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        Bax和E2F-1在子宮腺肌病中的表達(dá)及意義

        2010-05-29 06:02:44艾中偉鄭立紅
        中國醫(yī)藥導(dǎo)報 2010年10期
        關(guān)鍵詞:腺肌病異位免疫組化

        張 巍,艾中偉,鄭立紅,陳 萍,王 玉

        (齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院病理中心,黑龍江齊齊哈爾 161006)

        子宮腺肌病(adenomyosis,AM)嚴(yán)重影響婦女的身心健康,發(fā)病率逐年上升而發(fā)病機制尚不清楚,因而備受關(guān)注。近年來,關(guān)于子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis,EM)的研究取得很大進(jìn)展,但對子宮腺肌病的深入研究卻較少。本研究應(yīng)用免疫組化SP法檢測子宮腺肌病中凋亡調(diào)節(jié)蛋白Bax及轉(zhuǎn)錄因子E2F-1的表達(dá)情況,以探討其與子宮腺肌病發(fā)生及發(fā)展的相關(guān)性,為尋找該病的病因及臨床防治提供依據(jù)。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        收集齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院各附屬醫(yī)院2006~2008年因患子宮腺肌病而行手術(shù)治療的術(shù)后切除標(biāo)本72例為研究組,取其異位子宮內(nèi)膜及原位內(nèi)膜,其中,增生期39例,分泌期33例;對照組正常子宮內(nèi)膜取自因非子宮內(nèi)膜疾?。ㄗ訉m肌瘤等良性病變)而切除子宮的內(nèi)膜標(biāo)本55例,其中,增生期31例,分泌期24例。所有患者平均年齡(43.5±4.7)歲,月經(jīng)周期25~41 d。兩組患者術(shù)前均無性激素治療等特殊病史,孕產(chǎn)次、月經(jīng)周期等差異均無統(tǒng)計學(xué)意義,標(biāo)本內(nèi)膜分期及診斷依據(jù)月經(jīng)周期時間結(jié)合HE染色組織切片后的病理診斷為準(zhǔn)。

        1.2 試劑與方法

        所有標(biāo)本行常規(guī)石蠟包埋后4 μm厚連續(xù)切片4張,1張行HE染色,其他做免疫組化染色(SP法)。E2F-1鼠抗人單克隆抗體購自美國Neo Markers公司。Bax單克隆抗體、SP試劑盒、DAB顯色試劑盒購自福州邁新生物技術(shù)公司。設(shè)陰性及陽性對照,其他按說明書常規(guī)操作。

        1.3 結(jié)果判定

        免疫組化染色反應(yīng)為黃至棕黃色顆粒,Bax的陽性表達(dá)產(chǎn)物為細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)內(nèi)黃色或棕黃色顆粒,E2F-1的陽性表達(dá)產(chǎn)物為細(xì)胞核內(nèi)棕黃色顆粒。細(xì)胞數(shù)>10%為陽性標(biāo)準(zhǔn)。

        1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

        采用χ2檢驗,經(jīng)SPSS 12.0分析,P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 Bax的表達(dá)

        在子宮腺肌病組織中,其原位子宮內(nèi)膜和異位子宮內(nèi)膜中Bax蛋白的表達(dá)明顯增加,與正常子宮內(nèi)膜組織比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。子宮腺肌病組織中Bax表達(dá)在增生期和分泌期差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),Bax在原位與異位內(nèi)膜組間表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)(表1)。

        表1 子宮腺肌病組織和正常子宮內(nèi)膜組織中Bax的表達(dá)[n(%)]Tab.1 The expression of Bax in endometrium of adenomyosis and normal endometrium[n(%)]

        2.2 E2F-1的表達(dá)

        轉(zhuǎn)錄因子E2F-1在子宮腺肌病組織中的表達(dá)明顯增加,且其表達(dá)與正常子宮內(nèi)膜組織比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。子宮腺肌病組織中E2F-1表達(dá)在增生期與分泌期差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),E2F-1在原位與異位內(nèi)膜組間的表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。在子宮腺肌病患者組織中Bax、E2F-1的表達(dá)具有一定的正相關(guān)性(表2)。

        表2 子宮腺肌病組織和正常子宮內(nèi)膜組織中E2F-1的表達(dá)[n(%)]Tab.2 The expression of E2F-1 in endometrium of adenomyosis and normal endometrium[n(%)]

        3 討論

        細(xì)胞凋亡(apoptosis,APO)是一種由基因調(diào)控的細(xì)胞自身程序性死亡,在生物體的正常生理活動和病理過程中都有十分重要的意義。當(dāng)細(xì)胞凋亡調(diào)控程序紊亂時就會引發(fā)疾病,但近年研究熱點都在惡性腫瘤上[1-2],子宮腺肌病雖為良性病變,但其異位內(nèi)膜腺體及間質(zhì)侵及子宮肌層,其生物學(xué)行為與惡性腫瘤有相似之處,以此推斷其發(fā)病機制可能與凋亡相關(guān)。近年來研究發(fā)現(xiàn),子宮內(nèi)膜異位癥患者內(nèi)膜細(xì)胞與正常人內(nèi)膜細(xì)胞凋亡率差異顯著,細(xì)胞凋亡異常可能是子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生及發(fā)展的重要原因之一[3-4]。

