侯朝祥，趙培方，劉家勇，趙 俊，吳才文，崔 杰，陳學寬

（云南省農(nóng)業(yè)科學院甘蔗研究所／云南省甘蔗遺傳改良重點實驗室，開遠 661600）

甘蔗組培是一種快速繁殖推廣應用甘蔗良種的有效途徑，根據(jù)離體繁殖路線的不同，可分為愈傷組織成苗法和直接誘導成苗法，其中直接誘導成苗法又可根據(jù)接種外植體的不同，分為腋芽培養(yǎng)和莖尖培養(yǎng)。兩種成苗法，其技術(shù)流程都包括室內(nèi)培養(yǎng)和室外假植。目前室內(nèi)培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)較為成熟，但室外假植管理在實際應用過程中，常受設(shè)施條件和管理技術(shù)的影響，導致成活率不高、成活苗的質(zhì)量差，嚴重影響著甘蔗組培快繁技術(shù)的應用。針對這瓶頸問題，國內(nèi)已有研究人員[1－5]做了相關(guān)研究，并取得了可喜成績。但絕大多數(shù)研究重點是成活率的高低，而對成活植株的質(zhì)量評價較少。本文針對影響甘蔗組培苗一級假植成活質(zhì)量的幾個因素，將假植成活率和成活植株的形態(tài)特征結(jié)合起來，作為評價指標，以云蔗新品種99－91的莖尖組培苗為材料，探索了不同消毒處理、不同苗床基質(zhì)、不同濃度NAA蘸根處理對甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試材料為云南省農(nóng)業(yè)科學院甘蔗研究所自育品種云蔗99－91的莖尖組培苗。

1.2 試驗設(shè)計及方法

為達到高效快捷的目的，參考研究資料，試驗摸索分為3步，第一步確定最佳的消毒處理方式；第二步比較篩選最佳苗床基質(zhì)；第三步利用激素處理，全面提高假植苗質(zhì)量。

1.2.1 不同消毒處理對甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響 以生土＋上層粗沙為基質(zhì)苗床，選取長勢基本一致的組培苗，清洗干凈后，設(shè)兩種消毒處理，即0.1%高錳酸鉀40s和0.5%多菌靈5min。每處理種植3個重復，每個重復種植12余叢，植株成活后1個月，觀察統(tǒng)計成活情況，每個重復隨機選取6叢，每叢隨機調(diào)查1株植株的株高、葉長、葉寬，通過調(diào)查成活率、成活植株的株高、葉長、葉寬（下同），比較兩種消毒處理方式對甘蔗組培苗假植成活質(zhì)量的影響。

1.2.2 不同苗床基質(zhì)對甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響 苗床基質(zhì)設(shè)計了7個處理：①生土；②生土＋上層有機質(zhì)；③生土＋上層細沙；④生土＋上層粗沙；⑤生土＋上層珍珠巖；⑥生土∶珍珠巖＝1∶1；⑦粗沙。每種苗床基質(zhì)的面積為0.36m2，即長×寬為1.2m×0.3m，7個苗床間用塑料板隔離，并保持在同一個水平面，構(gòu)成一個大的整體苗床，假植管理技術(shù)一致。選取長勢基本一致的組培苗，經(jīng)0.5%多菌靈浸泡5min消毒處理種植。1個月后調(diào)查統(tǒng)計不同苗床基質(zhì)上假植苗的成活率及成活植株形態(tài)，比較不同苗床基質(zhì)對甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響。

1.2.3 不同濃度NAA蘸根處理對甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響 選取長勢基本一致組培苗清洗干凈，浸泡于0.3%的多菌靈溶液5min后，分別用濃度為0mg/L、2mg/L、6mg/L、12mg/L、18mg/L的NAA進行蘸根處理20s，假植于生土＋上層粗沙的苗床上。假植51d后通過觀察統(tǒng)計成活率，測量成活植株的株高、葉長、葉寬、根長等形態(tài)指標，比較不同濃度NAA蘸根處理對甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響。

成活率計算公式：假植成活率（%）＝成活株數(shù)/假植株數(shù)×100%

2 試驗結(jié)果

2.1 不同消毒處理對甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響有差異

兩種不同消毒處理方式對甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響有差異。由表1可知，兩種不同消毒處理方式對甘蔗組培苗假植成活率的影響較小，但對成活植株質(zhì)量的影響較大，多菌靈處理的成活植株在株高、葉長、葉寬方面，明顯優(yōu)于高錳酸鉀。

