陳劍鋒，陳學(xué)松

（1.廣西壯族自治區(qū)岑溪市人民醫(yī)院，廣西岑溪 543200；2.廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗(yàn)所，廣西梧州 543002）

有機(jī)氯農(nóng)藥化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，脂溶性大，長(zhǎng)期存在于水、土壤之中，并通過(guò)生物鏈富集在動(dòng)植物體內(nèi)，對(duì)自然環(huán)境和人體健康造成極大危害。穿心蓮為爵床科植物穿心蓮的干燥地上部分，因具有清熱解毒、涼血消腫等功效[1]，所以在成藥中被廣泛使用。為了確保藥材質(zhì)量，本實(shí)驗(yàn)研究了有機(jī)氯在中藥材天花粉中的殘留測(cè)定方法。

1 材料與方法

1.1 儀器

Shimadzu GC-2010氣相色譜儀，配備電子捕獲檢測(cè)器（ECD），GC-Solution 工作站；RTX-1701 毛細(xì)管柱 （30.00 m×0.32 mm×0.32μm）；CQX25-06超聲波發(fā)生器（上海必能信超聲有限公司）；XH-C旋渦混合器（金壇市醫(yī)療儀器廠）；TDL-5大容量離心機(jī)（金壇市醫(yī)療儀器廠）；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）。

1.2 試劑

正己烷為農(nóng)殘級(jí)（Fisher公司）；無(wú)水硫酸鈉（分析純，研細(xì)450℃烘4 h，汕頭市光華化學(xué)廠）；濃硫酸（優(yōu)級(jí)純）；氯化鈉為分析純；水為超純水。

1.3 分析方法

1.3.1 提取和凈化

1.3.1.1 提取 稱(chēng)取過(guò)60目篩的穿心蓮5 g放入100 ml具塞離心管中，加水15 ml浸泡1 h，加入20 ml正己烷，超聲15 min。離心（5 000 r/min）3 min，收集有機(jī)相，水相加入 20 ml正己烷，超聲 15 min。 離心（5 000 r/min）3 min，合并 2次有機(jī)相，用鋪有無(wú)水硫酸鈉的濾紙濾過(guò)，濾液置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器45℃濃縮至近干，正己烷定容至2 ml[2]。1.3.1.2凈化 取提取液置5 ml具塞離心管，加1 ml濃硫酸[3-4]，漩渦混合 1 min，離心（5 000 r/min）3 min，棄去硫酸層，如法重復(fù)操作，直到濃硫酸與正己烷兩相溶液呈無(wú)色透明狀為止。然后加1 ml飽和氯化鈉溶液，漩渦混合1 min,離心（5 000 r/min）3 min，取有機(jī)相，供氣相色譜測(cè)定。

1.3.2 氣相色譜條件

采用RTX-1701[5]毛細(xì)管柱；進(jìn)樣溫度：230℃；檢測(cè)器溫度：300℃；升溫程序：80、30、220℃（保持 1 min），0.5、223、20、250℃（保持 7 min）

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

分別精密吸取 α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、PP′-DDE 、OP′-DDT、PP′-DDD、PP′-DDT、PCNB（均為 50 μg/ml）1 ml，置于50 ml量瓶中，正己烷定容至刻度，使混合農(nóng)藥對(duì)照品濃度為1μg/ml。分別精密吸取一定體積的上述混合對(duì)照品儲(chǔ)備液于10 ml量瓶中，用石油醚稀釋?zhuān)玫?.001、0.020、0.100、0.500、1.00 μg/ml的一系列不同濃度的混合對(duì)照品溶液。按“1.3.2”項(xiàng)條件下測(cè)定。以峰面積為縱坐標(biāo)（y），濃度為橫坐標(biāo)（x），計(jì)算線性方程，結(jié)果見(jiàn)圖1、表 1。結(jié)果表明在1～1 000 g/L內(nèi)呈良好線性關(guān)系。

2 結(jié)果

2.1 精密度實(shí)驗(yàn)

吸取同一濃度的有機(jī)氯對(duì)照品溶液，進(jìn)樣量1μl，重復(fù)進(jìn)樣 5 次，按“1.3.2”條件操作得：α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、PP′-DDE、OP′-DDT、PP′-DDD、PP′-DDT、PCNB 的RSD（%）分別為 1.62、2.14、2.02、1.76、1.53、2.32、1.92、1.65、1.84。

表1 有機(jī)氯農(nóng)藥的線性方程和相關(guān)系數(shù)

2.2 檢出限測(cè)定

稱(chēng)取已測(cè)空白樣品分別添加標(biāo)準(zhǔn)液，按“1.3.1”項(xiàng)條件測(cè)定，以3倍噪音計(jì)算方法的檢出限。見(jiàn)表2。

表2 有機(jī)氯的檢測(cè)限

2.3 回收率試驗(yàn)

稱(chēng)取已測(cè)空白樣品6份，分別精密添加混合標(biāo)準(zhǔn)液（0.02 μg/ml）1 ml，按“1.3.1”項(xiàng)條件測(cè)定。 見(jiàn)表 3。

2.4 樣品的測(cè)定

取6批穿心蓮按照上述方法操作，按“1.3.2”項(xiàng)條件測(cè)定。見(jiàn)表4。

表3 有機(jī)氯的回收率

表4 6批穿心蓮的有機(jī)氯檢測(cè)結(jié)果

3 討論

樣品中先加入一定的水主要是使植物組織膨脹，利于有機(jī)氯農(nóng)藥的浸出。

嘗試了RTX-1、RTX-5等不同極性的毛細(xì)管柱，發(fā)現(xiàn)中等極性的RTX-1701對(duì)9種有機(jī)氯，峰形尖銳，分離較好。

對(duì)于6批不同產(chǎn)地的穿心蓮的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)有3批檢出有機(jī)氯，顯示加強(qiáng)穿心蓮有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的檢測(cè)還是很有必要的。

[1]肖樹(shù)雄,王曉枉,鄭劍紅.穿心蓮的成分及其分析方法研究概況[J].中國(guó)藥師,2002,5(11):693.

[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典（2005年版）[M].一部.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:附錄 52.

[3]萬(wàn)紹暉,趙春杰,岳淑梅.毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定當(dāng)歸中有機(jī)氯農(nóng)藥[J].中國(guó)藥學(xué)雜志,2004,39(1):22-23.

[4]朱日然,瀚海洋,朱宗民.黃芪中有機(jī)氯類(lèi)農(nóng)藥殘留量的毛細(xì)管氣相色譜測(cè)定[J].齊魯藥事,2009,28(11):662-664.

[5]陳文生,張明時(shí),張澤楷.黔產(chǎn)中成藥中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2009,20(9):2276.