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        大鼠胃缺血/再灌注過(guò)程中胃電活動(dòng)變化及電針的影響*

        2010-06-11 03:38:20宋曉晶李順月王淑友馬惠敏
        關(guān)鍵詞:胃電波幅電針

        張 棟,宋曉晶,李順月,王淑友,馬惠敏

        (中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院針灸研究所針灸醫(yī)學(xué)工程實(shí)驗(yàn)室,北京 100700)

        胃電(EGG)活動(dòng)是胃動(dòng)力的基礎(chǔ),作為反映胃功能的一項(xiàng)客觀電生理指標(biāo),能夠?yàn)榕R床胃動(dòng)力紊亂、功能性消化不良等研究和診斷提供檢測(cè)方法,并指導(dǎo)臨床治療[1]。胃臟的功能活動(dòng)與其血流灌注情況密切相關(guān)[2],缺血可以引起功能減弱,甚至組織損傷。研究表明,電針“足三里”可以增加胃缺血/再灌注過(guò)程中的胃臟血流量[3];并可使亢進(jìn)的胃電節(jié)律降低[4];針刺可使胃動(dòng)過(guò)緩患者胃電圖檢測(cè)主頻趨于規(guī)整[5]。然而,電針對(duì)胃缺血/再灌注過(guò)程中胃蠕動(dòng)功能的作用如何尚未有明確結(jié)論?;诹私怆娽樤谖溉毖?再灌注過(guò)程中對(duì)胃電活動(dòng)影響的目的,本文在以往工作的基礎(chǔ)上,應(yīng)用我們創(chuàng)建的胃缺血/再灌注模型,觀察了電針干預(yù)下胃電的變化趨勢(shì),現(xiàn)報(bào)道于下。

        1 材料與方法

        1.1 動(dòng)物

        健康成年 Wistar大鼠 32只,雌雄各半,體重350g±50g,由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物所提供,清潔級(jí),批號(hào)SCXK(京)2005-0013。

        1.2 環(huán)境

        實(shí)驗(yàn)在恒溫恒濕實(shí)驗(yàn)箱中進(jìn)行,溫度控制在30℃ ~32℃,濕度70% ~90%,每只動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前后溫度變化控制在1℃內(nèi)。

        1.3 大鼠胃缺血/再灌注模型的制作方法

        大鼠于造模前24h斷水?dāng)嗍?。造模時(shí),動(dòng)物腹腔注射2%戊巴比妥鈉(2.5mg/kg),麻醉后于劍突下沿腹中線切一縱行切口,長(zhǎng)度約為2.5cm~3.0cm。將所需觀察臟器游離于體外,剝離附著的脂肪組織和系膜。分離胃右動(dòng)脈,用動(dòng)脈夾結(jié)扎,形成胃單一臟器缺血模型。再灌注時(shí)于結(jié)扎30min后松解動(dòng)脈夾。

        1.4 儀器和胃電活動(dòng)檢測(cè)方法

        在模型胃體表面距賁門、幽門各5mm處的漿膜上插入銀絲電極,連接多道生理記錄儀(時(shí)間常數(shù)為5s,高頻濾波 10Hz,靈敏度 500μV,1s/div),與計(jì)算機(jī)聯(lián)機(jī),用RM6240-2.0p生物信號(hào)采集處理軟件處理胃電圖,觀察分析胃電慢波幅度和頻率。胃電記錄用RM6240-C型多道生理記錄儀,電針治療使用MBT-1型微電腦電針治療儀。

        1.5 分組和針刺方法

        1.5.1 不電針組 14例大鼠先被觀察自然狀態(tài)(25min內(nèi))胃電慢波活動(dòng),再行觀察胃缺血30min和再灌注30min的胃電慢波活動(dòng)情況,記錄慢波幅度和頻率。

        1.5.2 電針組 18例大鼠先被觀察自然狀態(tài)(25min內(nèi))胃電慢波活動(dòng)后,進(jìn)行胃右動(dòng)脈的結(jié)扎30min和松解30min的連續(xù)過(guò)程。從結(jié)扎開(kāi)始的同時(shí),使用32號(hào)針灸針對(duì)雙側(cè)“足三里”穴針刺,深度約0.5cm,行針30s后連接電針儀(強(qiáng)度:6V,頻率:1Hz,時(shí)間:60min)。觀察胃電慢波活動(dòng)情況。

        1.6 胃電波幅和頻率的分析統(tǒng)計(jì)方法

        分別對(duì)不電針組和電針組的前對(duì)照、結(jié)扎/松解各時(shí)段的胃電波幅變化進(jìn)行分析,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均值加減標(biāo)準(zhǔn)差(Means±SD)表示。使用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)2組同時(shí)段(點(diǎn))的胃電波幅(μV)、頻率(CPM/min)均值進(jìn)行t檢驗(yàn),比較2組間的差異。

