董金香，邱智東，董雪蓮（長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林長(zhǎng)春130117）

SCFE-CO2法提取決明子中蒽醌類成分的工藝研究

董金香，邱智東，董雪蓮
（長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林長(zhǎng)春130117）

目的確定CO2-超臨界流體提取決明子中蒽醌類成分的最佳工藝。方法采用正交試驗(yàn)法，單因素考察法，優(yōu)選CO2-超臨界流體最佳提取條件，確定最佳提取工藝。結(jié)果CO2-超臨界流體最佳提取條件為：萃取溫度60℃，萃取壓力20MPa，萃取時(shí)間2 h，加75%乙醇為夾帶劑。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)優(yōu)選出的提取工藝合理，CO2-超臨界流體萃取法可以用于決明子中蒽醌類成分的提取。

決明子；CO2-超臨界流體萃取法；總蒽醌；大黃酚

決明子為豆科植物決明Cassia botusifolia L.或小決明Cassia tora L.的干燥成熟種子，具有清熱明目、潤(rùn)腸通便的作用，為臨床常用中藥。主要含有多種蒽醌類成分，本實(shí)驗(yàn)采用超臨界流體萃取方法進(jìn)行提取，通過正交試驗(yàn)及單因素考察法來優(yōu)選超臨界二氧化碳萃取法提取決明子蒽醌類成分的最佳提取條件，確定提取工藝。

1 儀器與試藥

HA221-50-06型超臨界萃取裝置；日本島津LC-10ATVP高效液相色譜儀；TU-1810紫外可見分光光度計(jì)；大黃酚、大黃素對(duì)照品（由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，大黃酚批號(hào)：110796-200615，大黃素批號(hào)：110756-200110，供含量測(cè)定用）。所用試劑均為色譜純和分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 含量測(cè)定方法按藥典要求及相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道［1-3］，以大黃素為對(duì)照品，采用紫外-可見分光光度法，測(cè)定樣品中總蒽醌的含量；以大黃酚為對(duì)照品，采用高效液相色譜法，測(cè)定樣品中大黃酚的含量。

2.2 采用正交試驗(yàn)法，優(yōu)選最佳提取條件取決明子藥材，粉碎，過10～20目篩，稱取100 g，置于1 L萃取釜內(nèi)，按L9（34）表進(jìn)行萃取試驗(yàn)，以總蒽醌和大黃酚為檢測(cè)指標(biāo)，測(cè)量提取物中總蒽醌和大黃酚的含量，優(yōu)選最佳提取條件。因素水平見表1，試驗(yàn)結(jié)果見表2，表3，表4。

表1 決明子超臨界流體萃取因素水平表

表2 決明子正交試驗(yàn)表及結(jié)果mg／100g

方差來源離差方和自由度方差F 值顯著性A 3.093 334 2 16.044 620 9.366 622＃B 2.228 334 2 7.450 916 4.349 739 C 2.210 091 2 7.414 052 4.328 218 D 1.052 000 2 1.712 957 1.000 000

表3 總蒽醌正交試驗(yàn)方差分析

結(jié)果：以總蒽醌為指標(biāo)，A有顯著性差異，B、C無顯著性差異。而以大黃酚為指標(biāo)，A、B、C均無顯著性差異，綜合考慮總蒽醌和大黃酚的提取量，最佳萃取條件為：萃取溫度60℃，萃取壓力20 MPa，萃取時(shí)間2 h。

2.3 夾帶劑對(duì)超臨界二氧化碳萃取的影響及條件優(yōu)選。對(duì)于夾帶劑的選擇，首選乙醇，因?yàn)閷?duì)于CO2-超臨界流體萃取技術(shù)的研究結(jié)果最終將應(yīng)用到藥物的生產(chǎn)上，而其他有機(jī)試劑對(duì)人類的健康是有害的，在乙醇濃度上，選擇75%乙醇，85%乙醇，95%乙醇較為高濃度的醇為夾帶劑進(jìn)行超臨界萃取，以便比較加入夾帶劑前后提取量的變化，見表5。

表5 夾帶劑對(duì)提取量的影響

結(jié)果：以75%乙醇為夾帶劑時(shí)，總蒽醌和大黃酚的提取量都較高，所以選擇以75%乙醇為決明子超臨界流體萃取的夾帶劑。

CO2-超臨界流體萃取法提取決明子中蒽醌類成分的最佳提取工藝為：萃取溫度60℃，萃取壓力20 MPa，萃取時(shí)間2 h，加75%乙醇為夾帶劑。

3 討論

3.1 萃取條件對(duì)提取量的影響決明子中蒽醌類成分萃取壓力是影響超臨界流體萃取的主要因素，試驗(yàn)結(jié)果表明，壓力在20 MPa時(shí)提取的總蒽醌及大黃酚的量均較多，隨著萃取壓力的增加，萃取量減少；因?yàn)檩祯惓煞质軣徇^久，溫度過高時(shí)易分解，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果確定決明子的萃取溫度以60℃為宜；萃取時(shí)間對(duì)蒽醌的提取量影響較小，在1～2 h可完全提取。

3.2 夾帶劑對(duì)提取量的影響蒽醌類成分極性較大，直接采用超臨界-CO2流體萃取很難將蒽醌類成分提取出來，加入夾帶劑后，總蒽醌及大黃酚的提取量都有明顯的提高，加入夾帶劑使流體極性與蒽醌類成分極性相近，根據(jù)“相似相溶”原理，使蒽醌類成分更易被提取出來。通過乙醇濃度篩選最終確定加75%乙醇為夾帶劑。

［1］中華人民共和國(guó)藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典［S］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：98.

［2］李敏，李曉芳.干燥方法對(duì)大黃配方顆粒中蒽醌類成分的影響［J］.中成藥，2006，28（9）：1289-1292.

［3］劉臘娥，陳鋮.紫外分光光度法測(cè)定肛疾舒洗劑中大黃總蒽醌含量［J］.中國(guó)藥業(yè)，2005，14（3）：39-40.

R284.2

A

1007－4813（2010）06－0826－02

2010－07－09）

吉林省教育廳課題（吉教科合字［2006］第236號(hào)）

董金香（1963－），女，大學(xué)本科，副教授。研究方向：中藥學(xué)。