潘廣洲，高國(guó)敬，傅 偉

（1.山東省聊城市藥品檢驗(yàn)所，山東 聊城 252000； 2.山東醫(yī)藥技師學(xué)院，山東 泰安 271016）

目前市場(chǎng)上有一些降糖類中成藥和保健品非法加入磺酰脲類、雙胍類化學(xué)藥物來(lái)欺騙患者?，F(xiàn)階段檢測(cè)方法主要有薄層色譜（TLC）法、高效液相色譜（HPLC）法、液相質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）法。筆者通過(guò)大量試驗(yàn)建立了1種試管反應(yīng)鑒別方法，本文旨在比較TLC法和試管反應(yīng)法兩種方法在快速檢測(cè)降糖類中成藥中添加磺酰脲類化學(xué)成分方面的優(yōu)劣，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

試管，錐形瓶，漏斗，薄層板（青島海洋化工廠分廠，批號(hào)為050416）。三氯甲烷，硫酸銅試液，0.01 mol/L氫氧化鈉溶液，濃氨水，濃鹽酸，環(huán)己烷，無(wú)水乙醇，冰醋酸（均為分析純）。格列本脲對(duì)照品（批號(hào)為100135-0103）、格列美脲對(duì)照品（批號(hào)為100674-200301）、格列喹酮對(duì)照品（批號(hào)為100280-200301）、格列齊特對(duì)照品（批號(hào)為 100269-200402）、格列吡嗪對(duì)照品（批號(hào)為100281-200602），均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。參芪降糖膠囊（河南A廠，批號(hào)為080103，編號(hào)①）；消糖靈膠囊（煙臺(tái)A廠，批號(hào)為0708031，編號(hào)②）；糖尿樂(lè)膠囊（吉林A廠，批號(hào)為20080666，編號(hào)③）；格列本脲片（山西A廠，批號(hào)為0807101，編號(hào)④）；降糖甲片（吉林B廠，批號(hào)為080602，編號(hào)⑤）；參芪降糖膠囊（河南A廠，批號(hào)為080611，編號(hào)⑥）；甘露消渴膠囊（陜西A廠，批號(hào)為0806021078，編號(hào)⑦）；降糖寧膠囊（惠州 A廠，批號(hào)為 061223，編號(hào)⑧）；糖脂寧膠囊（廣西A廠，批號(hào)為080901，編號(hào)⑨）；降糖寧膠囊（山西A廠，批號(hào)為080704，編號(hào)⑩）；糖尿靈片（江西A廠，批號(hào)為 08020302，編號(hào)○11）；參芪降糖顆粒 （魯南 A廠，批號(hào)為0703507，編號(hào)○12）；消渴降糖膠囊（黑龍江 A 廠，批號(hào)為 080401，編號(hào)○13）；消渴平膠囊 （吉林 C 廠，批號(hào)為 20080102，編號(hào)○14）；參芪降糖膠囊（河南A廠，批號(hào)為080103，編號(hào)○15）。

2 方法與結(jié)果

2.1 方法

試管反應(yīng)法：1）取待測(cè)樣品適量，相當(dāng)于1次口服量，作為供試品，研細(xì)，放入具塞錐形瓶中，加入20 mL三氯甲烷，震蕩，提取20 min，過(guò)濾，收集濾液作為供試液A；2）將供試液A水浴蒸干，得殘?jiān)?，加?.01 mol/L的NaOH溶液3 mL使殘?jiān)浞秩芙?，然后使用微孔濾膜過(guò)濾，得供試液B，用試管收集供試液B；3）向供試液B中滴入5滴CuSO4試液，震蕩，使溶液充分反應(yīng)，得供試液C；4）向供試液C中滴入10滴濃氨水，震蕩試管使充分反應(yīng)，至溶液呈現(xiàn)深藍(lán)色，作為供試液D；5）收集供試液D并用微孔濾膜過(guò)濾，得供試液E，用試管收集供試液E；6）向供試液E中滴入約10滴濃鹽酸，使深藍(lán)色消失。經(jīng)以上6步反應(yīng)，如果出現(xiàn)沉淀，結(jié)果呈陽(yáng)性，可判斷供試品中添加了磺酰脲類化學(xué)成分，如果未出現(xiàn)沉淀，結(jié)果呈陰性，可判斷供試品中未添加磺酰脲類化學(xué)成分。

TLC法：分別精密稱取格列本脲、格列齊特、格列吡嗪、格列喹酮、格列美脲對(duì)照品各5 mg，加三氯甲烷5 mL使其溶解，得對(duì)照品溶液，備用。分別取各樣品的1次口服劑量，研細(xì)，分別置100 mL具塞錐型瓶中，各加三氯甲烷30 mL，超聲30 min，濾過(guò)，蒸干，殘?jiān)尤燃淄? mL使其溶解，得樣品溶液，備用。采用硅膠GF254預(yù)制板（100 mm×100 mm，青島海洋化工廠分廠，批號(hào)為050416，厚度為0.20～0.25 mm），臨用前110℃活化30 min。展開(kāi)劑為三氯甲烷 -環(huán)己烷 -無(wú)水乙醇 -冰醋酸（8 ∶13 ∶1 ∶1）[1]；展開(kāi)方式為預(yù)飽和15 min，上行展開(kāi)，展距為8 cm；溫度為22℃；相對(duì)濕度為55%。

2.2 結(jié)果

結(jié)果見(jiàn)表1，可見(jiàn)TLC法出現(xiàn)假陽(yáng)性的幾率很高，其中編號(hào)①，③，⑥的藥品為假陽(yáng)性，而試管反應(yīng)在抽檢的品種中沒(méi)有出現(xiàn)假陽(yáng)性，TLC法和試管反應(yīng)法均無(wú)假陰性。

表1 試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

比較快速檢測(cè)降糖類中成藥中非法添加化學(xué)藥物的TLC法和試管反應(yīng)法，可以得出以下結(jié)論：1）試管反應(yīng)法成本更低，不需要昂貴的儀器，非常適合在基層藥檢系統(tǒng)尤其是偏遠(yuǎn)地區(qū)的推廣；2）試管反應(yīng)法更迅速，而迅速是快檢的一個(gè)基本要求；3）試管反應(yīng)法試驗(yàn)結(jié)果更明顯，現(xiàn)象易觀察，操作步驟簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性好；4）試管反應(yīng)法靈敏度更高，專屬性更強(qiáng)，沒(méi)有出現(xiàn)1例假陽(yáng)性和假陰性。綜上所述，試管反應(yīng)法成本低廉、消耗低，非常適合于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)降糖類中成藥和保健食品中是否添加了磺酰脲類化學(xué)藥物，對(duì)于保障藥品質(zhì)量和用藥安全具有重要意義。

[1]李 波.降糖類中成藥中違法添加化學(xué)藥的檢定技術(shù)研究[J].中華現(xiàn)代中西藥雜志，2005，3（3）：255.