDL-C明顯減低，TG無明顯變化。2組相比TC和LDL-C治療前后差異無統(tǒng)計學(xué)意義，治療前后TG差異有統(tǒng)計學(xué)意義，見表2。

表2 2組降脂療效的比較 （mmol/L，±s）

表2 2組降脂療效的比較 （mmol/L，±s）

*P＜0.05，**P＜0.01，表3、4 同

組別 n辛伐他汀55考來烯胺53辛伐他汀考來烯胺55 53治療前治療后t治療前治療后t治療前后差值治療前后差值t TC 5.68±1.47 3.94±1.36 3.915**5.73±1.52 4.15±1.29 3.760**1.71±0.13 1.64±0.11 1.953 LDC-C 3.43±1.36 2.28±1.11 4.160**3.47±1.35 2.56±1.06 4.035**1.13±0.29 0.98±0.27 1.874 TG 1.73±0.6 6 1.45±0.59 2.187*1.72±0.67 1.69±0.57 1.893 0.32±0.09 0.15±0.06 2.620*

2.2 2組內(nèi)皮功能變化 治療8周后，辛伐他汀組NO升高，ET-1減低，NO/ET-1升高；考來烯胺組NO、ET-1和NO/ET-1變化差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。2組治療前后NO、ET-1和NO/ET-1改變差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，見表3。

表3 2組血管內(nèi)皮功能變化比較 （±s）

表3 2組血管內(nèi)皮功能變化比較 （±s）

組別 n辛伐他汀55考來烯胺53辛伐他汀考來烯胺55 53治療前治療后t治療前治療后t治療前后差值治療前后差值t NO（μmol/L）48.41±16.53 64.40±18.86 3.725**48.13±15.92 49.42±17.51 1.469 15.71±4.33 2.29±1.71 3.953**ET-1（ng/L）154.43±63.06 121.71±59.11 2.168*154.77±62.35 151.36±58.56 1.135 32.19±14.58 3.48±1.27 2.374*NO/ET-1 0.31±0.16 0.53±0.19 3.987**0.31±0.17 0.32±0.17 1.543 0.26±0.10 0.12±0.07 4.621**

2.3 2組氧化還原態(tài)變化比較 治療8周后，辛伐他汀組GSH和GSH/GSSG增高，GSSG和Eh(GSH/GSSG)減低；考來烯胺組以上指標(biāo)變化均無統(tǒng)計學(xué)意義。2組治療前后上述指標(biāo)改變差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，見表4。

表4 2組氧化還原態(tài)變化比較 （±s）

表4 2組氧化還原態(tài)變化比較 （±s）

組別 n辛伐他汀55考來烯胺53辛伐他汀考來烯胺55 53治療前治療后t治療前治療后t治療前后差值治療前后差值t GSH（μmol/L）284.23±38.23 321.27±56.47 3.894**284.31±38.05 289.46±40.89 1.435 33.16±13.24 5.97±2.35 4.953**GSSG(μmol/L)34.51±1.74 31.92±1.59 2.325*34.23±1.72 33.28±1.66 1.169 3.52±1.04 1.08±0.39 2.374*GSH/GSSG 8.24±1.18 10.06±1.70 4.168**8.31±1.21 8.61±1.27 1.479 1.91±0.72 0.32±0.08 4.726**Eh(GSH/GSSG)(mV)-135.83±1.34-142.61±1.39 3.687*-136.03±1.37-137.23±1.65 1.398 6.87±1.13 1.29±0.32 2.621*

3 討論

目前發(fā)現(xiàn)，膽固醇異常升高、高血壓、糖尿病、吸煙、高同型半胱氨酸血癥等動脈粥樣硬化發(fā)病的諸多危險因素中及在分子水平的損傷機(jī)制中都有氧化應(yīng)激的參與，氧化應(yīng)激通過引起脂質(zhì)過氧化及內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞的氧化損傷繼而促進(jìn)動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展，氧化應(yīng)激與動脈粥樣硬化的發(fā)病關(guān)系密切[1]。但機(jī)體對于氧化應(yīng)激又有著非常強(qiáng)大的防御和拮抗機(jī)制，兩者的平衡構(gòu)成了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的一個重要穩(wěn)態(tài)機(jī)制，被稱為氧化-還原態(tài)[4]。

