廣東加多寶飲料有限公司 張明珠

菊花中摻假淀粉含量的檢測

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建立菊花中摻入淀粉含量檢測的方法,利用糖化酶轉(zhuǎn)化淀粉和糊精的專一性,糖化酶將淀粉酶解成葡萄糖,葡萄糖與3,52二硝基水楊酸顯色測定樣品中淀粉含量。該法最低檢可檢測樣品中0.5%的淀粉含量。RSD為1.2%,精度良好,回收率在100%～110%之間,準(zhǔn)確性高?？勺鳛榫栈ㄆ焚|(zhì)監(jiān)控的手段。

菊花淀粉糖化酶3,52二硝基水楊酸

在收購菊花過程中發(fā)現(xiàn)部分菊花中含有大量的白色粉末,經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其為摻入的淀粉。為保證入庫菊花品質(zhì)必需建立起有效的監(jiān)控手段。

一、實(shí)驗(yàn)部分

1.主要儀器和試劑

2.實(shí)驗(yàn)方法。(1)樣品處理:樣品經(jīng)粉碎機(jī)打碎混勻,準(zhǔn)確稱取3.000g粉碎后的樣品于裝有跨市定性濾紙的漏斗中,用50ml無水乙醚分次洗滌樣品,去除油脂類物質(zhì)對樣品的干擾,然后用100ml85%乙醇洗去樣品中可溶性糖類。再用50ml水將殘?jiān)慈?50ml燒杯中,于沸水浴中加熱15min,使淀粉糊化,放冷到低于60℃后加入20ml0.5%糖化酶溶液,在59℃水浴中保溫60min,其間若是發(fā)現(xiàn)樣品與碘顯藍(lán)色,則取出加熱糊化,再次冷到60℃后加入20ml0.5%的酶溶液直至淀粉酶解完成。取出樣品,放入沸水浴中加熱15min使酶失活,冷卻后轉(zhuǎn)移到250ml容量瓶中并定容?；靹蚝蟪闉V,收集濾液作為待檢液。取濾液110ml于25ml比色管中,加入2.0ml3,5二硝基水楊酸,在沸水浴中加熱2min,取出立即用流水冷卻,定容到25ml,用試劑空白調(diào)零,在540nm處測定吸光值。同時做樣品空白(不加酶,其余步驟相同)

(2)方法原理:在氫氧化鈉和丙三醇存在條件下,還原糖能將3,5二硝基水楊酸中的硝基還原成氨基化合物,此化合物在過量的氫氧化鈉堿性溶液中呈桔紅色,在540nm處有最大吸收,其吸光度與還原糖含量成線性關(guān)系,利用糖化酶將樣品中的淀粉酶解成葡萄糖,葡萄糖再與3,5二硝基水楊酸顯色測定樣品中的淀粉含量。

二、結(jié)果與討論

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線。準(zhǔn)確稱取在103℃干燥至恒重的葡萄糖制成10mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液作為母液,分別取0、1、2、3、5、7、10ml于10ml容量瓶中定容到10ml。然后各取上述標(biāo)準(zhǔn)液1.0ml于25ml比色管中,按上述方法操作繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,曲線的相關(guān)性為0.997,線性良好。

2.方法的可行性。準(zhǔn)卻稱取0.5g在103℃干燥至恒重的分析純淀粉,加入50ml水,于沸水浴中糊化15min,取出冷卻到60℃以下,加入20ml0.5%糖化酶溶液,水解60min后,冷卻定容到100ml,同時做試劑空白,取定容后的水解液1.0ml顯色,檢測結(jié)果如下:

測量值,mg/ml 0 5.737實(shí)際值,mg/m 0 5.186試劑空白可溶性淀粉相對誤差,% 10.61

在食品分析中樣品的含量在0.1%～1%時,樣品檢測結(jié)果的允許相對誤差為5%～20%,樣品的含量為0.5%,檢測結(jié)果在允許的相對誤差范圍內(nèi),說明糖化酶水解測定淀粉含量方法可行。

3.精度和準(zhǔn)確度。(1)精度:取送檢菊花樣品檢測其中淀粉含量結(jié)果如下:

檢測次數(shù)1 2 3 4平均值RSD,5淀粉含量,% 20.73 21.19 21.15 20.67 20.93 1.23

(2)準(zhǔn)確度:在上述樣品中加入分析純可溶性淀粉,做加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證方法的準(zhǔn)卻性,結(jié)果如下:

1 2 3加入量,% 3.19 33.19 65.78檢測值,% 24.25 56.21 92.69回收率,% 104.8 106.3 109.1

回收率在100%～110%以內(nèi),說明該法的準(zhǔn)確度較好,系統(tǒng)誤差較小。

三、結(jié)論

菊花本身富含糖類,其基質(zhì)較為復(fù)雜,用85%乙醇洗去大部分可溶性糖類后,通過做樣品空白扣除樣品基體帶來的干擾。利用糖化酶的專一性和快速性,檢測菊花中摻入淀粉的含量。該方法準(zhǔn)確性好方便可行,可作為菊花摻假加入淀粉的有效手段。

[1]食品分析.中國輕工業(yè)出版社,1994.10

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