鄧衛(wèi)青 婁素琴 孫利偉

河南省新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院（453000）

多西他賽（docetaxel）其化學(xué)結(jié)構(gòu)為氧雜丁環(huán)酯，由結(jié)構(gòu)可知其對(duì)堿和熱均不穩(wěn)定。多西他賽為紫杉醇類抗腫瘤藥，通過干擾細(xì)胞有絲分裂和分裂間期細(xì)胞功能所必需的微管網(wǎng)絡(luò)而起抗腫瘤作用。由從紅豆杉的樹皮或針葉中提取的紫杉醇半合成得到，其體外抗癌活性可達(dá)紫杉醇的10倍[1]，適用于先期化療失敗的晚期或轉(zhuǎn)移性乳腺癌及使用以順鉑為主的化療失敗的晚期或轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌等，臨床較為常用。其價(jià)格相對(duì)較貴，為臨床用藥安全和合理用藥，本研究建立了HPLC法測(cè)定注射用多西他賽的含量，從而對(duì)其質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)督，方法可靠，結(jié)果準(zhǔn)確。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

日本島津LC-2010A高效液相色譜儀；島津SPD檢測(cè)器；METTLER TOLEDO AG135十萬(wàn)分之一電子天平。

1.2 試藥

多西他賽（多帕菲），生產(chǎn)廠家：齊魯制藥有限公司，批號(hào)：809020EW，規(guī)格：1mL：20mg，多西他賽對(duì)照品購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所，水為重蒸餾水，甲醇、乙醇為分析醇，乙腈為色譜醇。

2 多西他賽的含量測(cè)定

2.1 色譜條件

C18Diamond（150mm×4.6mm）柱；檢測(cè)波長(zhǎng)230nm；流速1.0mL/min；柱溫25℃；流動(dòng)相乙靖：水（v/v＝3：2）；進(jìn)樣量10μL。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

精密稱取干燥至恒重的多西他賽對(duì)照品2.00mg，置10mL容量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻。分別進(jìn)樣5、10、20、30、50μL。以峰面積為橫坐標(biāo)，進(jìn)樣量（μg）為縱坐標(biāo)，得回歸方程Y＝0.020547＋4.05424×10-6X（r＝0.9999）。結(jié)果表明多西他賽的進(jìn)樣量在1～8μg與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.3 供試品溶液的制備

精密量取多西他賽樣品100μL，置10mL容量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻。經(jīng)0.45μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液2ml，進(jìn)樣10μL，測(cè)得峰面積，計(jì)算多西他賽含量。多西他賽含量為標(biāo)示量的97.4%。

2.4 精密度

吸取多西他賽對(duì)照品液10μL進(jìn)樣，連續(xù)5次，測(cè)量峰面積，RSD=0.9%。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一供試品溶液，分別于0、1、2、4、6、8h進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算得尺RSD=1.32%，供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6 加樣回收率

取“2.3”項(xiàng)下處理的多西他賽樣品6份，分別加入多西他賽對(duì)照品液1mL，計(jì)算得平均回收率99.0%，見表1。

3 結(jié) 果

3.1 多西他賽保留時(shí)間7.7min左右，多西他賽標(biāo)準(zhǔn)品高效液相色譜圖，見圖1。

3.2 多西他賽樣品色譜圖，見圖1。

4 討 論

筆者考察了不同比例的甲醇-水、乙腈-水系統(tǒng)作為流動(dòng)相時(shí)色譜峰的狀況，結(jié)果顯示乙腈-水系統(tǒng)下，峰形較好，理論塔板數(shù)較高，流動(dòng)相乙靖∶水（v/v＝3∶2）時(shí)達(dá)峰時(shí)間適當(dāng)，因此以此為依據(jù)確立流動(dòng)相的選擇。同時(shí)，為保證試驗(yàn)的最大平行性，選擇柱溫25℃，以便每次試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行更好對(duì)比。波長(zhǎng)選擇上，多西他賽在190nm、230nm波長(zhǎng)處有最大吸收，紫外吸收?qǐng)D見圖2，為避免溶劑的末端吸收，因此檢測(cè)波長(zhǎng)選為230nm。通過本實(shí)驗(yàn)的研究，建立了多西他賽注射液質(zhì)量控制的新方法，保證了臨床用藥安全。

表1 加樣回收率表

圖1 HPLC色譜圖

圖2 多西他賽紫外-可見光全波長(zhǎng)吸收?qǐng)D

[1]元英進(jìn),葛志強(qiáng),馮霞.抗癌新藥紫杉醇和多烯紫杉醇[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2002.