亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        玉郎傘多糖對慢性應(yīng)激小鼠不同腦區(qū)腺苷酸環(huán)化酶的影響

        2010-05-26 06:14:26王乃平付書婕黃仁彬
        中成藥 2010年4期
        關(guān)鍵詞:前額下丘腦腦區(qū)

        梁 霜, 王乃平, 付書婕, 黃仁彬*

        (1.廣西醫(yī)科大學(xué)藥理學(xué)教研室,廣西南寧 530021;2.南寧市第二人民醫(yī)院,廣西南寧 530013)

        Wei的塊根中提取的有效成分,本課題組前期研究表明,YLSPS可顯著縮短行為絕望動物模型的累計不動時間,提高腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)濃度,并與α2-腎上腺素受體有關(guān)。現(xiàn)有理論認(rèn)為,抑郁癥的發(fā)生不僅與腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)及其受體有關(guān),還涉及受體后信號傳導(dǎo)系統(tǒng)。單胺受體后腺苷酸環(huán)代酶(adenylate cyclase,AC)活性對神經(jīng)元保護(hù)和神經(jīng)元再生有著重要的影響。經(jīng)典的抗抑郁藥對腦內(nèi)AC有調(diào)節(jié)作用,并且激活腦內(nèi) cAMP-CREB(cAMP responseelement-binding protein,cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白)通路,這也被認(rèn)為是抗抑郁藥作用的重要機制[1,2]。因此,為更深入探討YLSPS抗抑郁作用機制,本研究采用放射免疫法測定YLSPS對慢性應(yīng)激小鼠不同腦區(qū)AC活性的影響。

        1 材料與方法

        1.1 實驗動物 昆明種小鼠,SPF級,♂性,體重(18±22)g,由廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供,許可證號:SCXK(桂)2003-0003。

        1.2 實驗藥物 YLSPS,由本室自行提?。ㄓ窭蓚憬?jīng)醇提后的藥渣用熱水提取,乙醇沉淀,Sevag試劑脫蛋白,采用DEAE纖維素(DEAE-52)柱層析分離純化,分離得到的YLSPS經(jīng)Sephadex-75凝膠柱層析,硫酸-苯酚法以及高效凝膠滲透色譜法證實為高純度多糖,純度95%,紫外掃描顯示無核酸和蛋白特征吸收峰,薄層色譜和氣相色譜表明由葡萄糖和阿拉伯糖組成,紅外光譜顯示有典型的多糖吸收峰)。實驗前將各試藥用蒸餾水配成所需濃度,4℃冷藏備用。

        1.3 儀器與試劑 GC-1200γ放射免疫計數(shù)器(中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)科技實業(yè)總公司中佳光電儀器分公司);TGL-16G-A低溫離心機;FJ-200高速均質(zhì)分散機(上海標(biāo)本模型廠)。環(huán)磷酸腺苷放射免疫分析試劑盒(北京普爾偉業(yè)生物科技有限公司,批號:20081024)。

        1.4 方法

        1.4.1 慢性應(yīng)激抑郁模型的制備、動物分組和給藥 參照大鼠不可預(yù)知的慢性應(yīng)激模型、大鼠慢性不可預(yù)知的溫和性應(yīng)激模型[3]和小鼠慢性應(yīng)激模型[4]建立。將小鼠隨機分成6組:空白組、模型組、氟西汀組(FLU組)、YLSPS低劑量組(YLSPSL組)、YLSPS中劑量組(YLSPSM)、YLSPS高劑量組(YLSPSH),每組10只??瞻捉M正常飲食水,不給予任何刺激。其余各組均接受21 d的不可預(yù)知慢性刺激。刺激包括:冷水游泳(10 ℃,5 min)、夾尾(1 min)、懸吊30 min、禁水(24 h)、禁食(24 h)、潮濕飼養(yǎng)(將200 mL水加入有鋸末的籠底,24 h)和晝夜翻轉(zhuǎn)。刺激方式以每日1次隨機交替。

        1.4.2 取材和樣品處理 將小鼠斷頭,在冰臺上迅速分離前額皮層、下丘腦、海馬,稱重。取組織50 mg,加入2 mL冷的50 mM pH4.75醋酸緩沖液(27.22 g NaAc·3H2O溶于1 000 mL蒸餾水,即為 0.2 mol/L NaAc。用冰醋酸配制0.2 mol/L醋酸,然后取410 mL 0.2 mol/L HAc和590 mL 0.2 mol/L NaAc混勻,測pH值調(diào)到pH4.75,然后每1 000 mL溶液加入5.95 g EDTA二鈉鹽溶解即得200 mM pH 4.75醋酸緩沖液,用時1∶4稀釋)的試管內(nèi)(冰浴),勻漿,加入2 mL無水乙醇,混勻,靜止5 min,3 500 r/min冷凍高速離心15 min,將上清液收集在青霉素小瓶內(nèi),再用75%乙醇2 mL洗沉淀,勻漿分散,混勻,3 500 r/min冷凍高速離心15 min,合并上清液,60℃烤箱中吹干,殘渣放于4℃保存。測時用1 mL醋酸緩沖液溶解,取0.1 mL測量。

