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        生津利咽含片對小鼠抗炎鎮(zhèn)痛作用影響的研究

        2010-06-11 03:41:40劉瑞敏朱立鳴梁玉杰段永強虎俊瑞
        關(guān)鍵詞:小鼠劑量

        劉瑞敏,朱立鳴,梁玉杰,段永強,虎俊瑞

        (1.甘肅省人民醫(yī)院,甘肅蘭州 730000;2.甘肅中醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)部,甘肅蘭州 730000)

        生津利咽含片中藥復(fù)方是在中醫(yī)理論的指導(dǎo)下,根據(jù)陰虛津虧、生熱生燥的理論,結(jié)合臨床經(jīng)驗,以中醫(yī)古方與導(dǎo)師經(jīng)驗方相結(jié)合,采用滋陰生津、潤燥利咽的治法研制出的治療慢性咽炎的中藥制劑。根據(jù)以往的研究,臨床運用養(yǎng)陰利咽治療慢性咽炎有著明顯確切的療效。本課題著重從生津利咽含片的抗炎、鎮(zhèn)痛角度,為中醫(yī)藥防治慢性咽炎的新藥開發(fā)提供一些實驗依據(jù),以促進(jìn)提高中醫(yī)藥對慢性咽炎的理論認(rèn)識和防治水平。

        1 材料

        1.1 動物

        SPF級昆明種小鼠(合格證號SCXK甘2004-0006-0000197),雌雄各半,體重20g±2g,由甘肅中醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)實驗中心提供。

        1.2 儀器

        電子天平,規(guī)格型號:Sartorius BL150,北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司。

        1.3 藥物

        生津利咽含片(粉末)組方:生甘草、烏梅、玄參、桔梗、青果、制大黃由威海迪沙藥業(yè)集團公司提供制劑。金果飲咽喉片(市售),山東綠因藥業(yè)有限公司生產(chǎn),批號070213,臨用前蒸餾水配成所需濃度;冰醋酸(乙酸)(分析純),廣東汕頭市西隴化工廠,批號 0502161;甲醛,成都化學(xué)試劑廠,批號830920-2;瓊脂,上海中秦化學(xué)試劑有限公司,批號20070921;二甲苯,北京五二九五二化工廠,批號870317。

        2 方法

        下列各項實驗將小鼠隨機分為5組,即計量高、中、低組和陽性藥物(金果飲咽喉片)及蒸餾水對照組。等效劑量以60 kg成人常規(guī)劑量按人與動物體型系數(shù)折算。

        2.1 瓊脂所致小鼠肉芽腫反應(yīng)

        給藥前1 h在小鼠背中線同一部位將毛剪盡,行淺麻(腹腔注射10%烏拉坦0.15ml·20g-1),背部皮下無菌快速注射2%瓊脂0.2ml,各組動物每天分別給藥1次,連續(xù)14d。第14天將小鼠斷頭處死,仔細(xì)剝離并取出各組動物的瓊脂肉芽組織,剔除結(jié)締組織,電子天平稱重,并換算每100g體質(zhì)重肉芽腫重量。

        2.2 二甲苯所致小鼠耳腫脹

        連續(xù)給藥7d,末次給藥后30min后,以二甲苯棉球接觸小鼠左耳5s,15min后將動物拉頸處死,用直徑7mm打孔器將小鼠雙耳相同部位等面積切下稱重,以左右兩耳耳片重量差作為腫脹厚度。

        2.3 甲醛所致小鼠足腫脹的影響

        連續(xù)7d,末次給藥1h后,小鼠右足注射0.05ml 2.5%甲醛致炎,致炎后分別于 0.5h、1h、2h、4h、6h用數(shù)顯千分卡尺測定小鼠右足腫脹厚度。

        2.4 鎮(zhèn)痛實驗(醋酸致小鼠扭體法)

        每天灌胃給藥1次,連續(xù)給藥7d,末次給藥后1h,小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.20ml/只,觀察記錄各組小鼠15min內(nèi)的扭體次數(shù)并計算出每分鐘扭體次數(shù)。

        2.5 統(tǒng)計學(xué)方法

        數(shù)據(jù)輸入計算機,采用SPSS13.0軟件統(tǒng)計,實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(s)表示,根據(jù)方差齊性采用單因素方差分析(One-Way-ANOVN)。

        3 結(jié)果

        3.1 生津利咽含片對瓊脂所致小鼠肉芽腫的影響

        表1 生津利咽含片對瓊脂所致小鼠肉芽腫的影響(s)

        表1 生津利咽含片對瓊脂所致小鼠肉芽腫的影響(s)

