張曉燕,高 菲,馬 偉,徐 峰,張媛媛,張淑華,王建明

(1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院,哈爾濱150040;2.黑龍江省雙鴨山市饒河縣人民醫(yī)院藥劑科,黑龍江饒河155700)

龍血竭緩釋滴丸是以國產(chǎn)血竭龍血竭制備的緩釋制劑.國產(chǎn)血竭名為龍血竭,為百合科植物劍葉龍血樹Dranaena cochinchinensis(Lour.)S.C.Chen的含脂樹皮和木質(zhì)部經(jīng)提取得到的樹脂.具有活血散瘀、鎮(zhèn)痛止血、斂瘡生肌等功效,用于跌打損傷,瘀血作痛,外傷出血[1].現(xiàn)代藥理研究表明,龍血竭具有擴(kuò)張冠狀動脈,降血脂,抗炎止痛,抗真菌,抗糖尿病等多種藥理作用.由于龍血竭難溶于水,口服吸收差,生物利用度低,從而影響了其療效.本研究將其制成緩釋滴丸,緩釋滴丸是將緩控釋固體分散體制成滴丸的形式,與其他緩控釋劑型相比,緩釋滴丸能夠在控制藥物釋放的同時增加藥物溶解度,以期望增加藥物吸收,穩(wěn)定血藥濃度,達(dá)到長效和高效的目的.因此,我們將其制成緩釋滴丸,在提高生物利用度的同時,為其工業(yè)化生產(chǎn)提供參考.?

1 實驗材料與儀器

龍血竭藥材(廣西中醫(yī)學(xué)院制藥廠);龍血素B對照品由中國藥品生物制品檢定所提供(批號:111558-2000303,供含量測定用);聚乙二醇4000、6OOO(天津市福晨化學(xué)試劑廠);波洛沙姆;硬脂酸(天津市博迪化工有限公司);簡易滴丸裝置(自制);D-800LS智能藥物溶出儀(天津大學(xué)無線電廠制造);756PC型可見紫外分光光度計.

2 滴丸的制備方法

稱取龍血竭藥材粉末和基質(zhì)適量,置于一定溫度的水浴中,加熱使之熔融;將熔融液倒入自制滴丸機(jī)中,保溫15min,以一定速度滴入冷凝劑液體石蠟中;待其成型后,收集滴丸,用濾紙吸出表面的液體石蠟,置于干燥器中24 h,即得[2].

3 龍血竭緩釋滴丸處方設(shè)計與優(yōu)化

初步固定滴制條件為:藥液溫度85℃,滴距5 cm,冷卻柱長80 cm,滴速20滴/min,滴口內(nèi)徑0.6 mm,冷凝劑液體石蠟溫度為10～15℃,進(jìn)行龍血竭緩釋滴丸的處方單因素考察和正交實驗設(shè)計.

3.1 波洛沙姆(F-188)用量影響實驗

由于龍血竭藥材難溶于水,在體內(nèi)的溶解性較差,故需要加入一定量的速釋性固體分散體載體材料來促進(jìn)其在體內(nèi)的溶出,本實驗采用的是波洛沙姆(F-188)為載體材料,來提高藥物在體內(nèi)的累計釋放百分含量[3].

固定載藥量為20%,選用聚乙二醇4000(PEG-4000)為水溶性基質(zhì),考察PEG-4000與波洛沙姆(F-188)比例為4∶1,3∶1,2∶1,1∶1時滴丸的粒徑、圓整度及崩解時限.結(jié)果表明加入波洛沙姆對滴丸的粒徑、圓整度影響并不明顯,崩解時限均為3～5min,且隨著波洛沙姆的增加,溶出性越好,在PEG-4000∶F-188為1∶1時,溶出液達(dá)到完全澄清.

3.2 硬脂酸(SA)用量影響實驗

硬脂酸、乙基纖維素、聚丙烯酸樹脂等均為緩釋載體骨架材料,考慮到盡量避免有機(jī)溶劑的使用,而以熔融法制備,故選擇與人體具有良好生物相容性的硬脂酸為緩釋材料[4].

固定載藥量為20%,PEG-4000與波洛沙姆(F-188)比例為1∶1,考察硬脂酸用量占輔料總量的10%、15%、20%、25%時對滴丸的粒徑、圓整度及溶出曲線的影響.結(jié)果表明硬脂酸的含量達(dá)25%時滴丸圓整度較差,20%以下圓整度較好.如圖1所示,硬脂酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)越高藥物釋放越慢.

圖1 硬脂酸用量對滴丸溶出的影響

3.3 載藥量影響實驗

固定硬脂酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%,PEG-4000與波洛沙姆(F-188)比例為1∶1,考察藥物占總量10%、15%、20%、25%時對滴丸的粒徑、圓整度及溶出曲線的影響.結(jié)果表明藥物的含量多少對滴丸的粒徑,圓整度影響并不明顯,載藥量為25%時,滴丸溶出較差.

3.4 正交試驗

經(jīng)過大量的單因素試驗,以滴丸的粒徑、圓整度、崩解時限及溶出曲線為指標(biāo),確定了主要基質(zhì)的類型、用量范圍,在此基礎(chǔ)上采用正交試驗進(jìn)一步篩選處方.對載藥量、硬脂酸用量和波洛沙姆用量按正交設(shè)計L9(34)表試驗,以藥物溶出率達(dá)到一半所需要的時間T50及12 h內(nèi)達(dá)到最大累積溶出度的時間Td為試驗指標(biāo),考察和篩選龍血竭緩釋滴丸的基本處方.將9批實驗樣品分別按2005版中國藥典溶出度測定方法測12 h的累積溶出度,并描繪出溶出曲線[4].L9(34)正交試驗設(shè)計因素和水平見表1,正交試驗測定結(jié)果見表2,溶出曲線見圖2.