        1.4.3 環(huán)磷酸腺苷(cAMP)的測定 嚴(yán)格按照環(huán)磷酸腺苷放射免疫分析試劑盒要求測定各反應(yīng)管中cAMP產(chǎn)生量。反應(yīng)結(jié)束后,3 000 r/min離心15 min,小心吸去上清液。在γ放射免疫計數(shù)器上測定沉淀CPM數(shù)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算cAMP的產(chǎn)生量。

        2 結(jié)果

        經(jīng)慢性應(yīng)激后,模型組小鼠前額皮層、下丘腦、海馬cAMP產(chǎn)生的量明顯降低,與空白組相比具顯著性差異(P<0.01)。與模型組組相比,F(xiàn)LU(20 mg/kg)和YLSPA各劑量組(150、300、600 mg/kg)均可增加慢性應(yīng)激小鼠前額皮層、下丘腦、海馬cAMP產(chǎn)生的量(P<0.01)。結(jié)果提示FLU在20 mg/kg、YLSPS在150~600 mg/kg的條件下可激活慢性應(yīng)激小鼠前額皮層、下丘腦、海馬AC活性。結(jié)果見表1。

        表1 YLSPS對慢性應(yīng)激小鼠各腦區(qū)AC活性的影響(±s,n=10)

        表1 YLSPS對慢性應(yīng)激小鼠各腦區(qū)AC活性的影響(±s,n=10)

        注:與空白組比較,*P<0.05,**P <0.01;與模型組比較,▲P <0.05,▲▲P <0.01。

        cAMP/(ng/mL)前額皮層 下丘腦 海馬空白組 - 128.10±9.53▲▲ 84.90±10.10▲▲ 93.10±2.42組別 劑量/(mg/kg)▲▲模型組 - 88.70±4.57** 62.30±3.23** 65.60±8.25**FLU組 20 124.75±4.02▲▲ 83.80±1.99▲▲ 88.00±3.23▲▲YLSPSL 150 101.40±9.24**▲▲ 74.40±4.20**▲▲ 75.90±4.58**▲▲YLSPSM 300 121.00±4.47*▲▲ 79.10±2.16*▲▲ 84.80±1.87**▲▲YLSPSH 600 124.10±5.09▲▲ 84.10±1.91▲▲ 88.40±9.42▲▲

        3 討論

        抗抑郁藥的作用機制目前尚不明確,傳統(tǒng)單胺遞質(zhì)理論和受體理論無法充分解釋抗抑郁藥的臨床效應(yīng)滯后現(xiàn)象。目前普遍認(rèn)為抑郁癥發(fā)病不僅限于神經(jīng)遞質(zhì)和受體的改變,還會累及受體后的信號通路。近年來的研究證實,抑郁患者大腦皮層腺苷酸環(huán)化酶(adenylyl cyclase,AC)活性降低,大腦神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)cAMP信號通路(cAMP signal pathway)功能紊亂[5]。抑郁癥與cAMP信號通路的功能異常密切相關(guān),經(jīng)抗抑郁劑處理后能逆轉(zhuǎn) AC活性水平低下的狀態(tài)[6],誘導(dǎo)cAMP 通路代償性增強[7]。

        cAMP信號通路又稱PKA(protein kinase A,蛋白激酶A)系統(tǒng),是環(huán)核苷酸系統(tǒng)的一種。在這個系統(tǒng)中,細(xì)胞外信號與相應(yīng)受體結(jié)合,通過調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)第二信使cAMP的水平而引起反應(yīng)的信號通路。信號分子通常是激素,對cAMP水平的調(diào)節(jié),是靠AC進(jìn)行的。cAMP通路的激活可能是抗抑郁劑產(chǎn)生治療效果的途徑之一。很多抗抑郁藥物都增加了突觸NE和/或5-HT的濃度,這些神經(jīng)遞質(zhì)與細(xì)胞膜上相應(yīng)的受體結(jié)合(如G蛋白),G蛋白可調(diào)節(jié)AC的活性,AC可大量催化ATP轉(zhuǎn)變成cAMP,使神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的cAMP濃度增高,cAMP作為第二信使進(jìn)一步激活PKA,活化的PKA轉(zhuǎn)運至細(xì)胞核,使轉(zhuǎn)錄因子cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(cAMP-responsive element binding protein,CREB)的Ser133位絲氨酸磷酸化,CREB的磷酸化可以實現(xiàn)對相關(guān)基因的誘導(dǎo)和調(diào)控。研究表明,AC是G蛋白偶聯(lián)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中一個重要的酶,AC可能是新型組織及細(xì)胞特異性藥物的作用靶點,抗抑郁劑對cAMP通路的激活具有特異性,因此AC也就成為藥物篩選的相對特異的指標(biāo)之一。

