周慶華 ,余興龍

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，湖南長沙410128；2.湖南新五豐股份有限公司，湖南 長沙 410005）

豬繁殖與呼吸障礙綜合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)所引起的豬群疫病之一。該病以母豬流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎、斷奶仔豬肺炎、育肥豬生長遲緩為主要特征，并可引起其他病原的繼發(fā)感染。美國（1987）首先報(bào)道了該病的發(fā)生,而后世界各地均有報(bào)道，目前該病已被國際獸疫局（OIE）列為B類傳染病。

本研究通過監(jiān)測規(guī)模豬場種豬群PRRS血清馴化后血清抗體水平的消長規(guī)律，旨在為探討規(guī)模豬場PRRS的流行規(guī)律和制定規(guī)模豬場PRRS的防控策略提供依據(jù)。

1 材料

1.1 待檢血清 來自某規(guī)?；i場，共采集種豬群不同時(shí)期段血樣210份。

1.2 試劑 豬繁殖與呼吸綜合征抗體監(jiān)測試劑盒(PRRS 2XR)，購于IDEXX北京愛德士元亨生物科技有限公司。

2 方法

2.1 血清獲取方法

自耳靜脈采血（不加抗凝劑），室溫靜置3～6 h后，4000r/min離心10 min，取上清液置于離心管內(nèi)，置-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2 抗體檢測方法

采用IDEXX公司(美國)的豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測試劑盒(PRRS 2XR)對血清進(jìn)行檢測，其使用方法及操作步驟參照試劑盒說明書。

結(jié)果判定：PRRS抗體的有無（陽性/陰性）通過計(jì)算每個(gè)樣品的樣品/陽性對照（S/P）的比值判定。

如果S/P值低于0.4，樣品應(yīng)判定為PRRS抗體陰性。如果S/P值大于或等于0.4，樣品應(yīng)判定為PRRS抗體陽性。

3 結(jié)果與分析

3.1 結(jié)果

檢測結(jié)果見表1。該場種豬群在2007年6月前一直使用哈獸研生產(chǎn)的PRRS滅活疫苗，2007年6月豬群感染高致病性PRRS后實(shí)施了種豬群的血清馴化，期后種豬群沒有免疫任何PRRS疫苗。

3.2 分析

3.2.1 PRRS流行病學(xué)與診斷

該規(guī)模豬場存欄種豬620頭、商品豬5 100頭，年出欄生豬約11 000頭。2007年6月初6周齡保育豬突然出現(xiàn)發(fā)熱（高熱，體溫可達(dá)41.5℃以上）、扎堆、食欲廢絕、精神沉郁、皮毛粗亂、呼吸困難等現(xiàn)象，部分豬關(guān)節(jié)腫大、耳朵、四肢及腹下皮膚等處發(fā)紺，病程3至7天，治療基本無效,死亡率極高。半個(gè)月內(nèi)較小日齡的保育豬及較大日齡的小豬（體重10～40kg）相繼出現(xiàn)病癥，死亡率也極高，6月下旬起種公豬及中大豬開始出現(xiàn)發(fā)熱現(xiàn)象，7月份初懷孕母豬開始陸續(xù)出現(xiàn)發(fā)熱及流產(chǎn)現(xiàn)象，發(fā)熱母豬采取抗生素抗感染治療，死亡率在5%左右。

?

2007年6月13日選有典型發(fā)病癥狀的保育豬7頭送湖南農(nóng)大獸醫(yī)院剖檢及實(shí)驗(yàn)室檢測，4頭病豬組織樣RT-PCR檢測：其中高致病性PRRS有3頭呈陽性，1頭呈陰性，普通PRRS有4頭全呈陰性；豬瘟病毒野毒檢測4頭全呈陰性；偽狂犬野毒鑒別檢測7頭全呈陰性。

