宋繼榮,宋 敏

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科,黑龍江 佳木斯 154003)

子宮腺肌病是指子宮內(nèi)膜組織存在于子宮肌層中,并伴有不同程度的肌層平滑肌細胞增生和肥大[1]。該病雖然屬于婦科良性疾病,但具有惡性腫瘤的某些生物學(xué)行為,其確切的發(fā)病機理至今仍不十分清楚。近幾年來子宮腺肌病的發(fā)病機理多從惡性腫瘤發(fā)生的角度來探討已成為該疾病研究的突破點。P53基因的突變或失活均與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著密切的關(guān)系。本實驗應(yīng)用免疫組化 SP法來檢測突變型P53在子宮腺肌病患者的在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜的表達及意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集我院 2009— 02～ 2009— 10經(jīng)病理實驗室確定為子宮腺肌病的異位內(nèi)膜的石蠟標(biāo)本41例,并收集同期子宮腺肌病在位內(nèi)膜37例作為研究組。另選經(jīng)病理證實為非內(nèi)異癥、非子宮內(nèi)膜疾病(如子宮肌瘤)行子宮全切術(shù)或診斷性刮宮,病理證實為正常子宮內(nèi)膜的石蠟標(biāo)本30例作為研究組。所選標(biāo)本均經(jīng)重新切片后 HE染色和病理確診。研究組與對照組年齡、體重均無統(tǒng)計學(xué)意義。兩組月經(jīng)規(guī)律,均無內(nèi)科合并癥及免疫性疾病。術(shù)前6個月均未使用過激素類藥物和未放置宮內(nèi)節(jié)育器。

1.2 方法

本實驗采用免疫組織化學(xué) SP法將石蠟標(biāo)本做4μm連續(xù)切片、染色。PBS替代一抗作為陰性對照,以已知陽性片作陽性對照。

1.3 判定標(biāo)準

顯微鏡下根據(jù)細胞染色強度和染色細胞所占面積的得分之和進行評估：(1)染色強度評分：不著色為0分,黃色為1分,棕黃色為2分,黃褐色為 3分;(2)染色細胞占整張片面積評分：無陽性細胞染色為 0分,≤ 25%為1分,26%～ 50%為 2分,＞ 50%為3分。(3)兩種評分相加,0～ 1分為 (-),2分為弱陽性(+ ),3～ 4分為陽性(++ ),5～ 6分為強陽性(+++ )。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用 SPSS13.0統(tǒng)計軟件對實驗數(shù)據(jù)進行 i2檢驗,檢驗水準 α=0.05。

表1 突變型 P53在正常子宮內(nèi)膜、子宮腺肌病在位及異位內(nèi)膜的表達

2 結(jié)果

見表 1。P53在正常子宮內(nèi)膜中表達呈陰性;在子宮腺肌病患者異位內(nèi)膜和在位內(nèi)膜中表達均呈陽性,兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (i2=22.755,P＜0.05)。P53在子宮腺肌病在位內(nèi)膜的表達與正常內(nèi)膜的表達比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(i2= 11.853,P＜0.05)。P53在子宮腺肌病異位內(nèi)膜的陽性表達平顯著高于正常子宮內(nèi)膜兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(i2= 50.508,P＜0.05)。

3 討論

P53蛋白被稱為人體內(nèi)的一個關(guān)鍵的細胞凋亡調(diào)節(jié)因子。野生型 P53在細胞的周期中能夠阻滯細胞的凋亡、分化、靜息、DN A的損傷。突變型 P53與野生型 P53的生物學(xué)的功能恰恰相反,它不僅失去了對細胞生長的抑制作用,反而促進細胞的轉(zhuǎn)化和過度增殖,抑制細胞凋亡,使細胞的全部表型出現(xiàn)惡性化。正常的 P53蛋白生物伴隨期較短,僅20～30min,不易在組織細胞中堆積,在免疫組化法不能檢測其存在,突變型 P53蛋白生物伴隨期相對延長,達 24h左右,且穩(wěn)定性增加,并可在組織細胞中堆積重而過度表達 ,易被 SP法檢測到[2]。我們可以認為,通過免疫組織化學(xué)法檢測出 P53蛋白陽性即提示突變型 P53的存在[3]。本實驗應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色法來對子宮腺肌病的在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜均、正常子宮內(nèi)膜進行染色,檢測結(jié)果顯示,異位內(nèi)膜陽性率較在位內(nèi)膜陽性率高,這與 Gebel等[4]的研究報道相符,同時本研究還比較了在位內(nèi)膜與正常子宮內(nèi)膜陽性率,得出在位內(nèi)膜陽性率高于正常子宮內(nèi)膜。由此可見,由于異位內(nèi)膜的凋亡性減弱,使其在子宮肌組織生存時間延長,并具有腫瘤樣過度增殖的特性,促使了子宮腺肌病的以發(fā)生、發(fā)展。本實驗采用免疫組織化學(xué)染色法,來觀察子宮腺肌病的異位子宮內(nèi)膜及在位內(nèi)膜突變型 P53蛋白的表達,結(jié)果顯示：子宮腺肌病組的陽性表達率明顯高于正常對照組,由此可以推測異位的子宮內(nèi)膜在離開宮腔后仍然可以繼續(xù)生長、增值,像惡性腫瘤一樣,形成異位灶。同時實驗結(jié)果顯示子宮腺肌病突變型 P53蛋白的陽性率表達的升高與細胞凋亡水平的降低是同步的。因而得出結(jié)論：子宮腺肌病在位內(nèi)膜和異位內(nèi)膜中細胞凋亡受到了抑制很可能與突變型 P53蛋白的高表達有關(guān)。這與李紅霞等[5]的研究報道結(jié)果一致。

[1]徐叢劍.子宮內(nèi)膜異位癥[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,2002,98

[2]Iggo R,Gatter K,Bartek J,et al.Increased expression of mutantformsofp530ncogeneinprimarylungcancer[J].Lancet,1990,335(8691)：675-679

[3]Yamaguehi A,Kurosaka Y,Fushida S,et al.Expression of p53 Protein in colorectal cancer and its relationship toshort- term prognosis[J].Cancer,1992,70(12)：2778-2884

[4]Gebel HM,Braun DP,Tambur A,et al.Spontaneous apoptosis of endometrial tissue is impaired in women with endometriosis[J].Fer-tile Steril,1998,69：1042-1047

[5]李紅霞,冷靜,姚玉宇,等.子宮內(nèi)膜異位癥與細胞凋亡關(guān)系的研究[J].江蘇醫(yī)藥雜志,2000,26(1)：871-872