        前期研究發(fā)現(xiàn),YLSPS對行為絕望動物模型和慢性應(yīng)激小鼠模型具有顯著的抗抑郁作用,能直接或間接提高慢性應(yīng)激小鼠腦中NE、5-HT、DA含量。為深入探討YLSPS抗抑郁作用的機制,本研究采用放射免疫方法考察YLSPS對慢性應(yīng)激小鼠不同腦區(qū)AC活性的影響。結(jié)果表明,YLSPS各劑量組能顯著提高慢性應(yīng)激小鼠前額皮層、下丘腦和海馬AC活性。因此,YLSPS影響小鼠前額皮層、下丘腦和海馬AC活性可能是其抗抑郁活性的重要機制之一。YLSPS在抗抑郁作用中是如何影響不同腦區(qū)AC活性尚需進(jìn)一步研究。

        [1]Li Y F,Gong Z H,Cao J B,et al.Antidepressant-like effect of agmatine and its possiblemechanism[J].Eur J Pharmacol,2003,469:81-88.

        [2]Li Y F,Luo Z P.Depression:neuron lesion and neurogenesis down-regulation[J].Acta Pharm Sin,2004,39:949-953.

        [3]Harkin A,Houlihan D D,Kelly J P.Reduction in preference for saccharin by repeated unpredictable stress in mice and its prevention by imipramine[J].J Psychopharmacol,2002,16(2):115-123.

        [4]Li Y F,Yuan L,Xu Y K,et al.Antistress effect of oligosaccharides extracted from Morinda officinalis in mice and rats[J].Acta pharmacol Sin,2001,22(12):1084-1088.

        [5]Eric J N,Michel B,Ralph J D,et al.Neurobiology of depression[J].Neuron,2002,34(1):13-25.

        [6]Hines L M,Tabakoff B.Platelet adenylyl cyclase activity:a biological marker for major depression and recent drug use[J].Biol Psychiatry,2005,15;58(12):995-962.

        [7]D'Sa C,Eisch A J,Bolger G B,et al.Differential expression and regulation of the cAMP-selective phosphodiesterase type 4A splice variants in rat brain by chronic antidepressant administration[J].Eur J Neurosci,2005,22(6):1463-1475.

        猜你喜歡
        前額下丘腦腦區(qū)
        小而強大的下丘腦
        腦自發(fā)性神經(jīng)振蕩低頻振幅表征腦功能網(wǎng)絡(luò)靜息態(tài)信息流
        簡單搓搓可養(yǎng)生
        科學(xué)家發(fā)現(xiàn)控制衰老開關(guān)
        中老年健康(2017年9期)2017-12-13 07:16:39
        中藥對下丘腦作用的研究進(jìn)展
        中成藥(2017年6期)2017-06-13 07:30:34
        說謊更費腦細(xì)胞
        甲狀腺素和多奈哌齊對甲狀腺功能減退癥大鼠前額葉synaptotagmin-1表達(dá)的影響
        回藥阿夫忒蒙丸對失眠大鼠下丘腦5-HT和5-HIAA含量的影響
        七氟烷對幼鼠MAC的測定及不同腦區(qū)PARP-1的影響
        丙泊酚對機械性刺激作用腦區(qū)的影響
        一区二区三区在线日本视频| 久久99精品国产99久久6尤物| 国产乱子伦精品免费无码专区| 日韩爱爱视频| 人妻免费黄色片手机版| 国产成人精品日本亚洲i8| 狼狼综合久久久久综合网| 国产午夜福利小视频合集| 亚洲激情人体艺术视频| 国产精品一区二区三区成人| 午夜被窝精品国产亚洲av香蕉 | 18禁黄无遮挡免费网站| 国产亚洲精品在线播放| 国产精品无码一区二区三级| 色哟哟网站在线观看| 免费观看一区二区| 丰满熟女人妻一区二区三区| 亚洲人成网77777色在线播放| 久久综合狠狠综合久久| 免费国产黄线在线播放| 国产一区二区三区特区| 无码av专区丝袜专区| 中日韩精品视频在线观看| 成 人 网 站 在线 看 免费| 亚洲女同性恋第二区av| 亚洲精品国产成人片| 久久久久久久女国产乱让韩| 亚洲欧美成人久久综合中文网| 久久一区二区三区老熟女| 国产精品久久777777| 国产污污视频| 日本一区二区三区在线视频观看 | 欧美牲交videossexeso欧美| 欧美午夜精品久久久久久浪潮| 国产欧美日本亚洲精品一5区| 青青草小视频在线观看| 亚洲精品久久久久久久久久吃药| 国产亚洲精品看片在线观看| 亚洲综合av一区在线| 日本丰满少妇裸体自慰| 亚洲 欧美 影音先锋|