李長(zhǎng)福,鄭著家

(大慶油田總醫(yī)院消化科,黑龍江 大慶 163001)

胃癌是我國(guó)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,在我國(guó)其發(fā)病率居各類(lèi)腫瘤首位 ,占全部惡性腫瘤死亡人數(shù) 1/4。因此,尋找新的胃癌防治方法有重要的臨床意義。研究表明,胃癌的發(fā)生、發(fā)展與凋亡細(xì)胞數(shù)目減少有密切聯(lián)系。細(xì)胞凋亡失控會(huì)引起細(xì)胞過(guò)度增殖和凋亡減少,從而導(dǎo)致腫瘤發(fā)生、發(fā)展。生存素(Survivin)屬于凋亡抑制蛋白 (IAP)家族,通過(guò)抑制 Caspase-3表達(dá),抑制腫瘤細(xì)胞凋亡而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。Bcl-2是凋亡調(diào)控基因,廣泛抑制各種刺激因素誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡,延長(zhǎng)細(xì)胞活力而發(fā)揮生物學(xué)作用。Survivin與 Bcl-2在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的關(guān)系尚不明確。因此,本研究通過(guò)檢測(cè)胃癌組織中 Survivin和 Bcl-2表達(dá),探討 Survivin和 Bcl-2與胃癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系及其臨床意義。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本及來(lái)源

收集黑龍江省大慶油田總醫(yī)院 2008— 01～ 2009— 06手術(shù)切除胃癌標(biāo)本40例,取癌組織同時(shí)取癌旁正常胃黏膜組織。 其中男 26例 ,女 14例,年齡 40～ 75(平均 65.12)歲,其中未 /低分化癌22例,中 /高分化癌18例;胃癌的分期采用1997年 U ICC分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行 TNM分期 ,Ⅰ ～Ⅱ期 28例,Ⅲ ～Ⅳ期12例;無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 21例,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移19例;未侵及漿膜者20例,侵及漿膜者20例。

1.2 試劑及方法

兔抗人 Survivin和 Bcl-2單克隆抗體購(gòu)于 Sigma生物技術(shù)公司。SP試劑盒購(gòu)于北京中杉金橋生物技術(shù)公司。按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

1.3 免疫組化染色結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)

常規(guī)制備石蠟切片及 HE染色,組織標(biāo)本均經(jīng)40g/L甲醛固定,石蠟包埋,4μm厚連續(xù)切片,行病理組織學(xué)檢查。采用 SP試劑盒免疫組化方法染色,用 PBS替代一抗作陰性對(duì)照,癌旁正常組織作為正常對(duì)照。Survivin和 Bcl-2陽(yáng)性染色位于細(xì)胞漿內(nèi),呈棕黃色顆粒狀。按陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占細(xì)胞總數(shù)的比例判定：高倍鏡下選取10個(gè)視野,計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù) ,陽(yáng)性細(xì)胞數(shù) ＜10%(-),≥10%(+)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用 SPSS11.0統(tǒng)計(jì)包,數(shù)據(jù)用i2檢驗(yàn)及 Spearman等級(jí)相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 Survivin陽(yáng)性表達(dá)

Survivin陽(yáng)性產(chǎn)物位于細(xì)胞漿中 ,呈棕黃色顆粒狀。在胃癌組織中 Survivin蛋白陽(yáng)性率60.00%,在癌旁正常胃黏膜組織中 Survivin蛋白陽(yáng)性率22.50%,兩者比較有顯著性差異 (i2= 11.605,P ＜ 0.01),見(jiàn)表 1。

表1 Survivin在胃癌組織與癌旁正常組織中的表達(dá)(n=40)