GSH/GSSG被認(rèn)為是細(xì)胞中主要的氧化還原緩沖對（redox buffer），GSH可清除活性氧（ROS），維持生物大分子的巰基（-SH）活性中心，使維生素（Vc）和α-生育酚維持還原狀態(tài)，反應(yīng)中GSH被氧化為GSSG后，在GSSG還原酶催化下，以還原型輔酶Ⅱ（NADPH）傳遞氫，GSSG可被重新還原為GSH，遂可重復(fù)利用[5]。另一方面，蛋白質(zhì)分子中大量的二硫鍵(-S-S-)結(jié)構(gòu)亦與蛋白質(zhì)的功能密不可分，這需要一定的氧化態(tài)維系。因此，機(jī)體內(nèi)必有一個相當(dāng)恒定的GSH/GSSG氧化-還原態(tài)[6]。資料顯示，不同類型的細(xì)胞中GSH/GSSG氧化還原電位一致，并與細(xì)胞的增殖、分化及凋亡等有關(guān)[7]。目前認(rèn)為，血漿中GSH/GSSG可一定程度上反應(yīng)機(jī)體氧化還原內(nèi)穩(wěn)態(tài)的改變，GSH/GSSG向氧化方向偏移時可產(chǎn)生類似過氧化氫增多時產(chǎn)生的氧化損傷效應(yīng)[8]。因此，本研究選擇測量GSH/GSSG作為反映機(jī)體氧化還原態(tài)的一個主要指標(biāo)，以探討GSH/GSSG氧化還原態(tài)的改變在動脈粥樣硬化中的作用。本研究前期工作發(fā)現(xiàn)動脈粥樣硬化患者GSH/GSSG氧化還原對向氧化方向偏移[5]。本研究提示，辛伐他汀和考來烯胺對冠心病患者均可有效降脂，但僅辛伐他汀對冠心病患者血管內(nèi)皮功能有一定的保護(hù)作用，且可糾正冠心病患者GSH/GSSG氧化還原對向氧化方向偏移。

因此，了解冠心病患者的氧化還原態(tài)，特別是GSH/GSSG的氧化還原態(tài)，糾正其偏移，可能是針對動脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的氧化應(yīng)激損傷機(jī)制的一條合理思路，有必要從矯正GSH/GSSG氧化還原態(tài)偏移的角度觀察其對動脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的影響。

[1]Veskoukis AS,Nikolaidis MG,Kyparos A,et al.Effects of xanthine oxidase inhibition on oxidative stress and swimming performance in rats[J].Appl Physiol Nutr Metab,2008,33(6):1140-1154.

[2]Wang QL,Wang SR,Ding Y,et al.Age-related changes of the redox state of glutathione in plasma[J].Chin Med J(Engl),2005,118(18):1560-1563.

[3]Sokalski T,Kucza W,Danielewski M,et al.Time-dependent phenomena in the potential response of ion-selective electrodes treated by the Nernst-Planck-Poisson model.Part 2:Transmembrane processes and detection limit[J].Anal Chem,2009,81(12):5016-5022.

[4]Koike Y,Hisada T,Utsugi M,et al.Glutathione redox regulates airway hyperresponsiveness and airway inflammation in mice[J].Am J Respir Cell Mol Biol,2007,37(3):322-329.

[5]Huang YS,Zhi YF,Kong SY,et al.Plasma glutathione of patients with coronary heart disease measured by fluorospectrophotometer[J].Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi,2006,26(5):936-940.

[6]Findrik Z,Vrsalovi? Presecki A,Vasi?-Racki D.Mathematical modelling of NADH oxidation catalyzed by new NADH oxidase from Lactobacillus brevis in continuously operated enzyme membrane reactor[J].J Biosci Bioeng,2007,104(4):275-280.

[7]Marty L,Siala W,Schwarzl覿nder M,et al.The NADPH-dependent thioredoxin system constitutes a functional backup for cytosolic glutathione reductase in Arabidopsis[J].Proc Natl Acad Sci USA,2009,106(22):9109-9014.

[8]Yang Z,Sharma AK,Marshall M,et al.NADPH oxidase in bone marrow-derived cells mediates pulmonary ischemia-reperfusion injury[J].Am J Respir Cell Mol Biol,2009,40(3):375-381.