        凋亡調(diào)節(jié)蛋白Bax于1993年被發(fā)現(xiàn),作為Bcl-2的對抗劑。bcl-2基因是近年來發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞凋亡控制基因,通過控制細(xì)胞凋亡而延長細(xì)胞的壽命[5]。在正常子宮內(nèi)膜中Bcl-2表達(dá)呈周期性變化,增生期強于分泌期,分泌期強于月經(jīng)期,但在子宮腺肌病病灶中,Bcl-2持續(xù)表達(dá)而無周期性變化[6]。與其相似,Bax可促進(jìn)細(xì)胞死亡,被稱為“凋亡促進(jìn)基因”,可通過調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡而縮短細(xì)胞壽命。本研究顯示,在正常子宮內(nèi)膜中Bax表達(dá)呈明顯周期性變化,且增生期高于分泌期;在子宮腺肌病組織中Bax蛋白的表達(dá)顯著高于正常子宮內(nèi)膜組織,且持續(xù)表達(dá)而無周期性變化(正常子宮內(nèi)膜Bax表達(dá)低于子宮腺肌病的異位內(nèi)膜Bax表達(dá))。以此推斷子宮腺肌病的發(fā)病機制可能與Bax的表達(dá)增加、內(nèi)膜細(xì)胞對凋亡敏感性下降有關(guān)。這為研究子宮腺肌病的發(fā)病機制和尋找防治對策提供了新的理論依據(jù)。

        E2F-1蛋白作為轉(zhuǎn)錄因子家族中的一員,對細(xì)胞周期限制點起直接調(diào)控作用,是細(xì)胞周期中G1期向S期過渡的重要調(diào)控因子[7-8]。E2F-1的表達(dá)可縮短細(xì)胞從G1期進(jìn)入S期的時間,使細(xì)胞周期失調(diào),引發(fā)細(xì)胞過度增殖。研究顯示,E2F-1既可作為癌基因又能作為抑癌基因起作用,推測與細(xì)胞所處環(huán)境不同及器官特異性有關(guān)[9-12]。本研究表明,E2F-1的表達(dá)在子宮腺肌病組織中明顯高于正常子宮內(nèi)膜組織,說明E2F-1蛋白的高表達(dá)可促進(jìn)異位內(nèi)膜過度增殖,可使異位內(nèi)膜細(xì)胞具有更強的分裂增殖及浸潤能力,與子宮腺肌病的發(fā)生呈正相關(guān)。

        綜上所述,Bax、E2F-1的表達(dá)與子宮腺肌病的發(fā)生密切相關(guān)。子宮內(nèi)膜細(xì)胞自發(fā)性凋亡是其保持正常結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵,而凋亡異常是子宮腺肌病發(fā)生的重要因素。因此,推測E2F-1表達(dá)增高,同時Bcl-2也增高,兩者發(fā)揮協(xié)同作用誘發(fā)子宮腺肌病。研究細(xì)胞凋亡對探討子宮腺肌病的發(fā)病機制及指導(dǎo)臨床治療有重要意義。

        [1]楊全會,許榮焜.細(xì)胞凋亡與腫瘤[J].生理科學(xué)進(jìn)展,2006,37(2):373-378.

        [2]Liang WU,Wang Y,Tian D.Knockdown of survivin expression by siRNA induces apoptosis of hepatocellular carcinoma cell[J].Journal of Huazhong University of Science and Technology,2007,27(4):403-406.

        [3]Braun DP,Ding J,Shen J,et al.Relationship between apoptosis and the number of macrophages in eutopic endometrium from women with and without endometriosis[J].Fertil Steril,2002,80(4):830-835.

        [4]Beliard A,Noel A,Foidart JM.Reduction of apoptosis and proliferation in endometriosis[J].Fertil Steril,2004,82(1):80-85.

        [5]Reed JC.Bcl-2 and the regulation of programmed cell death [J].The Journal of Cell Biology,1994,124(3):1-6.

        [6]Meresman GF,Vighi S,Buquet RA.Apoptosis and expression of Bcl-2 and Bax in eutopic endometrium from women with endometriosis[J].Fertil Steril,2000,78(4):760-766.

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        [8]Zhang SY,Liu SC,Johnson DG.E2F-1 gene transfer enhances invasiveness of human head and neck carcinoma cell lines[J].Cancer Res,2000,60(21):5972-5976.

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        [11]Puga A,Barnes SJ,Dalton TP,et al.Aromatic hydrocarbon receptor interaction with the retinoblastoma protein potentiates repression of E2F-dependent transcription and cell cycle arrest[J].J Biol Chem,2000,275(4):2943-2950.

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