吳金花，丁 琦

（江西省藥物研究所，江西南昌 330029）

隨著生命科學(xué)的不斷發(fā)展，人們對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量要求也越來越高，清潔級(jí)以上的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用量也隨之增大，清潔級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水和屏障系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境衛(wèi)生使用水用量越來越大，并要求達(dá)到無菌，應(yīng)用純水機(jī)制無菌水是一個(gè)很好的思路。目前實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水一般采用高壓滅菌（121℃，30min），有的也應(yīng)用純水機(jī)制水。高壓消毒滅菌效果好，但耗水、耗時(shí)、耗電，用水有限；制水機(jī)制無菌水取水方便，又省電，效果如何值得注意。為了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲水安全，筆者對(duì)MN-LM-50J實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水機(jī)所制無菌水與高壓滅菌水進(jìn)行了對(duì)比實(shí)驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水機(jī)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水機(jī)型號(hào)MN-LM-50J，生產(chǎn)單位：北京木牛流馬有限公司。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水機(jī)放置在屏障系統(tǒng)外，與屏障系統(tǒng)內(nèi)以水管連接，屏障系統(tǒng)內(nèi)有一出水龍頭，供屏障內(nèi)使用。

1.2 高壓滅菌水

高壓滅菌水經(jīng)121℃、30 min高壓滅菌進(jìn)入屏障環(huán)境內(nèi)，供屏障環(huán)境內(nèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用或使用。

1.3 培養(yǎng)基

營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，北京雙旋微生物培養(yǎng)基制品廠，批號(hào)20080302；硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基，北京雙旋微生物培養(yǎng)基制品廠，批號(hào)20080516；營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，杭州天和微生物試劑有限公司，批號(hào)20080105。

1.4 水樣的采集[1]

1.4.1 飲用水機(jī)水樣的采集 無菌操作，在屏障內(nèi)用酒精擦拭消毒實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水機(jī)龍頭，再將水龍頭打開，放水5 min后，用滅菌的三角燒瓶采集水樣，密封備用。

1.4.2 高壓滅菌水樣的采集 無菌操作，將屏障內(nèi)高壓滅菌水用酒精擦拭瓶口消毒，倒入已滅菌的三角燒瓶內(nèi)，密封備用。

1.5 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水機(jī)水和高壓滅菌水檢驗(yàn)[2]

在超凈臺(tái)內(nèi)用滅菌吸管分別吸取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水機(jī)水和高壓滅菌水各1 ml檢樣，分別接種于肉湯培養(yǎng)基和硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基上。37℃培養(yǎng)48 h，進(jìn)行需氧菌和厭氧菌的檢驗(yàn)。

1.6 細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定

在超凈臺(tái)內(nèi)無菌操作用，將滅菌吸管分別吸取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水機(jī)水及高壓滅菌水各1 ml，注入無菌平皿中，再傾注約15 ml置45℃左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，立即旋搖平皿使檢樣與培養(yǎng)基充分混勻。每個(gè)檢樣2個(gè)平皿。于37℃培養(yǎng)24 h后計(jì)數(shù)。

2 結(jié)果

無菌檢驗(yàn)及細(xì)菌總數(shù)檢驗(yàn)結(jié)果：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水機(jī)制水在營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基經(jīng)過48 h培養(yǎng)，結(jié)果均呈陽性；高壓滅菌水均呈陰性，見表1。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水機(jī)制水在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h菌落數(shù)和高壓滅菌水菌落數(shù)見表2。

表1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水機(jī)水與高壓滅菌水無菌檢查對(duì)比觀察Tab.1 Observation of experimentals animals drinking water machine water and autoclave sterility test

3 討論

雷培琪等[3]報(bào)道機(jī)制純水效果好，能達(dá)到屏障系統(tǒng)動(dòng)物飲用的無菌水的要求，但通過本對(duì)比實(shí)驗(yàn)，MN-LM-50J實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水機(jī)所制飲用水并不能達(dá)到無菌效果；而高壓滅菌水能達(dá)到無菌要求，即使存放在儲(chǔ)水桶內(nèi)7 d仍未檢出菌落。通過對(duì)比實(shí)驗(yàn)，筆者認(rèn)為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水采用高壓滅菌水更為安全，建議不能盲目使用機(jī)制飲用水，要注意機(jī)制飲用水機(jī)型及制水質(zhì)量[4]，做好對(duì)比實(shí)驗(yàn)后再使用。

表2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水機(jī)水與高壓滅菌水細(xì)菌總數(shù)對(duì)比觀察Tab.2 Observation of the experimental animals drinking water and autoclave machine water of total bacteria ratio

[1]楊履渭.微生物學(xué)及檢驗(yàn)技術(shù)——水的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)[M].廣州:廣東人民出版社,1985:477-480.

[2]國標(biāo)GB/T5750-5750.13-2006生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2006.

[3]雷培琪,曾曉蘭,夏介英.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用純水機(jī)制無菌水的效果觀察[J].實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué),2009,26(1):63-64.

[4]趙明海,張瀟,譚德講,等.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水質(zhì)量控制及處理方式的一些探討[J].實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué),2008,25(1):58-63.