亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        雙黃連凍干粉大鼠血清藥物成分的初步研究*

        2010-05-16 03:31:10宋殿榮宋紅運王躍飛徐燕穎潘桂湘
        天津中醫(yī)藥 2010年2期
        關鍵詞:雙黃連草素凍干粉

        郭 潔,宋殿榮,宋紅運,王躍飛,徐燕穎,潘桂湘

        (1.天津中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院婦科,天津 300150;2.天津中醫(yī)藥大學中醫(yī)藥研究院,省部共建教育部方劑重點實驗室,天津 300193)

        雙黃連凍干粉大鼠血清藥物成分的初步研究*

        郭 潔1,宋殿榮1,宋紅運1,王躍飛2,徐燕穎1,潘桂湘2

        (1.天津中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院婦科,天津 300150;2.天津中醫(yī)藥大學中醫(yī)藥研究院,省部共建教育部方劑重點實驗室,天津 300193)

        [目的]對雙黃連凍干粉進行血清藥物化學分析、闡明其體內藥效物質基礎,為優(yōu)化處方配伍提供實驗依據。[方法]建立雙黃連凍干粉高效液相色譜法(HPLC)指紋圖譜,予大鼠尾靜脈注射雙黃連凍干粉,分別于10min、12 h取血,通過空白血清、含藥血清、雙黃連凍干粉HPLC指紋圖譜比對,分析雙黃連凍干粉的血清藥物成分。[結果]雙黃連凍干粉HPLC指紋圖譜中分離得到21個化合物,其中7個為已知化合物分別為:綠原酸、連翹酯苷、黃芩苷、連翹苷、木犀草素、漢黃芩苷和黃芩素;給藥后10min大鼠血清樣品中檢測到17個原形成分;12 h后可檢測到黃芩苷、木犀草素和漢黃芩苷及一未知成分。[結論]7個已知成分可能為雙黃連凍干粉體內發(fā)揮藥效的活性成分及主要物質基礎;其中黃芩苷、木犀草素和漢黃芩苷,可能對雙黃連凍干粉藥效作用的維持發(fā)揮了作用。

        雙黃連凍干粉;藥效物質基礎;高效液相色譜法指紋圖譜;血清藥物化學

        雙黃連凍干粉是中國最早研制成功的中藥粉針劑,由金銀花、黃芩、連翹3味中藥組成,具有抗菌、抗病毒、免疫調節(jié)等作用,已廣泛應用于臨床,治療細菌、病毒等病原體感染引起的疾病療效確切。然而隨著使用范圍越來越廣,不良反應的報道也逐年增加。因此,本研究從雙黃連凍干粉的血清藥物成分入手,闡明體內藥效物質基礎,為優(yōu)化處方配伍及新藥的二次開發(fā)提供實驗依據。

        1 材料儀器與試藥

        1.1 試藥與試劑 雙黃連凍干粉(SHL),規(guī)格:600 mg/支,購自哈藥集團中藥二廠,批號為0711010。綠原酸(110753-200413,純度>98%)、黃芩苷((110715-200212,純度>98%)、木犀草素(111520-200205,純度>98%)、黃芩素(111595-200604,純度>98%)對照品購自中國藥品生物制品鑒定所;漢黃芩苷對照品(061012,純度≥99%)購自上海友思生物科技公司;連翹苷、連翹酯苷對照品(純度>97%)購自天津一方科技有限公司;試劑:乙睛(色譜純,MERCK公司),甲醇(色譜純,MERCK公司),甲酸(分析純,天津市化學試劑二廠),實驗用水為超純水。

        1.2 動物 清潔級Wistar雌性大鼠,體質量(250±10)g,購自中國醫(yī)學科學院動物研究所,動物合格證號 SCXK(京)2005-0013。

        1.3 儀器 Agilent1100高效液相色譜儀(四元泵、在線真空脫氣機、自動進樣器、柱溫箱、DAD檢測器、Agilent色譜工作站)。

        2 方法

        2.1 雙黃連注射液的制備 取SHL(600mg/支)1支,精密加入生理鹽水6mL,超聲溶解混勻,配成濃度為100 g/L的SHL注射液備用。

        2.2 雙黃連供試液的制備 稱取適量SHL,轉移至10mL容量瓶,30%甲醇定容,超聲溶解,配制SHL供試溶液備用。

        2.3 對照品溶液的制備 稱取適量綠原酸、連翹酯苷、黃芩苷、連翹苷、木犀草素、漢黃芩苷及黃芩素對照品,30%甲醇溶解稀釋,配成混合對照品溶液。

        2.4 空白血清及含藥血清樣品的制備 6只Wistar大鼠,按378mg/kg經尾靜脈給予SHL注射液,另一組予生理鹽水1mL/次,給藥后10min、12 h取材。乙醚麻醉后,經眼眶靜脈取血0.5mL,離心分離含藥及空白血清,-80℃冷凍備用。