        注:與蒸餾水對照組比較:*P<0.05,**P<0.01;與金果飲組比較:△P<0.05,△△P<0.01

        組別 動物數(shù)(n)劑量(g/kg)肉芽腫(g/100g體重)蒸餾水對照組 10 —0.43±0.21生津利咽大劑量組 10 0.88 0.11±0.04**生津利咽中劑量組 10 0.44 0.17±0.06**生津利咽小劑量組 10 0.22 0.25 ±0.07**△金 果 飲 組 10 0.50 0.14±0.05**

        3.2 生津利咽含片對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響

        表2 生津利咽含片對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(s)

        表2 生津利咽含片對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(s)

        注:與蒸餾水對照組比較:*P<0.05,**P<0.01;與金果飲組比較:△P<0.05,△△P<0.01

        組別 動物數(shù)(n)劑量(g/kg)腫脹度(g)蒸餾水對照組 10 —0.0060±0.0020生津利咽大劑量組 10 0.88 0.0018±0.0006**生津利咽中劑量組 10 0.44 0.0018±0.0005**生津利咽小劑量組 10 0.22 0.0029±0.0011*△金 果 飲 組 10 0.50 0.0022±0.0007**

        3.3 生津利咽含片對甲醛所致小鼠足腫脹的影響

        表3 生津利咽含片對甲醛所致小鼠足腫脹的影響(s)

        表3 生津利咽含片對甲醛所致小鼠足腫脹的影響(s)

        注:與蒸餾水對照組比較:*P<0.05,**P<0.01;與金果飲組比較:△P<0.05,△△P<0.01

        組別 動物數(shù)(只)劑量(g/kg)0.5h 1h 2h 4h 6h蒸 餾 水 對 照 組 10 — 0.75±0.29 0.63±0.22 0.72±0.25 0.79±0.26 0.75±0.20生津利咽大劑量組 10 0.880.10±0.03** 0.09±0.03** 0.16±0.07** 0.18±0.08** 0.17±0.08**△生津利咽中劑量組 10 0.440.10±0.05** 0.08±0.02** 0.08±0.01**△△ 0.15±0.02**△ 0.13±0.02**△生津利咽小量組 10 0.220.09±0.03** 0.11±0.04** 0.15±0.06** 0.21±0.07** 0.26±0.07**金 果 飲 組 10 0.500.08±0.03** 0.10±0.05** 0.16±0.07** 0.20±0.08** 0.24±0.09**

        3.4 生津利咽含片對醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響

        表4 生津利咽含片對醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響(s)

        表4 生津利咽含片對醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響(s)

        注:與蒸餾水對照組相比:*P<0.05,**P<0.01;與金果飲組比較:△P<0.05,△△P<0.01

        組每分鐘扭體次數(shù)蒸餾水對照組 10 —別 動物數(shù)(n)劑量(g/kg)1.95±0.35生津利咽大劑量組 10 0.88 0.92±0.23**生津利咽中劑量組 10 0.44 1.07±0.22**生津利咽小劑量組 10 0.22 1.28 ±0.26**△金 果 飲 組 10 0.50 0.96±0.31**

        4 討論

        結(jié)果表明,生津利咽含片對二甲苯致小鼠耳腫脹具有良好的抑制作用,并且對甲醛致小鼠足腫脹具有良好的抑制作用,表明生津利咽含片對炎癥早期的滲出有抑制作用,從而減輕或消除咽部黏膜彌漫性充血及組織內(nèi)滲出液積聚而引起的黏膜腫脹。生津利咽含片能顯著抑制瓊脂致小鼠肉芽腫炎性反應(yīng)增生,說明其對炎癥后期的結(jié)締組織增生有抑制作用。以上作用提示,生津利咽含片可能對急慢性咽炎均有一定的治療作用。

        慢性咽炎患者咽部常伴有微痛感。痛覺是一種復(fù)雜的感覺,常伴有不愉快的情緒反應(yīng)。疼痛與炎癥的關(guān)系是密不可分的,炎癥介質(zhì)如組胺、5-羥色胺、緩激肽、白三烯等均可激活傷害性感受器而產(chǎn)生疼痛作用。前列腺素雖不能引起明顯的疼痛,但可降低痛覺感受器靶細(xì)胞的痛閾而對其他致痛因子有增敏作用。在本論文所采用的鎮(zhèn)痛實驗?zāi)P椭?,醋酸致小鼠扭體主要是間接通過腹腔產(chǎn)生急性炎癥反應(yīng)所致。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),生津利咽含片能顯著降低醋酸引起的小鼠扭體次數(shù),提示其具有良好的鎮(zhèn)痛作用。該作用有利于緩解慢性咽炎伴隨的疼痛感覺。

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