        2 結(jié)果

        2.1 胃缺血過(guò)程中胃電波幅的變化

        表1顯示,與前對(duì)照比較,不電針組結(jié)扎胃右動(dòng)脈后胃電波幅減低。隨缺血時(shí)間的延長(zhǎng),減幅增大,至結(jié)扎25min時(shí)達(dá)到最大值。而電針組胃電波幅在結(jié)扎并施予電針即時(shí)有所增高,隨后波幅下降并低于前對(duì)照,至電針15min時(shí)波幅又升高。缺血各時(shí)點(diǎn)胃電波幅與前對(duì)照比較,電針組內(nèi)無(wú)顯著性差異;不電針組在結(jié)扎25min、30min時(shí)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;而2組間比較,在結(jié)扎25min和30min時(shí)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

        2.2 再灌注過(guò)程中胃電波幅的變化

        表2顯示,不電針組胃電波幅在松解時(shí)對(duì)胃右動(dòng)脈的結(jié)扎即刻迅速回升,松解5min、10min時(shí)胃電波幅的回升幅度又稍有降低,此后隨松解時(shí)間延長(zhǎng),胃電波幅持續(xù)增加。整個(gè)再灌注過(guò)程中不電針組的胃電幅度除在松解15min與前對(duì)照持平外,均低于前對(duì)照,組內(nèi)統(tǒng)計(jì)均無(wú)顯著性差異。而電針組胃電波幅在此過(guò)程中也呈回升狀態(tài),胃電幅度均超過(guò)前對(duì)照,并在松解5min時(shí)增加最大。再灌注各時(shí)點(diǎn)胃電波幅與前對(duì)照的比較,2組內(nèi)均無(wú)顯著性差異。

        松解過(guò)程中,不電針組和電針組胃電波幅的變化有隨胃血流灌注的恢復(fù)而增高的趨勢(shì)。

        表1 胃缺血過(guò)程中胃電波幅均值的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(Means±SD,μV)

        表2 胃再灌注過(guò)程中胃電波幅均值的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(Means±SD,μV)

        2.3 缺血過(guò)程中胃電頻率的變化

        表3顯示,與前對(duì)照比較,缺血過(guò)程中電針組和不電針對(duì)照組的胃電頻率均值都有小幅降低,各觀察時(shí)點(diǎn)變化不大,整個(gè)結(jié)扎過(guò)程中組內(nèi)、組間均無(wú)顯著性差異。

        2.4 灌注過(guò)程中胃電頻率的變化

        表4顯示,再灌注過(guò)程中,不電針組胃電頻率與前對(duì)照比較,沒(méi)有明顯變化,只有小幅波動(dòng),組內(nèi)統(tǒng)計(jì)無(wú)顯著性差異。與前對(duì)照比較,電針組在再灌注過(guò)程中胃電頻率始終增加,并于松解15min時(shí)增至最大;且在松解 5、10、15、20、25、30min 時(shí)均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2組組間各時(shí)段胃電頻率變化比較,在松解10min和20min時(shí)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。

        表3 胃缺血過(guò)程中胃電頻率均值的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(Means±SD,CPM/min)

        表4 胃再灌注過(guò)程中胃電頻率均值的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(Means±SD,CPM/min)

        3 討論

        研究表明,缺血/再灌注過(guò)程會(huì)造成機(jī)體組織器官功能改變或器質(zhì)性損傷[6、7]。胃黏膜是人和動(dòng)物體內(nèi)最易受到損傷的組織。研究普遍認(rèn)為,胃臟在缺血-再灌注情況下,由于胃黏膜內(nèi)氧自由基的過(guò)量生成、細(xì)胞內(nèi)鈣超載、前列腺素合成減少等多種因素造成胃黏膜組織損傷[8],直接影響胃功能。為觀察胃臟的缺血/再灌注過(guò)程,人們建立和使用了一些模型,但多在結(jié)扎后涉及其他臟器的損傷,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果[9、10]。針對(duì)上述不足,本實(shí)驗(yàn)室用胃右動(dòng)脈結(jié)扎的方法成功建立了在體胃臟缺血/再灌注模型,并首次運(yùn)用激光多普勒血流灌注成像方法評(píng)價(jià)了該模型效果,以圖像的形式顯示了結(jié)扎和松解過(guò)程中血流的增減規(guī)律[11、12],觀察到電針具有明顯增加胃臟血流的功效[3]。在以往研究基礎(chǔ)上,本文采用相同的動(dòng)物模型,研究了此過(guò)程中胃電活動(dòng)以及電針的調(diào)節(jié)作用。

