楊曉溪 趙舒 常青

(華北煤炭醫(yī)學(xué)院中醫(yī)學(xué)系 河北 唐山 063000;①貴陽中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院泌尿外科)

芍藥甘草湯出自東漢張仲景《傷寒論》,該方配伍嚴(yán)謹(jǐn),用藥精簡,為中醫(yī)臨床常用的柔肝緩急、疏攣止痛方劑[1]。后世臨床實踐中其應(yīng)用范圍日趨廣泛,常作為緩痙止痛之主方用于治療多種痛證,如筋脈、經(jīng)絡(luò)、肌肉之痛等每有效驗?，F(xiàn)代藥理研究表明,芍藥、甘草均有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗過敏等作用[2],二藥合用諸藥理作用增強(qiáng),對身體的攣急有效。而對于深在輸尿管平滑肌,如胃腸、膽囊、子宮等亦有實驗報道,證實本方具有緩解平滑肌痙攣及鎮(zhèn)痛的作用。本文繼續(xù)從解痙角度觀察芍藥甘草湯對家兔梗阻前后各期的輸尿管平滑肌電活動頻率的影響,探討其作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 動物及分組 健康成年實驗白家兔 40只,雌雄各半,兔齡6～8月,體質(zhì)量 2.0～3.0kg,由貴陽醫(yī)學(xué)院實驗動物所提供。將實驗動物在實驗室條件下飼養(yǎng) 3天后,隨機(jī)分為 A、B、C、D、E 5組:A為絞痛模型組,B為芍藥甘草湯大劑量治療組,C為芍藥甘草湯中劑量治療組,D為芍藥甘草湯小劑量治療組,E為陽性對照組,每組8只。術(shù)前 12h禁食、6h禁飲。麻醉前各組均下胃管,以備灌注藥液。所有動物均制做病理模型。

1.2 藥物

1.2.1 芍藥甘草湯(由白芍藥、炙甘草組成)。處方中藥材購自貴陽中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院門診中藥房,經(jīng)鑒定為正品。根據(jù)原著對該方組方規(guī)律研究的文獻(xiàn)及現(xiàn)代臨床用藥習(xí)慣確定本方白芍藥、炙甘草之比為 2:1,即白芍藥 55.68g、炙甘草 27.84g。按此量(83.52g)為 60kg成人每次臨床用藥量計算,家兔等效劑量為:3.3(折算系數(shù))×83.52g/60kg≈5g/kg[3]。以水煎煮,分別濃縮成含生藥量為 0.375g、0.75g、1.5g/mL3種濃度的藥液,即芍藥甘草湯小、中、大劑量組,供家兔灌胃頓服,各組灌胃體積均為 20mL/次。

1.2.2 阿托品注射液。購自貴陽中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院門診中藥房。按 60kg成人每次臨床推薦口服用量為 0.5mg/次,3kg家兔等效量為:3kg×3.3(折算系數(shù))×0.5mg/60kg≈0.08mg[3]。取 0.08mg阿托品,用無菌注射用水配制成濃度為 0.004mg/mL的液體,供家兔灌胃用,灌胃體積為 20mL/次,頓服。

1.3 儀器 MS4000U生物信號定量記錄分析系統(tǒng),廣州市龍飛達(dá)科技有限公司研制,具有強(qiáng)大的生物信號顯示與數(shù)據(jù)處理功能。Ag/Agcl電極。

1.4 實驗方法 實驗在室溫 23～25℃中進(jìn)行,25%烏拉坦(1g/kg)腹腔注射,麻醉起效后,將實驗家兔背位固定于兔臺上。頸部手術(shù):插好氣管插管。5%葡萄糖鹽水耳緣靜脈緩慢靜滴,15滴/分鐘左右。取下腹部正中切口,經(jīng)腹相當(dāng)于髂血管水平仔細(xì)分離兩側(cè)輸尿管,盡量保持血運。在該側(cè)輸尿管下段預(yù)定結(jié)扎部位之上 0.5cm處安放一對 Ag/Agcl記錄電極,兩電極相距 0.5cm,兩電極平行安放于輸尿管下面,使電極與輸尿管緊密接觸。Ag/Agcl記錄電極接相應(yīng)的MS4000U生物電信號輸入系統(tǒng),肌電信號通過電信號定量分析系統(tǒng)作實時的顯示、記錄與儲存。本實驗利用實驗室的自身屏蔽作用,通過MS4000U生物信號定量記錄分析系統(tǒng)接地及其濾波、增益等功能將噪音減小,改善波形質(zhì)量,使得電信號反應(yīng)更容易,更準(zhǔn)確,排除無關(guān)電信號的干擾。5組結(jié)扎給藥前均記錄 10min正常輸尿管平滑肌動作電位頻率。于輸尿管下段靠近膀胱部位行輸尿管結(jié)扎,造成梗阻模型。結(jié)扎后分組灌胃給藥,頓服 20mL。A組給予無菌注射用水灌胃,B組給予大劑量芍藥甘草湯灌胃,C組給予中劑量芍藥甘草湯灌胃,D組給予小劑量芍藥甘草湯灌胃,E組給予阿托品灌胃。分別記錄給藥后 1、5、30、45、60、90min的輸尿管平滑肌動作電位頻率變化。

1.5 觀察指標(biāo) 實驗家兔正常、梗阻給藥后各時期的輸尿管平滑肌動作電位頻率。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 數(shù)據(jù)采用 SPSS13.0版統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析,計量資料以均數(shù) ±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用 t檢驗、重復(fù)測量數(shù)據(jù)的方差分析進(jìn)行統(tǒng)計檢驗。

2 結(jié)果

表1 各組家兔正常、梗阻后各期的輸尿管平滑肌電活動頻率比較(, 次/min)

