夏麗文,李大維,張麗杰

(哈藥集團(tuán) 制藥六廠,哈爾濱 150056)

自乳化藥物傳遞系統(tǒng)(self-emulsifying drug delivery systems,SEDDS)是由藥物、油、非離子表面活性劑(SA)所組成的均一、澄清、各相同性的溶液,有時(shí)也包括助溶劑.此體系在胃腸道內(nèi)或 37℃環(huán)境中,通過(guò)胃蠕動(dòng)或溫和攪拌即可自發(fā)形成水包油型乳劑.SEDDS可減少由于藥物與胃腸壁的直接接觸而引起的刺激,提高藥物的生物利用度,同時(shí)可避免水不穩(wěn)定藥物的水解及藥物對(duì)胃腸道的刺激[1-3].染料木素(genistein)為異黃酮類化合物,化學(xué)名稱為 5,7,4′-三羥基黃酮(C15H10O5),難溶于水,具有明顯防治骨質(zhì)疏松癥、心血管疾病和抗腫瘤等多種藥理作用[4-5].染料木素的口服生物利用度極低,限制了其臨床應(yīng)用.本文制備了染料木素自乳化給藥系統(tǒng),以提高染料木素的體外溶出度和口服生物利用度.并以染料木素普通膠囊為參比制劑考察了自乳化制劑的在不同釋放介質(zhì)中的體外溶出度.

1 儀器與試藥

1.1 儀器

日本島津 LC—10A高效液相色譜儀 (配SPD—10紫外可見(jiàn)檢測(cè)器,CK chrom色譜工作站);;HZQ-C空氣振蕩器(哈爾濱市東聯(lián)電子技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司);溶出儀(ZRS-智能型溶出儀,天津大學(xué)無(wú)線電廠);FA2104電子天平(上海精密儀器科學(xué)有限公司).

1.2 試藥

染料木素(陜西慧科科技開(kāi)發(fā)有限公司,純度＞98%);染料木素對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所);染料木素普通膠囊(自制,染料木素 50mg,微晶纖維素 75 mg,羧甲基淀粉鈉 75 mg);Cremophor EL 35(BASF公司);油酸乙酯(北京長(zhǎng)城化學(xué)試劑有限公司);Tween 80(北京益利精細(xì)化學(xué)品有限公司);Transcultol P(法國(guó)佳法賽公司);其它試劑均為分析純.

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 染料木素自乳化軟膠囊的制備

稱取適量的染料木素,加入處方量的油相、乳化劑和助溶劑,油相為油酸乙酯,乳化劑為 T50C50(50%Tween 80-50%Cremophor EL35),助溶劑為Transcultol P,其最佳比例為 45∶45∶10,藥物為輔料總量的 10%.在 40℃,100 r/min空氣振蕩器中振蕩24 h左右使染料木素完全溶解.所得的溶液與明膠在(25±2)℃、相對(duì)濕度 40%的條件下,經(jīng)自動(dòng)旋轉(zhuǎn)軋囊機(jī)壓制成軟膠囊,每粒含染料木素約 50mg.

2.2 染料木素普通膠囊的制備

稱取適量的染料木素,加入處方量的微晶纖維素和羧甲基淀粉鈉,混合均勻后裝入 2號(hào)膠囊中.

2.3 溶出度的測(cè)定

2.3.1 色譜條件

色譜柱為 Diamonsil C18柱(200mm×4.6 mm I.D.,5 μm);以甲醇 -0.05%磷酸(60∶40)為流動(dòng)相;流速為 1.0m L/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為 260 nm,柱溫為 30℃,進(jìn)樣量為 10μL.

2.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

精密稱取染料木素對(duì)照品約 20 mg置 100 m L量瓶中用甲醇溶解,流動(dòng)性定容,得到 200mg/L母液 ;分別從中精密移取 0.1、0.5、1、2、5m L于 10 m L量瓶中,移取 0.1、0.5 mL于 100 mL量瓶中用流動(dòng)性定容 ,得到 0.2、1、2、10、20、40、100mg/L標(biāo)準(zhǔn)液.分別精密取系列標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μL注入液相色譜儀,以峰面積對(duì)質(zhì)量濃度進(jìn)行線性回歸.標(biāo)準(zhǔn)曲線為 A=20 854C-623.2(r=0.999 8).結(jié)果表明染料木素在 0.2～100 mg/L內(nèi)線性關(guān)系良好.