胃癌組織中 Survivin蛋白表達(dá)陽(yáng)性率在男性患者中高于女性,但兩者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＞ 0.05);胃癌組織中 Survivin蛋白表達(dá)陽(yáng)性率在高/中分化癌組織中低于未/低分化癌組織,兩者比較有顯著性差異 (i2= 4.713,P＜0.05);胃癌組織中 Survivin蛋白表達(dá)陽(yáng)性率在Ⅰ～Ⅱ期癌組織中低于Ⅲ～Ⅳ期癌組織,兩者比較有顯著性差異(i2= 4.682,P＜0.05);胃癌組織中 Survivin蛋白表達(dá)陽(yáng)性率在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌組織中低于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌組織,但兩者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (i2= 3.480,P＞ 0.05);胃癌組織中 Survivin蛋白表達(dá)陽(yáng)性率在無(wú)漿膜侵潤(rùn)癌組織中低于有漿膜侵潤(rùn)癌組織,兩者比較有顯著性差異 (i2= 4.286,P＜0.05);Survivin與胃癌各臨床病理因素間的關(guān)系,見(jiàn)表2。

表2 Survivin與胃癌臨床病理因素間的關(guān)系

2.2 Bcl-2在胃癌組織中的表達(dá)

40例胃癌組織中有30例 Bcl-2呈陽(yáng)性表達(dá),其陽(yáng)性率為75.00%;30例 Bcl-2陽(yáng)性表達(dá)中 Survivin陽(yáng)性表達(dá)占22例,陽(yáng)性率為73.33%;Survivin的表達(dá)與 Bcl-2的表達(dá)呈正相關(guān)(r= 0.471,P ＜ 0.01),見(jiàn)表 3。

表3 胃癌組織中 Survivin的表達(dá)與 Bcl-2的表達(dá)關(guān)系

3 討論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在胃癌組織中 Survivin陽(yáng)性表達(dá)率為60.00%,且隨胃癌分化程度、TNM分期增加及漿膜侵潤(rùn)程度,其陽(yáng)性表達(dá)率亦隨之增高。研究結(jié)果提示 Survivin在胃癌發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中可能起重要作用。在 Bcl-2陽(yáng)性表達(dá)胃癌組織中 Survivin陽(yáng)性率為73.33%,提示 Bcl-2與 Survivin可能在胃癌發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起協(xié)同作用,這些結(jié)果也進(jìn)一步證實(shí)胃癌的發(fā)生、發(fā)展是多種基因和多種因子共同作用的結(jié)果。Survivin是 IAP家族中一個(gè)新成員,屬凋亡抑制因子,通過(guò)直接或間接抑制凋亡效應(yīng)蛋白酶 Caspase-3和 Caspase-7活化來(lái)阻斷細(xì)胞凋亡過(guò)程,促進(jìn)細(xì)胞增殖[1,2]。因此,Survivin參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程。Survivin基因在正常組織中不表達(dá)或低表達(dá),而在腫瘤組織中呈高表達(dá),這一特點(diǎn)使其可能成為判斷腫瘤病人發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后的一項(xiàng)重要指標(biāo)[3,4]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在胃癌組織中 Survivin陽(yáng)性表達(dá)較癌旁正常組織顯著增高,且隨胃癌分化程度、TNM分期增加及漿膜侵潤(rùn),其陽(yáng)性表達(dá)率亦隨之增高。故推測(cè) Survivin陽(yáng)性表達(dá)可能是胃癌發(fā)生、發(fā)展的標(biāo)志之一。檢測(cè)胃癌組織中Survivin表達(dá)可能對(duì)判斷腫瘤的發(fā)生和臨床進(jìn)展有一定作用。有關(guān)胃癌組織中 Survivin與 Bcl-2蛋白表達(dá)的關(guān)系尚不明確。本研究結(jié)果顯示,在 Bcl-2陽(yáng)性和陰性的胃癌組織中,Survivin陽(yáng)性表達(dá)率分別為73.33%和20.00%,Survivin表達(dá)與 Bcl-2表達(dá)呈正相關(guān),這與研究報(bào)道一致[5]。提示兩者表達(dá)可能在胃癌發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中具有協(xié)同作用。這為進(jìn)一步探索胃癌治療方案提供有價(jià)值的線(xiàn)索。胃癌的發(fā)生、發(fā)展是多因素、多階段、多基因變異的病理過(guò)程。其發(fā)生機(jī)制尚未完全闡明,但和多種基因表達(dá)異常密切相關(guān)。Survivin與 Bcl-2兩種生物因子的檢測(cè),可作為胃癌發(fā)生與發(fā)展的重要參考指標(biāo),有望成為胃癌基因診斷性標(biāo)志物和胃癌治療的新靶點(diǎn)。

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