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        用 ELISA方法檢測(cè)乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物少見(jiàn)模式的分析

        2010-07-12 10:35:54隋少玉牟洪香高榮升
        黑龍江醫(yī)藥科學(xué) 2010年5期
        關(guān)鍵詞:血清檢測(cè)

        辛 華,隋少玉,牟洪香,高榮升,金 彪,張 英

        (1.佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科,黑龍江佳木斯 154003;2.佳木斯大學(xué)附屬第二醫(yī)院檢驗(yàn)科,黑龍江 佳木斯 154002;3.佳木斯市醫(yī)保醫(yī)院,黑龍江佳木斯 154002)

        乙型肝炎病毒(HBV)是一種嗜細(xì)胞病毒,是危害人民群眾健康的主要傳染病之一,它的血清學(xué)模式(俗稱“兩對(duì)半”模式)備受關(guān)注,是乙型肝炎臨床診斷和治療的重要依據(jù)。近年來(lái),臨床上出現(xiàn)愈來(lái)愈多的 HBV血清標(biāo)志物(HBVM)特殊模式,對(duì)該模式的研究有助于我們加深對(duì) HBV感染發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí),提高對(duì) HBV感染的診斷和防治水平。本文就HBVM特殊模式的產(chǎn)生原因,臨床意義分析如下。

        1 材料與方法

        1.1 對(duì)象

        標(biāo)本來(lái)自2009年1月至 12月在佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院住院及門診就診的隨機(jī)人員血清共13200例,檢測(cè) HBV M五項(xiàng)。

        1.2 儀器與試劑

        1.2.1 儀器

        使用北京普朗公司生產(chǎn)的 DNM-9602G型酶標(biāo)儀及安圖生物公司生產(chǎn)的 Fluido洗板機(jī)。

        1.2.2 試劑

        乙肝檢測(cè)試劑購(gòu)自科華實(shí)業(yè)生物技術(shù)有限公司,乙肝五項(xiàng)質(zhì)控品購(gòu)自衛(wèi)生部臨檢中心。

        1.3 方法

        ELISA法,操作嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書要求進(jìn)行。

        2 結(jié)果

        在 13200例樣本中共檢出710例 HBVM少見(jiàn)模式,結(jié)果如表1。

        表1 710例 HBV M少見(jiàn)模式結(jié)果

        3 討論

        HBVM五項(xiàng)是由 HBV-DN A負(fù)鏈兩個(gè)開(kāi)放讀碼框架S、C區(qū)基因復(fù)制表達(dá)所致??梢远嘟嵌?、間接地反映 HBV復(fù)制感染情況。也可以用作抗病毒療效,乙型肝炎病情轉(zhuǎn)歸及預(yù)后評(píng)判。

        在 HBsAg/HBsAb共存模式中 ,共檢出 5、6、7、8、9等陽(yáng)性模式。應(yīng)與 S區(qū)基因突變,不同 HBsAg亞型感染有關(guān)。出現(xiàn)該模式時(shí),應(yīng)結(jié)合臨床資料,肝臟功能指標(biāo),追蹤檢測(cè)HBVM,開(kāi)展 HBV-DN A檢測(cè),綜合分析 HBV感染狀況。模式 10的出現(xiàn),可能與 C區(qū)基因 1896G→ A突變,病毒野生株與變異株共同存在有關(guān)。通常認(rèn)為 HBeAg陽(yáng)性是 HBV復(fù)制活躍的指標(biāo)之一。HBeAb的出現(xiàn),是 HBV復(fù)制減弱或停止,病情趨于好轉(zhuǎn)的標(biāo)志,但近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),急性重癥肝炎或慢性肝炎急性加重的 HBVM模式也見(jiàn)于 HBeAb陽(yáng)性[1],因此對(duì)該少見(jiàn)模式應(yīng)密切觀察肝功能各項(xiàng)指標(biāo),結(jié)合 HBV-DNA以制定治療措施。模式1臨床觀察表明,大多都是病毒基因整合至肝細(xì)胞 ,隨肝細(xì)胞復(fù)制,表達(dá) HBsAg,并無(wú)完整的 Dane顆粒合成[2]。因此對(duì)于該模式的出現(xiàn),不能簡(jiǎn)單判定為 HBsAg攜帶者,應(yīng)結(jié)合 HBV-DN A檢測(cè),分析 HBV感染狀況[3]。模式 2和11的出現(xiàn),可能與 HBsAg高濃度鉤狀效應(yīng)和類風(fēng)濕因子等自身抗體干擾有關(guān)。因此該模式的出現(xiàn),將原血清稀釋5倍以上或通過(guò)兩步法復(fù)檢,以排除 HBsAg假陰性。模式4和12的出現(xiàn)可能有三種情況:(1)HBsAg呈低濃度水平,常規(guī) ELISA方法無(wú)法檢測(cè)出來(lái)(2)HBV感染后的僅存感染標(biāo)志物(3)HBsAg濃度高,因 HOOK效應(yīng)所致的HBsAg假陰性。因此,對(duì)于該模式應(yīng)該采取將原血清5倍以上稀釋或采取二步 ELISA方法并結(jié)合 HBV-DNA檢測(cè),方可下結(jié)論。模式13、14、15系 HBV感染后已產(chǎn)生免疫力,并伴感染標(biāo)志物的存在。

        綜上所述,用一步法 ELISA檢測(cè) HBVM時(shí),出現(xiàn)的少見(jiàn)模式切不可妄下結(jié)論,應(yīng)通過(guò)平行雙孔復(fù)檢或兩步 ELISA復(fù)檢并結(jié)合 HBV-DNA檢測(cè),肝臟功能指標(biāo)測(cè)定,并結(jié)合臨床資料,綜合分析 HBV復(fù)制、感染狀況。同時(shí),還要做好動(dòng)態(tài)隨訪觀察。

        [1]林裕龍,彭永正,馮桂湘,等.乙型肝炎病毒前 C信號(hào)肽酶裂解位點(diǎn)變異對(duì) HBeAg表達(dá)的影響 [J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2004,27(1):17-19

        [2]李夢(mèng)東.實(shí)用傳染病學(xué) [M].第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1998,104-107

        [3]楊道瓊,陳華根.單純 HBsAg陽(yáng)性臨床分析[J].四川醫(yī)學(xué),2004,25(12):1326

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