表1 正交試驗因素水平表

數(shù)據(jù)處理的結(jié)果分析:以對滴丸的緩釋效果影響最大的T50及Td為指標(biāo),根據(jù)各指標(biāo)的重要性,確定其權(quán)重系數(shù)依次為0.4,0.6,將兩項的最佳指標(biāo)定為滿分,得到綜合評判公式:y=0.4×(100-1.47+y)+0.6×(100-11.8+y2),1.47為9個T50中最大值,11.8為9個Td中最大值.由圖2可見,9次實驗12h的累積溶出率均在95%以上,滴丸的溶出度較好.

表2 正交試驗結(jié)果表

圖2 正交試驗滴丸的溶出曲線

對不同處方試驗結(jié)果進(jìn)行方差分析,比較處方因素對藥物溶出快慢的影響.結(jié)果見表3.

表3 方差分析表

由表3可見,A、B、C 3個因素對結(jié)果均有一定的影響,其中C因素,即硬脂酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)對結(jié)果存在極顯著意義.各因素對T50的影響順序為C＞B＞A,最優(yōu)組合為A2B3C3,對Td的影響順序為C＞B＞A,最優(yōu)組合為A3B1C3,根據(jù)單因素考察情況,波洛沙姆比例越大,藥物溶出越好,越宜被人體吸收,考慮到減少服藥量,綜合平衡后選擇最佳組合為A3B1C3,即載藥量為20%,PEG-4000/波洛沙姆=1∶1,硬脂酸用量占輔料量20%,且與正交試驗的結(jié)果相符.

3.5 滴制條件的優(yōu)化

3.5.1 物料溫度對成型的影響

將藥物與基質(zhì)按照最佳處方比例進(jìn)行熔融,對以下不同的物料溫度80、85、90、95℃共4種方案進(jìn)行比較,其余參數(shù)固定:滴速為20滴/min,滴距5 cm,以圓整度、拖尾情況為評價指標(biāo).料液80℃時下降太慢,拖尾嚴(yán)重;85℃拖尾較重;90℃少量拖尾,成型度較好;95℃時滴丸不成形.故貯料罐溫度可為90℃.

3.5.2 滴距的確定

選用不同的滴距2、3、5、6、8 cm,其余參數(shù)固定:滴速為20滴/min,藥液溫度90℃,進(jìn)行考察.以圓整度、拖尾情況為評價指標(biāo).滴距2 cm時,滴丸過大,圓整度較差;滴距3 cm時最佳;滴距5 cm以上,拖尾或斷尾,故滴距可為3 cm.

3.5.3 滴速對成型的影響

選用不同的滴制速度15、20、30、40滴/min共4種方案比較,其余參數(shù)固定.以圓整度、拖尾情況為評價指標(biāo).在滴速大于30滴/min時,拖尾重,圓整度較差;滴速15或20滴/m in時,滴丸圓整度較好,且少有拖尾,考慮到效率最高,故選擇滴速為20滴/m in.

3.5.4 冷凝液溫度的考察

選用不同的冷凝溫度,0～5℃,6～10℃,11～15℃,15～20℃共4種方案比較.以圓整度、拖尾情況為評價指標(biāo).在一定范圍內(nèi)冷凝液溫度越低,與物料溫差越大,滴丸落下后迅速散熱冷卻,更易成型.但溫度在0～5℃時,液體石蠟幾近凝固,滴制困難,且硬脂酸熔點較低,使物料較軟,溫度過低時,滴丸迅速冷卻成型,圓整度較差,故冷卻液溫度宜為11～15℃,高于15℃則拖尾較重.

以上滴制試驗結(jié)果最終確定龍血竭緩釋滴丸的滴制條件為:藥液溫度90℃,滴速20滴/min,滴距3 cm,冷凝液溫度11～15℃.滴制出的滴丸外表光滑,園整不拖尾.

4 討 論

選用3個不同長度的冷卻管60、80、100 cm進(jìn)行試驗,冷卻管長度過短時,由于冷卻時間不夠,滴丸部分粘連,使圓整度下降,過長則不利生產(chǎn)設(shè)計.故冷卻管長度選用80 cm.

本處方緩釋設(shè)計是要求藥物在體內(nèi)緩慢釋藥達(dá)12 h,處方篩選的依據(jù)定為藥物溶出率達(dá)到一半所需要的時間T50及12 h內(nèi)達(dá)到最大累積溶出度的時間Td,經(jīng)過正交試驗篩選出的 最佳處方2 h釋藥達(dá)到50%以上,10 h釋藥達(dá)80%以上,制劑服用后既可使血藥濃度快速達(dá)到治療范圍又能持續(xù)維持一段時間的藥物濃度[5-6].

[1]王錦亮,李興從,江東福,等.云南血竭的化學(xué)成分及抗真菌活性[J].云南植物研究所,1995,17(3):336-340.

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[3]唐春發(fā).水飛薊素緩釋滴丸的研制及其體外釋放特性[J].中國藥師,2005,8(4):273-277.

[4]符聯(lián)昌,金描真,趙光華.龍血竭黃酮滴丸處方設(shè)計[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報,2007,23(6):615-617.

[5]李 慧,邊寶林,孟繁蘊(yùn),等.精制芎歸緩釋滴丸的制備[J].中國中藥雜志,2005,30(10):747-749.

[6]李 濱,唐慧蓮,王 羅,等.銀翹雙解滴丸制備工藝的研究[J].哈爾濱商業(yè)大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版,2010,26(1):17-18,29.