3.2.2 PRRS血清馴化

2007年7月24日選取正在發(fā)熱且有典型癥狀的保育豬10頭，分別無菌采血并分離出血清。立即將此10頭豬的血清樣送湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院進(jìn)行病原學(xué)檢測，確定除PRRS病毒外、沒有檢出其它致病性病原，如豬瘟病毒、偽狂犬病毒、圓環(huán)病毒、口蹄疫病毒。再將此10頭豬的血清混合冷凍貯藏。使用時(shí)抽取血清用生理鹽水1∶10稀釋，加抗菌素（如頭孢噻肟鈉）進(jìn)行滅菌處理，配制成感染血清。

2007年7月25日將原發(fā)熱且已流產(chǎn)的康復(fù)母豬集中到一棟欄舍，按每頭母豬1mL肌肉注射配制好的感染血清，第2天同樣劑量再肌肉注射1次，同時(shí)也選取部分原發(fā)病過的康復(fù)后備母豬試用，注射劑量及方法一樣。原發(fā)病過的種豬接種感染血清后1周內(nèi)沒有反應(yīng)，豬只采食及精神狀況仍良好，體溫不升高，說明用發(fā)病保育豬制備的血清病毒與原引起母豬發(fā)熱流產(chǎn)的病毒一致。

2007年7月26日將未感染過的正常斷奶母豬集中到一棟欄舍，按每頭母豬1mL肌肉注射配制好的感染血清，第2天同樣劑量再肌肉注射1次，同時(shí)也選取部分未發(fā)病的正常后備母豬試用，注射劑量及方法一樣。注射感染血清后的第2天，斷奶母豬和后備母豬都出現(xiàn)發(fā)熱不食現(xiàn)象，針對發(fā)熱種豬采取了積極的抗感染治療，1周后感染豬只康復(fù)良好，沒有死亡現(xiàn)象，說明用于感染的血清效果較理想。

2007年8月初進(jìn)行感染血清的擴(kuò)大使用：在完成血清感染試驗(yàn)，取得了預(yù)期的效果后，再進(jìn)行全群擴(kuò)大使用，配制感染血清對種公豬、空懷母豬、斷奶母豬、懷孕100天內(nèi)的母豬及后備母豬進(jìn)行血清馴化，對以上種豬每頭肌肉注射1mL感染血清，第2天同樣劑量再重復(fù)一次。臨產(chǎn)前2周內(nèi)的懷孕母豬、正在分娩的母豬及哺乳母豬，待其產(chǎn)仔斷奶后再分批感染（約5周后全群種豬全部感染完畢）。血清馴化過程中，對發(fā)熱種豬都采取了積極的抗感染治療，懷孕60天內(nèi)的母豬流產(chǎn)率在20%左右，懷孕60天至100天內(nèi)的母豬流產(chǎn)率在80%左右，種豬的死亡率不超過2%。

3.2.3 PRRS防控策略

2007年4月經(jīng)PRRS血清學(xué)檢測，該場種豬群PRRS血清抗體陽性率為36.67%，30份血清樣S/P值均值為0.4637，預(yù)示種豬群屬于PRRS易感群；2007年6月豬群感染高致病性PRRS，種豬群7月表現(xiàn)出病癥，在8月份血清馴化后,整個(gè)種豬群都接觸到了PRRSV。從10月的PRRS血清學(xué)檢測結(jié)果可知，該場種豬群PRRS血清抗體陽性率達(dá)到100%，30份血清樣S/P值均值達(dá)到2.1342，預(yù)示種豬群獲得了高的PRRS抗體，同時(shí)，血清馴化后的母豬所產(chǎn)仔豬的成活率較前大大提升，母豬的繁殖性能也有提升。

種豬群血清馴化后，從2008年4月、10月及2009年4月每隔半年的血清學(xué)檢測結(jié)果來看，PRRS血清抗體陽性率分別為80%、40%、46.67%，血清樣 S/P值均值分別為1.3293、0.5429、0.5574，整體上看，隨著時(shí)間的推延，種豬PRRS抗體水平呈下降趨勢，PRRS陰性豬比例上升。種豬群在此期間配種分娩率、窩平健壯仔等繁殖性能指標(biāo)穩(wěn)定在較好的水平，所產(chǎn)仔豬在產(chǎn)房、保育、生長育肥階段生長性能與成活率指標(biāo)都較高。