表1 各組家兔正常、梗阻后各期的輸尿管平滑肌電活動頻率比較(, 次/min)

注:與結(jié)扎給藥前比較,△P＜0.01;與絞痛模型組比較,●P＜0.05

組別 n 結(jié)扎給藥前 結(jié)扎給藥后不同時間(min)即刻 5 30 45 60 90絞痛模型組 8 5.4±0.2 8.4±0.6△ 9.2±4.0△ 9.5±1.1△ 9.6±4.2△ 9.7±3.4△ 9.9±2.7△芍甘湯大劑組 8 5.3±0.2 8.4±0.6△ 9.0±4.3△ 8.4±3.4△ 7.6±3.4△ 7.3±3.5△ 6.5±1.9△●芍甘湯中劑組 8 5.2±0.2 8.5±0.7△ 9.1±3.3△ 9.0±2.4△ 8.6±2.6△ 8.1±3.3△ 7.9±3.3△芍甘湯小劑組 8 5.5±0.3 8.5±0.6△ 9.3±4.2△ 9.4±2.1△ 9.2±4.0△ 9.5±3.3△ 9.5±4.0△陽性對照組 8 5.3±0.2 8.4±0.7△ 8.8±3.1△ 7.8±3.9△ 7.4±3.3△ 7.2±2.9△ 6.6±2.1△●

各組輸尿管平滑肌電頻活動頻率見表 1、圖 1。由表 1可見,結(jié)扎給藥后各時間點與結(jié)扎給藥前比較,輸尿管平滑肌電活動頻率均顯著增高(P＜0.01)。與絞痛模型組比較:芍藥甘草湯大劑量組、阿托品陽性對照組輸尿管平滑肌電活動頻率顯著降低,并且差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);結(jié)扎給藥后 90min芍藥甘草湯中、小劑量組輸尿管平滑肌電活動頻率值也較絞痛模型組低,但差別不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。芍藥甘草湯大劑量組與阿托品陽性對照組比較:大劑量組輸尿管平滑肌電活動頻率值略低于陽性對照組,但二者差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

圖1 頻率交互效應(yīng)輪廓圖

3 討論

輸尿管急性梗阻是泌尿外科常見急癥。其主要病理特點為,梗阻后尿液下行排泄受阻,尿液在集合系統(tǒng)內(nèi)積聚,輸尿管內(nèi)靜息壓力升高,輸尿管平滑肌蠕動頻率和幅度也暫時升高,引起輸尿管平滑肌痙攣,最終往往誘發(fā)腎絞痛的出現(xiàn)。臨床表現(xiàn)多有陣發(fā)性絞痛,患者往往難以忍受,治療上主要采用解痙、鎮(zhèn)痛等方法?；谝陨险J(rèn)識,本實驗主要針對各時間段輸尿管平滑肌電活動頻率的變化進(jìn)行探討,以觀察芍藥甘草湯的解痙療效。根據(jù)本病發(fā)生的病因病機(jī)并結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)研究,實驗采用周水生、朱喜山等人[4～6]結(jié)扎家兔單側(cè)輸尿管的方法復(fù)制輸尿管急性梗阻的動物模型。

研究結(jié)果顯示,各組家兔輸尿管結(jié)扎給藥后各時間點與結(jié)扎給藥前相比,輸尿管平滑肌電活動頻率均顯著升高(P＜0.01),證明模型較好地復(fù)制了本病的一些主要病理過程,具有可重復(fù)性。

與絞痛模型組比較,大劑量芍藥甘草湯輸尿管平滑肌電活動頻率升高緩慢,其值較低(P＜0.05);中劑量芍藥甘草湯輸尿管平滑肌電活動頻率也隨時間的延長而升高緩慢,但二者差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);小劑量芍藥甘草湯輸尿管平滑肌電活動頻率值亦略低于絞痛模型組(P＞0.05)。實驗結(jié)果證實大劑量芍藥甘草湯具有明顯解痙作用,而中、小劑量芍藥甘草湯解痙療效不顯著。

與陽性對照組比較,芍藥甘草湯大劑量組,其電活動頻率值略低,但二者差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。說明大劑量芍藥甘草湯可與口服阿托品解痙療效相當(dāng),甚至更好。由結(jié)果知,中、小劑量芍藥甘草湯則較口服阿托品解痙療效差。且阿托品作用還具有出現(xiàn)快,但維持時間較短的弊端。芍藥甘草湯作用盡管出現(xiàn)慢,但解痙療效鞏固持久。

結(jié)果表明,芍藥甘草湯能明顯降低輸尿管平滑肌電活動頻率,對痙攣輸尿管平滑肌具有明顯地解痙作用。而此作用與芍藥甘草湯劑量有一定依賴性。

[1]沈祥春,陶 玲,方泰惠.芍藥甘草湯臨床及藥理進(jìn)展[J].新疆中醫(yī)藥,2001,2(19):59

[2]季宇彬.中藥復(fù)方化學(xué)與藥理[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2003.150-153

[3]趙 華,楊世杰.醫(yī)用技能實驗教程[M].北京:科學(xué)技術(shù)出版社,2004.27

[4]王明江,王新均,馮桂香,等.維生素 K3對家兔輸尿管平滑肌動作電位和尿路動力學(xué)的影響[J].邵陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2005,24(2):83

[5]周水生,高建平,張 銳,等.黃體酮治療腎絞痛的實驗研究和臨床觀察[J].江蘇中醫(yī),1994,20(12):698

[6]朱喜山,員艷麗.維生素 K3治療腎絞痛的臨床觀察與實驗研究[J].中國綜合臨床,2001,11(17):876