張志美,沈志強(qiáng),郭時(shí)金,張 穎,王艷萍,周春鳳

(1.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院,山東濱州256600;2.山東綠都安特動(dòng)物藥業(yè)有限公司,山東濱州256600)

復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉蜂膠溶液系在復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉溶液的基礎(chǔ)上添加天然藥物蜂膠,采用中西醫(yī)理論精制而成的獸藥新制劑。由于蜂膠具有優(yōu)良的抑菌、殺菌及免疫促進(jìn)作用,與原有藥物相比,新制劑增強(qiáng)了抗菌效果,同時(shí)提高了動(dòng)物體的免疫能力。本試驗(yàn)采用高效液相色譜法測定雞體內(nèi)磺胺間甲氧嘧啶鈉和甲氧芐啶濃度,研究復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉蜂膠溶液在雞體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征,同時(shí)選用獸藥典現(xiàn)有藥物復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉溶液做參比進(jìn)行評(píng)價(jià),為復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉蜂膠溶液的臨床應(yīng)用提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥品和試劑 受試制劑:復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉蜂膠溶液(批號(hào)20080325,含量:100 mL含磺胺間甲氧嘧啶鈉(SMM-Na)10 g+甲氧芐啶(TMP)2 g+蜂膠0.04 g(以白楊素計(jì)));參比制劑:復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉溶液(批號(hào)20080511,含量:100 mL含SMM-Na 10 g+TMP2 g),上述藥物均由山東綠都安特動(dòng)物藥業(yè)有限公司提供;磺胺間甲氧嘧啶鈉對(duì)照品(含量99.9%,德國DR公司);甲氧芐啶對(duì)照品(含量99.9%,中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所);肝素、甲醇、二甲基甲酰胺、磷酸等試劑均為分析純;流動(dòng)相用甲醇為色譜純;試驗(yàn)用水為超純水。

1.2 主要儀器 Agilent 1100型高效液相色譜儀配紫外檢測器,Sartorius型電子天平,Sigma高速離心機(jī),漩渦混合儀。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物 健康成年商品肉雞20只,體重1.5 kg±0.2 kg,雌雄各半,試驗(yàn)前飼喂全價(jià)不含藥物添加劑的基礎(chǔ)日糧,預(yù)飼1周。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 色譜條件Hypersil ODS C18色譜柱(4.6×150 mm,5 μ m);流動(dòng)相 0.02 mol/L 磷酸溶液-甲醇(80∶20,V/V),檢測波長270 nm,流速1 mL/min,柱溫30℃,進(jìn)樣量20 μ L。

1.4.2 給藥及采血 采用雙周期自身隨機(jī)交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)。20只雞隨機(jī)分為2組,按照SMM-Na 100 mg/kg體重、TMP 20 mg/kg體重分別給每只雞灌服兩種藥物。兩次用藥間清除期為1周。每只雞分別于給藥前和給藥后 0.083、0.25、0.5、1、2 、4、6、8、12、24、36 h和48 h自翼靜脈采血,每次大約1 mL,置5 mL含肝素的離心管中,3 000 r/min離心10 min,分離的血漿置于-20℃冰箱保存。

1.4.3 樣品處理 將冷凍保存的血漿樣品室溫條件下解凍,搖勻后吸取0.3 mL于1.5 mL微量離心管中,加入0.5 mL甲醇,漩渦混合2 min后12 000 r/min離心10 min,吸取有機(jī)相過0.45 μ m有機(jī)濾膜后HPLC檢測。

1.4.4 數(shù)據(jù)分析處理 藥-時(shí)曲線圖采用Excel軟件繪制;藥物動(dòng)力學(xué)模型擬合、參數(shù)計(jì)算采用3P97藥動(dòng)學(xué)軟件分析。

2 結(jié)果與分析

口服給藥后,不同時(shí)間點(diǎn)采血,血漿藥物濃度平均值見表1,主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)見表2。對(duì)受試制劑與參比制劑藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)AUC(0～t)和AUC(0～∞)經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)化后進(jìn)行單因素方差分析及雙向單側(cè)t檢驗(yàn),結(jié)果表明,兩制劑在周期間無顯著性差異(P＞0.05);其他藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)比較,受試制劑Cmax較低,Tmax相應(yīng)延長,T1/2ke變大,說明受試制劑具有一定的緩釋動(dòng)力學(xué)特征。

3 討論與小結(jié)

經(jīng)房室模型分析,復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉蜂膠溶液中SMM-Na和TMP在雞體內(nèi)均為有吸收一室開放模型,給藥后5 min,血漿中即可檢測到SMMNa,給藥后4.26 h血藥濃度達(dá)到最大,為8.36 mg/L,TMP在給藥后2.15 h達(dá)到峰濃度1.16 mg/L,消除半衰期分別為13.42 h和4.27 h,文獻(xiàn)報(bào)道分別為9.05 h和2 h[1],分析原因可能為蜂膠中的部分藥物吸附作用,從而導(dǎo)致藥物消除速度降低。

本試驗(yàn)用兩制劑、兩周期交叉設(shè)計(jì)方法對(duì)復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉蜂膠溶液與現(xiàn)有產(chǎn)品復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉溶液進(jìn)行了生物能評(píng)價(jià),藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)AUC對(duì)比,生物利用度F值性能良好,經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)化后進(jìn)行單因素方差分析及雙向單側(cè)t檢驗(yàn),受試制劑AUC90%置信區(qū)間為86.2%～93.7%,在參比制劑80%～125%范圍內(nèi),另外,受試制劑Cmax較低,Tmax延長,T1/2ke變大,表現(xiàn)出一定的緩釋性能與持效的特征。

表1 灌服不同制劑后雞血漿中各藥物平均測定值

表2 受試制劑和參比制劑中兩種藥物的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

[1]馮淇輝.獸用抗菌藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究[M].北京:科學(xué)出版社,1989:195-200.