        2.5 空白及含藥血清樣品的處理 血清置于室溫條件下融化,取0.2mL血清,加入50μL 0.1mol/L鹽酸,渦旋 1min,加入甲醇乙腈混合液(1∶1)0.8mL,渦旋1min,室溫靜置20min,14 000 r/min離心10min,取上清液,于40℃水浴,空氣吹干。殘渣以100μL流動相復溶,渦旋2min,14 000 r/min離心10min,取上清液進樣。

        2.6 色譜條件 依利特HypersilODS2色譜柱(4.6mm×250mm,5 μm);流動相 A-乙腈,B-0.1%甲酸,梯度洗脫:0~10min,18%~28%A,10~20min,28%~42%A,20~25min,42%~55%A;流速 1.0mL/min;柱溫 25℃;檢測波長280 nm;進樣量20μL。

        3 結果

        分別吸取SHL供試液、對照品溶液、含藥血清及空白血清供試液各20μL,注入高效液相色譜儀,記錄色譜圖。比較分析確定入血成分。

        4 討論

        SHL高效液相色譜法(HPLC)指紋圖譜中有21個共有峰,與對照品比對,7個共有峰得到歸屬,見表1。其中黃芩苷、連翹苷、綠原酸和木犀草素,具有較好抗菌、抗病毒作用,為中藥黃芩、連翹和金銀花質量控制標準的代表成分。連翹酯苷、黃芩素和漢黃芩苷亦有良好的抗菌、抗病毒作用。連翹酯苷是迄今為止從連翹屬植物中發(fā)現(xiàn)的抗菌活性最強的成分之一,為連翹的主要特征性成分,對合胞病毒、腺病毒3型和7型、柯薩奇病毒等病毒,及金黃色葡萄球菌、停乳鏈球菌等多種細菌具有較好的抑殺作用。因此,在評價連翹及以抗菌為主要功效的制劑質量時以該化合物為評價指標較為合適。黃芩的黃酮類成分是其發(fā)揮藥理活性的基礎,其中黃芩素和漢黃芩苷是抗菌、抗病毒的主要活性成分,也應作為評價SHL質量標準的特征成分。本研究方法對SHL組方中的3味中藥金銀花、黃芩、連翹的7個藥效代表成分可進行同時測定,方法簡便、靈敏,可更加準確、全面地反映SHL的藥效代表成分。因此,可用于對SHL質量評價的研究。

        表1 色譜峰歸屬、注射SHL后10m in、12 h大鼠血清移行成分及保留時間(m in)Tab.1 Com ponent-herb originsof themain Peak of HPLC Fingerprintand them igrating com ponentsof serum and containing time(m in)

        SHL的給藥方式為靜脈注射,藥物成分直接入血,具有速效、高效的特點。給藥后10min,血中檢測到17個原形成分,為已歸屬的7個化合物和10個未知化合物。結合藥理作用分析,推測綠原酸、木犀草素、黃芩苷、黃芩素、漢黃芩苷、連翹苷及連翹酯苷7種已歸屬的化合物可能為SHL體內發(fā)揮藥效的主要物質基礎,而對其余10個化合物的鑒定及藥理作用有待進一步研究。

        給藥后12 h,SHL大多數(shù)原形成分已基本消除,血清中僅檢測到4個原形成分,分別為黃芩苷、漢黃芩苷、木犀草素和一未知成分,未檢測到新的代謝產物。提示這4種成分在體內存留時間相對較長,對SHL體內藥效作用的維持可能發(fā)揮了重要作用。綠原酸大鼠體內代謝符合靜脈注射二室開放模型,120mg/kg給藥時生物半衰期26min[1]。按1.25、2.5、5mg/kg予大鼠靜脈注射連翹苷,分布半衰期在5~7min,生物半衰期在21~27min[2]。大鼠靜脈注射連翹酯苷50mg/kg后,血藥濃度迅速下降,體內分布快,主要以消除過程為主,其在大鼠體內的藥動學過程符合三室開放模型[3]。黃芩素在體內血液中發(fā)現(xiàn)的主要代謝產物為黃芩苷,尾靜脈注射黃芩素后,在大鼠體內被迅速代謝成黃芩苷,30min后降至接近定量限的水平并維持8 h[4]。由此推測,給藥后12 h未檢測到綠原酸、連翹苷、連翹酯苷及黃芩素可能與其體內代謝特點有關。

        SHL自1992年被國家中醫(yī)藥管理局指定為全國中醫(yī)醫(yī)院急診科室必備中成藥以來,使用范圍越來越廣,也屢有不良反應的報道。SHL引起的不良反應約99%發(fā)生在第一次用藥過程中,其中又有約1/2至1/3發(fā)生在用藥的30min以內[10]。本研究在給藥后10min大鼠的血清中檢測到綠原酸和黃芩苷,兩種化合物既是SHL抗菌抗病毒的有效成分,又是致敏原[11],因此對黃芩苷、綠原酸等成分應加強其療效、毒性與劑量關系研究,調整其在粉針劑中的含量,從而達到安全有效的治療效果,為優(yōu)化處方配伍及新藥的二次開發(fā)提供實驗依據。

        [1]何 心,石春偉,張?zhí)m平.雙黃連粉針中綠原酸在大白鼠中的藥物動力學[J].中國臨床藥學雜志,1998,7(3):134-136.