2.3.3 方法精密度和回收率實(shí)驗(yàn)

按“2.3.2”項(xiàng)下的方法配置 1.0、10.0、40.0 mg/L 3種質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,于同日內(nèi)連續(xù)測(cè)定 6次,計(jì)算其日內(nèi)測(cè)定的 RSD;對(duì)上述 3種質(zhì)量濃度的溶液于 6 d內(nèi)分別進(jìn)行測(cè)定,計(jì)算日間測(cè)定的 RSD;同時(shí)計(jì)算方法回收率.結(jié)果見(jiàn)表1.

表1 方法的精密度和回收率,n=6

2.3.4 溶出度的測(cè)定

分別取染料木素自乳化軟膠囊和普通膠囊各6粒,照中國(guó)藥典(2005版)二部溶出度測(cè)定法(附錄Ⅹ C第一法),分別以蒸餾水、0.1 mol/L鹽酸、pH值為 6.8磷酸鹽緩沖液 900mL為溶出介質(zhì),溫度為(37±0.5)℃,轉(zhuǎn)速為 100 r/min,依法操作,分別在 5、10、20、30、45、60min時(shí) ,取溶液 5mL(同時(shí)補(bǔ)充同溫同體積的新鮮介質(zhì)),用 0.45μm微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液,照高效液相色譜法,在 260 nm的波長(zhǎng)處測(cè)定峰面積,計(jì)算累積溶出量,結(jié)果見(jiàn)圖1.自乳化制劑中的染料木素 20min的溶出度即可達(dá) 90%以上,而普通膠囊中的染料木素 45 min的溶出度不足 30%,將染料木素制成自乳化膠囊后,溶出度較普通膠囊有明顯提高.

圖1 染料木素自乳化軟膠囊和普通膠囊的溶出曲線

3 討 論

選擇 Transcultol P作為助溶劑,主要作用是溶解藥物,當(dāng) Transcultol P的比例過(guò)高,不利于軋制軟膠囊.以 T50C50(50%Tween80-50%Cremophor EL35)為混合乳化劑乳化效果要好于 Tween80單獨(dú)作為乳化劑.由于 SEDDS處方中使用了大量的表面活性劑,長(zhǎng)期服用可能對(duì)機(jī)體產(chǎn)生毒性,而助溶劑可能與膠囊殼相互作用導(dǎo)致藥物滲出[6],故在表面活性劑量和助溶劑量盡可能小的前提下,同時(shí)保證藥物充分溶解和形成的乳劑較好為原則,最終確定了該處方.

由溶出度試驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn),SEDDS中染料木素的溶出度明顯高于普通膠囊,表明 SEDDS可以顯著提高難溶性藥物的體外溶出度,進(jìn)而有助于提高口服生物利用度.

染料木素自乳化制劑在三種釋放介質(zhì)(蒸餾水、0.1 mol/L鹽酸、pH 6.8磷酸鹽緩沖液)中的溶出度無(wú)顯著性差別,表明釋放介質(zhì)對(duì)染料木素自乳化制劑的溶出度無(wú)影響.

[1] POUTON CW.Self-emulsifying drug delivery systems:assessment of theefficiency of emulsification[J].Int JPharm.,1985,27:335-48.

[2] POUTON CW.Formulation of self-emulsifying drug delivery systems.Adv Drug Del Rev.,1997,25(4):47-58.

[3] GURSOY R N,BENITA S.Self-emulsifying drug delivery systems(SEDDS)for improved oral delivery of lipophilic drugs[J].Biomed Pharmacother,2004,58(3):173-82.

[4] 黃 枚,陳利銘.染料木素防治癌癥的研究進(jìn)展[J].海峽藥學(xué),2000,12(3):9-10.

[5] 王劍波,顧 宜,郭 萍,等.紫外分光光度法測(cè)定染料木素膠囊含量和溶出度[J].藥物分析雜志,2004,24(5):473-476.

[6] CHARMAN SA,CHARMANW N,ROGGR M C,et al.Selfemulsifying drug delivery systems:formulation and biopharmaceutic evaluation of an investigational lipophilic compound[J].Pharm Res,1992,9:87-93.