2009年10月種豬群抽樣進(jìn)行PRRS血清學(xué)檢測，PRRS血清抗體陽性率為46.67%，30份血清樣S/P值均值為0.8503，其中S/P值＞2.5的樣本有4份，而前一年半的時(shí)間內(nèi)沒有出現(xiàn)過，預(yù)示種豬群中已有個(gè)體感染了新的PRRS，此時(shí)豬場生產(chǎn)尚較穩(wěn)定。2009年11月中旬起種豬群陸續(xù)出現(xiàn)發(fā)熱、厭食、流產(chǎn)的母豬，至12月底約10%的懷孕母豬發(fā)熱并流產(chǎn)，同時(shí)，生長豬出現(xiàn)了嚴(yán)重呼吸道疾病綜合癥，死亡率達(dá)到15%～20%。2010年1月起，母豬零星出現(xiàn)流產(chǎn)現(xiàn)象，種豬繁殖性能降低，母豬產(chǎn)后無乳癥狀突出，產(chǎn)房仔豬成活率明顯下降。2010年4月種豬群血清學(xué)檢測結(jié)果顯示：PRRS血清抗體陽性率為60%，30份血清樣S/P值均值為1.3033，其中S/P值＞2.5的樣本有6份，表明種豬群中仍存在持續(xù)的PRRV感染。

因此，該規(guī)模豬場實(shí)施PRRS血清馴化措施，能顯著縮短種豬群中PRRS的持續(xù)感染時(shí)間，能在較短的時(shí)間內(nèi)使種豬群獲得高的PRRS抗體，并能維持較長時(shí)間（約2年）的良好繁殖與生產(chǎn)性能。但隨著種豬群PRRS抗體水平的下降及陰性豬比例的上升，新的PRRSV能持續(xù)感染種豬群，造成PRRS臨床癥狀在種豬群中暴發(fā)。該規(guī)模豬場采取血清馴化防控策略對于指導(dǎo)PRRS綜合防控的臨床實(shí)踐與實(shí)驗(yàn)研究具有一定的參考價(jià)值。

綜上所述，通過對規(guī)模豬場種豬群定期的PRRS血清學(xué)抗體水平監(jiān)測，根據(jù)PRRS抗體水平的消長規(guī)律，種豬群在血清抗體水平較低、陰性豬比例較高時(shí)，需要提前采取相應(yīng)的防控措施，如重點(diǎn)做好生物安全工作，防止從外引種帶來新的PRRSV，可注射弱毒疫苗提高種豬群的陽性率等，這對規(guī)模豬場如何防控PRRS具有重要意義。 □

[1]Keffaber K.Reproductive failure of unknown etiology[J].Am Assoc Swine Pract Newsl,1989,(2):1～10.

[2]張建武,莊金山,袁世山.中國部分地區(qū)高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒的分子流行病學(xué)研究[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,41(6):182～183.

[3]Teifke JP,Dauber M,Fichtner D.et al.Detection of european porcine reproductive and respiratory syndrome virus in porcine alveolar macrophages by two colour immunofluorescence and in situ hybridization immunohistochemistry double labelling[J].J Comp Pathol,2001,124(4):238～245.

[4]Bilodeau R,Dea S,Sauvageau RA.etal.Porcine reproductive and respiratory syndrome Quebec[J].J Vet Rec,1991,129(5):102～103.

[5]郭寶清,陳章水,劉文興,等.從疑似PRRS流產(chǎn)胎兒分離PRRSV的研究[J].中國畜禽傳染病,1996,(2):1～4.

[6]史喜菊,韓春來,夏春,等.豬繁殖與呼吸綜合征病毒基因組遺傳變異分析[J].動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2003,24(3):58～60.