賀才標(biāo) 曾月安 田傳林 徐義成 譚云昌 吳窮

血液標(biāo)本運輸是檢驗前質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)之一,近些年來越來越受到檢驗界學(xué)者的關(guān)注。為了解血液標(biāo)本運輸對丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和血漿游離血紅蛋白(Hb)檢測結(jié)果的影響,本文采用模擬運輸?shù)姆绞?檢測標(biāo)本運輸前后ALT活性和 Hb的含量變化,現(xiàn)將研究結(jié)果分析如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 所有血液標(biāo)本均來自本市2010年6月1日至 2010年6月30日自愿無償獻血者。

1.2 標(biāo)本處理 試驗分為兩組,第一組 32人,作為模擬運輸150公里,采集血液時,分別留取血液 3m l放入 2支含有枸椽酸鈉抗凝劑真空試管中,其中第 1管為 A管,第 2管為 B管,對 B管立即離心分離血漿,分別取 0.5m l血漿置于 2支帶蓋離心塑料試管中,其中第 1管為C管,第 2管為D管(一組對照)。第二組 24人,作為模擬運輸 100公里和 80公里,采集血液時,分別留取血液 3m l放入 3支含有枸椽酸鈉抗凝劑真空試管中,其中第 1管為 E管,第 2管為 F管,第 3管為 G管,從第 G管中立即離心分離血漿,取0.5ml血漿置于帶蓋離心塑料試管(管)(二組對照)中。所有標(biāo)本置于 4℃專用冰箱保存。

1.3 標(biāo)本運輸 次日上午 8點,開始模擬運輸。第一組:將A管、C管運輸 150公里(即運輸 75公里返回送實驗室檢測,以下模擬運輸 100公里、80公里與 150公里方式相同),A管作離心分離血漿,與 C管、D管同時作 ALT和Hb測定。第二組:將E管運輸 100公里、F管運輸 80公里,將 E管、F管離心分離血漿,與H管同時作ALT和 Hb測定。標(biāo)本運輸按冷鏈要求,溫度控制在 4～8℃。

1.4 檢測方法 所有標(biāo)本檢測前觀察有無溶血現(xiàn)象。ALT采用速率法。使用儀器OLympus生產(chǎn),AU 2700全自動生化分析儀。Hb采用鄰甲苯胺法,詳見全國臨床檢驗操作規(guī)程(第 3版)[1]。使用儀器上海迅達生產(chǎn),XD 811F生化分析儀。

2 結(jié)果

不同運輸條件下 ALT和 Hb檢測結(jié)果(見表 1)。由表 1可見,運輸 150公里、100公里全血標(biāo)本分離血漿測定 ALT與對照組比較,ALT均明顯增高(P＜0.01),運輸 80公里全血標(biāo)本分離血漿測定 ALT與對照組比較,ALT相應(yīng)增高(P＜0.05)。及時分離血漿運輸 150公里與對照組無顯著差異,說明運輸對及時分離血漿檢測 ALT活性沒有影響。運輸 150公里、100公里、80公里全血標(biāo)本分離血漿測定 Hb,與對照組比較均有非常顯著性差異(P＜0.001),隨路程的增長,Hb逐漸增高,而對及時分離血漿運輸 150公里檢測 Hb濃度沒有影響。

表1 不同運輸條件下 ALT、Hb檢測結(jié)果

3 討論

本組資料顯示,運輸對全血標(biāo)本測定ALT活性有較大的影響,并隨路程的增加而影響增大,而對及時分離血漿標(biāo)本檢測無明顯影響。據(jù)報道,在檢測過程中,血樣的運輸、保存、溫度等多種條件可以引起 ALT的升高[2]。全血標(biāo)本應(yīng)盡快從采集現(xiàn)場運送至實驗室。時間耽擱得越少,檢驗結(jié)果的可靠性越好。如果運送距離較遠(＞80 km),可在采血現(xiàn)場分離出血清或血漿后再送實驗室或貯存 4℃冷藏箱中批量送檢[3,4]。本組資料與文獻報道觀點基本一致。孫氏報道,開展血液集中化檢測將全血標(biāo)本送到較遠的實驗室檢測對ALT結(jié)果影響較大,血液報廢率較高,而采取及時分離血漿的方法大大克服了運輸對 ALT檢測結(jié)果的影響[5]。究其原因主要是全血標(biāo)本中紅細胞內(nèi) ALT活性是血清的 7倍,經(jīng)長途運輸,即使標(biāo)本肉眼觀察不到溶血現(xiàn)象,ALT也會增高。本組模擬試驗,標(biāo)本運輸后均無溶血現(xiàn)象,而 ALT活性有不同程度的增高。這一現(xiàn)象,可由血漿 Hb濃度的改變得到佐證。本組資料測定了 150公里、100公里、80公里運輸條件下,血漿Hb濃度的變化,隨路程的增加,而濃度明顯增加,并與 ALT的增加呈正相關(guān)性。

是否及時分離血液標(biāo)本送檢,對于ALT真實值在 30～40 U/L之間的血液標(biāo)本,意義非常重大。本組模擬運輸試驗全血標(biāo)本 ALT增高的絕對值區(qū)間在 0～15 U/L之間,運輸 150公里、100公里、80公里 ALT平均增高分別是 4.38 U/L、2.75 U/L和 2.30 U/L,但個體之間存在著一定的差異性。這主要是不同的血液標(biāo)本紅細胞的脆性不同,細胞的代謝、運輸?shù)穆烦涕L短以及路況的好壞等因素的影響而決定的。如不及時分離血液標(biāo)本,ALT的活性增高并超過正常值,將會導(dǎo)致血液無辜報廢,浪費寶貴的血液資源以及對獻血者招募、保留產(chǎn)生較大的負面影響。因此,開展血液集中化檢測或異地檢測 ALT的單位,必須及時分離標(biāo)本,加強血液標(biāo)本的分離、儲存、運輸?shù)葯z驗前質(zhì)量控制管理十分必要。

[1]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程.東南大學(xué)出版社,2006:164.

[2]楊振華.影響酶活性測定方法的各種因素(續(xù)).長征通迅,1997,6(3):2.

[3]趙金光,王珍生.血液標(biāo)本采集與處理是血站實驗室質(zhì)控的重要環(huán)節(jié).中國輸血雜志,2003,16(4):295-296.

[4]叢玉隆,張海鵬,任珍群.血液學(xué)檢驗分析前質(zhì)量控制的重要因素-標(biāo)本的采取及其控制.中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,1998,21(1):121-122.

[5]孫業(yè)富,夏愛萍.血站行政機構(gòu)調(diào)整后降低 ALT初篩血液報廢率的探討.臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志,2007,6(3):72-73.