        3.1 胃電活動(dòng)與胃血流的關(guān)系

        正常狀態(tài)下,胃平滑肌的電活動(dòng)包括靜息電位、慢波以及疊加在慢波上的快波。胃慢波是肌源性的活動(dòng),神經(jīng)、激素都不參與慢波電活動(dòng)的產(chǎn)生,但它們可以影響和改變胃電活動(dòng)[13]。胃電圖能準(zhǔn)確反映胃肌電慢波的節(jié)律、波幅的相對(duì)變化,在臨床和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常將胃電慢波作為胃電節(jié)律紊亂的診斷依據(jù)并評(píng)價(jià)胃功能。本實(shí)驗(yàn)觀察到從結(jié)扎即刻、胃臟缺血開(kāi)始,胃電波幅出現(xiàn)顯著降低,持續(xù)到結(jié)扎結(jié)束;而結(jié)扎對(duì)胃電頻率影響較小,也表現(xiàn)為小幅減少并出現(xiàn)波動(dòng)。松解的即刻,胃臟血流灌注量驟增(該過(guò)程以往工作中曾以直觀圖像給予了明確顯示[12]),胃電波幅和頻率也對(duì)應(yīng)升高。隨胃臟血供不斷增多,胃電波幅和頻率持續(xù)在一個(gè)較高的水平上。通常血流供應(yīng)為組織細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),維持細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)和正常功能。而在缺血狀態(tài)下,代謝降低,病理產(chǎn)物堆積,組織的生理功能減弱,導(dǎo)致功能異常。結(jié)扎時(shí)胃臟血流灌注量減少,胃蠕動(dòng)減弱;再灌注時(shí)胃臟血流量恢復(fù),胃組織功能隨之恢復(fù),胃蠕動(dòng)增強(qiáng),胃電波幅和頻率逐漸升高。上述結(jié)果說(shuō)明,胃臟血液灌注量的增減能對(duì)胃電活動(dòng)的強(qiáng)弱變化造成明顯影響。

        3.2 電針對(duì)缺血/再灌注過(guò)程胃電活動(dòng)的調(diào)節(jié)

        針刺可以促進(jìn)全身和多數(shù)臟器血液循環(huán),這是針刺作用中比較公認(rèn)的結(jié)論之一。本文在觀察單純?nèi)毖俟嘧⑦^(guò)程胃電活動(dòng)的同時(shí),設(shè)置了電針對(duì)該過(guò)程胃電活動(dòng)影響的觀察,目的也是了解電針改善胃臟因缺血所引起的電活動(dòng)減弱的作用。實(shí)驗(yàn)中見(jiàn)到,電針組在整個(gè)結(jié)扎過(guò)程中,胃電波幅除個(gè)別時(shí)段稍有降低外,均明顯高于結(jié)扎前,而胃電頻率維持在相對(duì)穩(wěn)定的水平。結(jié)合我們以往觀察到電針能使結(jié)扎狀態(tài)下血流灌注量增加的結(jié)果[3],可以認(rèn)為這是電針促進(jìn)了缺血狀態(tài)的改善,從而改善并維持胃電活動(dòng)。再灌注實(shí)驗(yàn)的結(jié)果可見(jiàn)到,松解即時(shí)血流灌注量恢復(fù),胃臟功能活躍,胃電波幅和頻率均增高。結(jié)果表明,電針作用促進(jìn)血流量恢復(fù),同時(shí)促使胃電活動(dòng)增強(qiáng)。此外,無(wú)論結(jié)扎還是松解過(guò)程,電針組胃電波幅的增加始終大于不電針組,更能說(shuō)明電針具有產(chǎn)生興奮胃電節(jié)律的效應(yīng)。

        許多研究表明,針灸對(duì)胃腸電活動(dòng)有明顯的調(diào)整作用,這種作用在機(jī)體器官功能偏離其穩(wěn)定狀態(tài)的情況下尤為明顯。本實(shí)驗(yàn)觀察到,整個(gè)缺血/再灌注過(guò)程中的胃電活動(dòng)及電針良性的調(diào)節(jié)作用,為探討針刺效應(yīng)與胃臟功能的關(guān)系提供了一些胃腸電生理的實(shí)驗(yàn)資料。作為了解電針刺激加強(qiáng)胃臟蠕動(dòng)作用的本實(shí)驗(yàn)研究,只設(shè)置了針與不針的比較,而對(duì)穴位特異性作用的觀察將在下一步工作中予以深入探討。

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