2.2 不同苗床基質(zhì)對甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量有一定影響

不同苗床基質(zhì)對甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量有一定影響，根據(jù)表2可知，生土＋粗沙的苗床基質(zhì)較其他苗床基質(zhì)，在成活率、株高、葉長、葉寬、草害方面均較佳；生土＋細沙的成活率僅為66.0%，可草害較輕，植株性狀一般；生土＋珍珠巖的成活率較高，達到了100.0%，但植株的株高、葉長、葉寬相與生土＋粗沙相比均較低；生土、粗沙基質(zhì)的成活率分別為96.0%、84.5%，但植株的株高、葉長、葉寬較低，且生土的草害最為嚴重。

2.3 不同濃度NAA蘸根處理對甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量影響較大

由圖1可以看出，應用不同濃度的NAA蘸根處理甘蔗莖尖組培苗，對其假植成活質(zhì)量有較大影響，蘸根處理的成活率較對照有所降低，可成活植株的根長、株高、葉長、葉寬均有較大增加，但不同濃度間增加的幅度有差異，且呈現(xiàn)出一定規(guī)律，在0～6mg/L間，成活植株的根長、株高、葉長、葉寬隨著濃度的增加而增加，當處理濃度高于6mg/L時，成活植株的根長、株高、葉長、葉寬隨著濃度的增加而逐漸降低。

表1 不同消毒處理對甘蔗組培苗假植成活質(zhì)量的影響

表2 不同苗床基質(zhì)對甘蔗組培苗假植成活質(zhì)量的影響

圖1 不同濃度NAA蘸根處理對甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響

3 討論

3.1 甘蔗莖尖組培苗在恒溫恒濕全營養(yǎng)含糖的理想環(huán)境中培育而成，當過渡到室外自然環(huán)境后，容易感染霉菌死亡。因此，在假植過程中，對其進行消毒處理成為必不可少的有效措施，可消毒劑的類型、濃度、消毒時間都會影響消毒效果，直接影響著假植苗的成活率、成活植株的質(zhì)量，本文以常用型消毒劑多菌靈與廣西甘蔗研究所組培中心應用的消毒劑高錳酸鉀，設(shè)計了兩個處理，進行比較分析，從試驗結(jié)果來看，用0.5%多菌靈浸泡甘蔗莖尖組培苗5min，對其假植成活質(zhì)量較好，雖然高錳酸鉀處理的成活率略高，可成活植株的質(zhì)量不如多菌靈處理，這可能是處理時間較長的緣故。

3.2 苗床基質(zhì)與濾水透氣性密切相關(guān)，直接影響著甘蔗莖尖組培苗的假植成活質(zhì)量。本試驗分析篩選出較佳的苗床基質(zhì)為“生土＋上層粗沙”，與何為中[4]等人的研究結(jié)論一致，與董立華[1]等、楊生超[2]等研究者報道提出的“沙土沙”苗床基質(zhì)有相似之處，省去了底層沙，減少操作，降低了管理成本。

3.3 NAA作為人工生長素，具有促進生長、生根作用，在甘蔗組培中，被廣泛用于生根培養(yǎng)，而用于假植蘸根處理尚未見報道，為此本試驗進行了嘗試。結(jié)果表明：利用合適濃度的NAA蘸根處理，對提高甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量確實有明顯效果，值得推廣利用。

綜合試驗過程分析表明，甘蔗莖尖組培苗的一級假植成活質(zhì)量受多個因素的影響，主要涉及生根培養(yǎng)基、消毒防霉技術(shù)、苗床基質(zhì)、激素蘸根處理、水肥管理技術(shù)、設(shè)施條件等。其中篩選利用最佳激素配比的生根培養(yǎng)基，培育健壯植株是提高假植成活質(zhì)量的前提；保溫保水設(shè)施條件是高成活率必備條件；消毒防霉技術(shù)是關(guān)鍵；科學的苗床基質(zhì)、水肥管理技術(shù)起著積極作用；適當濃度的激素蘸根處理可發(fā)揮重要的促進作用。將這些影響因素有機結(jié)合起來，形成一套操作可行的技術(shù)措施，才能有效提高甘蔗莖尖組培苗的成活質(zhì)量，培育獲得健壯植株，推廣應用于生產(chǎn)。

[1]董立華，張家瑞，桃聯(lián)安，等.甘蔗芽培苗一、二級苗圃管理技術(shù)[J].甘蔗，2001（2）：32-34.

[2]楊生超，楊清輝，李富生，等.甘蔗腋芽培養(yǎng)苗假植管理技術(shù)研究[J].種子，2001（4）：42-43.

[3]張春良.甘蔗腋芽組培苗一、二級苗定植管理技術(shù)[J].云南熱作科技，2002，25（1）：42.

[4]何為中，曾慧，劉紅堅，等.影響甘蔗組培苗假植成活率的幾個因素的研究[J].甘蔗糖業(yè)，2002（3）：10-12.

[5]張躍彬.云南雙高甘蔗標準化綜合技術(shù)[M].昆明：云南科技出版社，2004