王麗彥

(長(zhǎng)春市食品藥品檢驗(yàn)所,吉林 長(zhǎng)春 130012)

*王麗彥，E-mail：wgb654321@yahoo.cn

HPLC測(cè)定抗骨增生片中淫羊藿苷的含量

王麗彥*

(長(zhǎng)春市食品藥品檢驗(yàn)所,吉林 長(zhǎng)春130012)

目的建立高效相液色譜法測(cè)定抗骨增生片中淫羊藿苷的含量。方法采用十八烷基鍵合硅膠為填充劑色譜柱(4.6mm×150mm，5μm)，以乙腈-水(25∶75)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm。結(jié)果淫羊藿苷的回歸方程為Y=1490.44X-12.4236(r=1.0000)，線性關(guān)系良好；平均回收率為99.5%。結(jié)論該方法操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，可用于抗骨增生片中淫羊藿苷的含量測(cè)定。

抗骨增生片；淫羊藿苷；高效液相色譜法

抗骨增生片收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑》第七冊(cè)中，由熟地黃、鹿銜草、骨碎補(bǔ)(燙)、雞血藤、肉蓯蓉、淫羊藿、萊菔子7味藥組成。具有補(bǔ)腎，活血，止痛的功能。用于肥大性脊椎炎，頸椎病，跟骨刺，增生性關(guān)節(jié)炎，大骨節(jié)病。原標(biāo)準(zhǔn)中無(wú)定性、定量分析項(xiàng)目，不能有效控制成藥質(zhì)量。本實(shí)驗(yàn)建立高效液相色譜法測(cè)定抗骨增生片中淫羊藿苷的含量，結(jié)果表明方法專屬性較強(qiáng)，能夠有效地控制抗骨增生片的質(zhì)量。

1 儀器與試藥

1.1儀器

HP1100高效液相色譜儀(美國(guó)安捷倫公司)，Agilent-C18色譜柱(4.6mm×150mm，5μm)，GR-202電子天平。

1.2試藥

淫羊藿苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110737-200312，供含量測(cè)定用)?？构窃錾?吉林省羅邦藥業(yè)有限公司，批號(hào)見(jiàn)表2，含淫羊藿0.67mg/片),乙腈為色譜純。

2 方法[1]與結(jié)果

2.1色譜條件

流動(dòng)相：乙腈-水(25∶75)；流速：1.0mL·min-1；進(jìn)樣量：10μL；柱溫：25℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：270nm；理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)算應(yīng)不低于1500。

2.2對(duì)照品溶液的制備

精密稱取淫羊藿苷對(duì)照品適量，加甲醇溶解，制成1mL含淫羊藿苷0.04mg的溶液，即得。

2.3供試品溶液的制備

取本品20片，除去糖衣，研細(xì)，取約3g，精密稱定，置100mL量瓶中，加稀乙醇超聲處理1h，放冷至室溫加稀乙醇稀釋至刻度，濾過(guò)，取濾液即得。

2.4陰性對(duì)照溶液的制備

取按處方比例制成除去淫羊藿的陰性對(duì)照樣品，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。

2.5系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)

分別吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照溶液各10μL，注入色譜儀，同法測(cè)定，結(jié)果在淫羊藿苷峰相應(yīng)位置上，陰性對(duì)照無(wú)干擾，結(jié)果見(jiàn)圖1～3。

圖1 淫羊藿苷對(duì)照品HPLC圖

圖2 抗骨增生片HPLC圖

圖3 缺淫羊藿的陰性對(duì)照HPLC圖

2.6線性關(guān)系

精密量取淫羊藿苷對(duì)照品溶液2，5，10，15，20，50μL注入色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積Y對(duì)進(jìn)樣量X(μg)進(jìn)行線性回歸，得淫羊藿苷回歸方程Y=1490.44X-12.4236，r=1.0000，結(jié)果表明淫羊藿苷在0.08～2μg線性關(guān)系良好。

2.7精密度試驗(yàn)

取同一對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)得淫羊藿苷峰面積的RSD=0.4%，表明精密度良好。

2.8重現(xiàn)性試驗(yàn)

取樣品(批號(hào)20080607)，精密稱定6份，按2.3項(xiàng)下方法測(cè)定淫羊藿苷含量的RSD=0.7%，表明本方法重復(fù)性良好。

2.9穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一供試品溶液，于0，2，4，6，8，12，24h，分別測(cè)得淫羊藿苷峰面積的RSD=1.3%，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.10加樣回收率試驗(yàn)

精密稱取含量已測(cè)定的供試品(批號(hào)20080607，含淫羊藿苷為0.67mg·片-1)，分別置于6個(gè)100mL量瓶中，精密加入淫羊藿苷對(duì)照品溶液(2.803mg·mL-1)1mL，按2.3項(xiàng)下方法測(cè)定淫羊藿苷的含量，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.11樣品含量測(cè)定

分別吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液各10μL,注入色譜儀,記錄色譜圖,測(cè)定10批樣品的含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 淫羊藿苷加樣回收率試驗(yàn)

注：淫羊藿苷對(duì)照品加入量均為2.803 mg

表2 抗骨增生片中淫羊藿苷含量測(cè)定 mg/片

3 討論

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典(一部)[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：229.

DeterminationofIcariininKangguzengshengTabletsbyHPLC

Wang Liyan

(ChangchunInstituteforFoodandDrugControl,ChangchunJilin130012,China)

Objective: To establish a HPLC method for determination the content of icariin in Kangguzengsheng tablets.MethodsAn Agilent C18column (250mm×4.6mm,5μm) was used, the mobile phase was consisted of acetonituile-water(25∶75) at a flow rate of1.0mL·min-1. UV detection wavelength was270nm.ResultsThe calibration curve of Icariin wasY=1490.44X-12.4236(r=1.0000)，and the average recovery was99.5%(n=6).ConclusionThe methed is simple, accurate. It can be used for quality control of Kangguzengsheng tablets.

Kangguzengsheng tablets；Icariin；HPLC

2009-09-02)