王翔飛,趙文斌,成玉懷,譚 勇
(石河子大學(xué)藥學(xué)院,新疆特種植物藥資源重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,新疆石河子 832002)
黃花瓦松[Orostachys spinosa (L.) C.A.Mey.]為景天科瓦松屬(Orostachys)二年生肉質(zhì)草本植物,又名昨葉荷草、向天草,為我國(guó)傳統(tǒng)用藥[1]。其性味酸、苦、涼(《唐本草》等),歸肝、肺、脾經(jīng)(《本草再新》),具有清熱解毒、涼血止血、利濕消腫、抗菌消炎等功效,《中國(guó)藥典》2005年版對(duì)其進(jìn)行了收錄。瓦松屬植物全世界約有13種,主要分布于溫帶地區(qū),我國(guó)約有10種,在新疆也有著廣泛的分布(《新疆藥用植物志》第3冊(cè))。本文以新疆產(chǎn)黃花瓦松[Orostachys spinosa(L.)C.A.Mey.]為研究對(duì)象,利用GC-MS對(duì)其脂肪酸組成及含量進(jìn)行分析。
所用試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純,黃花瓦松采自新疆農(nóng)九師165團(tuán)。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC/MS-QP2010,日本島津公司)、十萬分之一電子分析天平(BP211D,德國(guó) Sartorius)、水浴鍋(SB-1000,上海愛明儀器有限公司)、醫(yī)用超聲清洗儀,索氏提取器,粉碎機(jī),60目分樣篩,水浴鍋等。
黃花瓦松全草陰干,粉碎機(jī)粉碎后過60目分樣篩,稱取150 g放入預(yù)先疊好的濾紙筒中,再將裝有瓦松粉末的濾紙筒小心放入索氏提取器中,量取100 ml正己烷加入500 ml圓底燒瓶中,裝好索氏提取裝置,加熱回流10 h,得棕黃色提取液。
正己烷:用蒸餾裝置80℃水浴下濃縮,回收正己烷,得到深棕色的油狀液體,稱重為0.878 0 g,產(chǎn)率為5.80%。
甲酯化方法 (堿催化法):取上述提取濃縮后的油狀物0.2 g,加入正己烷2 ml,再加入2 ml 0.5 mol/L的KOH甲醇溶液,混勻后在70℃水浴下加熱20 min,加水2 ml后,加入2 ml正己烷振蕩、超聲提取,取上層有機(jī)相供GC-MS分析用。
2.4.1 氣相色譜條件 RTX-5MS石英毛細(xì)管色譜柱(30m×0.32 mm×1.0 μm);升溫程序:160℃保持 2 min,以 5℃/min升至 260℃,保持 5 min;載氣為高純氦氣(99.999%He),流速 1.0 ml/min,壓力:96.1 kPa,進(jìn)樣量:1 μl,分流比:30∶1;進(jìn)樣口溫度:260℃,初始柱溫160℃。
2.4.2 質(zhì)譜條件 電子轟擊(EI)離子源,離子源溫度為200℃;質(zhì)量掃描范圍15~500 m/z;電離電壓70 eV;溶劑延遲2.50 min。見圖1。
經(jīng)GC-MS檢測(cè)后,各色譜峰相應(yīng)的質(zhì)譜圖經(jīng)人工解析及計(jì)算機(jī)檢索,按各色譜峰的質(zhì)譜碎片圖與文獻(xiàn)核對(duì),查對(duì)有關(guān)質(zhì)譜資料,對(duì)基峰、質(zhì)荷比和相對(duì)豐度等方面進(jìn)行直觀比較,部分脂肪酸甲酯化產(chǎn)物的質(zhì)譜圖與譜庫中化合物的質(zhì)譜圖對(duì)比,鑒定出6種脂肪酸,并按色譜峰面積歸一化法計(jì)算它們?cè)诳傊舅嶂械南鄬?duì)百分含量,結(jié)果見表1。
表1 黃花瓦松中脂肪酸成分分析Tab.1 Determination of fatty acid in Orostachys spinosa (L.) C.A.Mey.by GC-MS
從黃花瓦松全草中共檢出6種脂肪酸,其中含量較高的是十七烷酸(24.61%),其次是十六酸(棕櫚酸)和油酸,含量分別為22.166%和20.25%。
黃花瓦松中含有人體所必需的脂肪酸中的亞油酸、油酸,并且它們的含量相對(duì)較高,達(dá)33.73%。亞油酸、油酸是不飽和脂肪酸。亞油酸是人體必需的脂肪酸,是人體組織、細(xì)胞的組成成分。亞油酸與脂類代謝和膽固醇代謝密切相關(guān),同時(shí)具有明顯的生物活性,具有降低血脂和膽固醇、減少動(dòng)脈粥樣硬化、抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)[7]和促進(jìn)大腦發(fā)育等作用[8]。
油酸替代膳食中飽和脂肪酸,具有降低低密度脂蛋白(LDL)膽固醇作用。油酸具有比多價(jià)不飽和脂肪酸更高的氧化穩(wěn)定性,能提高機(jī)體抗氧化能力,保護(hù)心血管系統(tǒng),具有更優(yōu)的生理活性,被認(rèn)為是一類有利于健康的脂肪酸。
綜上所述,以正己烷為溶劑,采用索氏提取法提取瓦松全草中的脂肪酸,并用GC/MS進(jìn)行分離鑒定,此法具有簡(jiǎn)單、方便、快捷的優(yōu)點(diǎn),用本法對(duì)黃花瓦松中脂肪酸的研究報(bào)道較少,因此本實(shí)驗(yàn)結(jié)果將對(duì)瓦松的醫(yī)用、藥用等方面的進(jìn)一步開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。
[1]傅書遐,傅坤俊.中國(guó)植物志[M].北京:科學(xué)出版社,1984.
[2]國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局GB/T17376-1998.動(dòng)植物油脂脂肪酸甲酯制備[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,1998:5-10.
[3]孫麗陽.茄子籽中脂肪酸的GC-MS分析[J].鞍山師范學(xué)院學(xué)報(bào),2010,12(2):20-22.
[4]趙婷,岳琳,李勇.巴旦木仁油中脂肪酸成分分析[J].中國(guó)油脂,2009,34(2):78-79.
[5]李金玉.GC-MS測(cè)定無花果中脂肪酸組成[J].食品研究與開發(fā),2009,30(3):119-121.
[6]楊潔等.萊菔子脂肪酸成分的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析[J].中國(guó)藥業(yè),2009,18(4):26-27.
[7]Barzanti,Vanni,Maranesi.Effects of oil,having diffent m6 and n3 fatty acid content on cholesterolemia and serum acids liver fatty acid composition in rats[J].Riv soe Ita sci Aliment,1986,15(1-2):49.
[8]Cesano A,visonneau S,Scimeca JA,et al.Opposit eefects of linoleic acids and conjugated lino1eic acid on human prostatic cancer in SClD mice[J].Antcancer Res,1998,18(2):1429-1434.