        [2]Yun-Xia Li,Xue-Hua Jiang,Liang Huang,et al.Determination of phillyrin in rat plasma by high-performance liquid chromatography and itsapplication to pharmacokinetic studies[J].Journal of Pharmaceuticaland Biomedical Analysis,2006 4(1):628-632.

        [3]王進東,柴秋彥,張立偉.連翹酯苷在大鼠體內的藥代動學研究[J].世界科學技術—中醫(yī)藥現(xiàn)代化,2008,10(4):53-57.

        [4]劉 俊,邱利焱,金 一.RP-HPLC測定黃芩素及其代謝產物黃芩苷大鼠血漿濃度[J].中國藥學雜志,2007,42(12):929-931.

        Study on serum active constituentsof Shuanghuanglian dry cryogen powder in rats

        GUO Jie1,SONGDian-rong1*,WANGYue-fei2,etal
        (1.Gynecology of the Second HospitalAffiliated to Tianjin University of TCM, Tianjin 300150, China; 2.The TraditionalChinese Medicine Research Centreof Tianjin University of TCM,key LaboratoryofPharmacology of Formulae,Ministry ofEducation,Tianjin 300193,China)

        [Objective]To investigate theactive compounds in Shuanghuanglian Powder Injection(SHL)Itwasdetermined by serum pharmacochemistry for illuminating the elemental pharmacodynamic compounds and providing the foundation for optimizing the prescription of SHL.[Methods]Plasmawas obtained from Wistar rats 10min,12 h after intravenous injection of SHL.Based upon the established HPLC fingerprint of SHL,itwas compared with HPLC fingerprints of blank serum,serum containing drug and SHL.The serum active compounds in SHLwere analyzed.[Results]Twenty-one compoundswere separated by HPLC,seven compoundswere confirmed to be the SHL respectively as follow:caffeotannic acid,forsythoside,baicalin,forsythin,luteolin,wogonoside and baicalein;seventeen compoundscontained in SHLwere determined in the ratsserum afterbeing administrated with SHL for10min.Baicalin,luteolin,wogonoside and a unknown compound were determined in the serum after being administrated with SHL for 12 h.[Conclusion]The seven compounds of SHL maybe the main active compounds and the elemental pharmacodynamic compounds of SHL,Baicalin,luteolin,and wogonoside had an importanteffect inmaintaining the curative effectofSHL.

        Shuanghuanglian Powder-Injection;elementalpharmacodynamic compound;HPLC fingerprint;serum pharmacochemistry

        R284.2

        A

        1672-1519(2010)02-0160-03

        國家科技部中醫(yī)藥行業(yè)資助項目(200707011)。

        郭 潔(1982-),女,2009級博士研究生,主要研究方向為妊娠期應用中藥的安全性研究。

        宋殿榮。

        2009-10-09)

        猜你喜歡
        雙黃連草素凍干粉
        還原真實的雙黃連
        不一樣的“雙黃連”
        凍干粉護膚,效果真的很好嗎
        木犀草素通過上調microRNA-34a-5p誘導肺癌細胞株H460凋亡的研究
        響應面法優(yōu)化鳳尾草中木犀草素的酶法提取工藝
        中成藥(2017年12期)2018-01-19 02:06:56
        雙黃連系列制劑制備工藝再評價
        中成藥(2017年5期)2017-06-13 13:01:12
        《豬瘟高免血清凍干粉的初步研究》圖版
        木犀草素抑制酪氨酸酶活性的分子機制
        無敵上上簽
        意林(2014年10期)2014-07-28 18:17:07
        注射用復方葒草凍干粉針與常用輸液配伍穩(wěn)定性研究
        中成藥(2014年11期)2014-02-28 22:29:51
        亚洲av中文无码乱人伦下载| 国产麻豆剧传媒精品国产av蜜桃| 最新日本久久中文字幕| 国产精品成人观看视频国产奇米| 55夜色66夜色国产精品视频| 国产在线91观看免费观看| 精品国产麻豆一区二区三区| 草逼短视频免费看m3u8| 99久久婷婷国产综合精品电影| 99热精品国产三级在线观看| 亚洲视一区二区三区四区| 亚洲天堂成人av在线观看| 爆爽久久久一区二区又大又黄又嫩| 亚洲高清无码第一| 91精品啪在线观看国产色| 欧美黑人巨大videos精品| 亚洲男人第一无码av网站| 国产一区二区精品久久凹凸| av中文字幕性女高清在线| 熟女无套高潮内谢吼叫免费| 女人夜夜春高潮爽a∨片传媒 | 色婷婷综合久久久久中文| 国产精品美女AV免费观看| 日本av一区二区在线| 欧美亚洲日本国产综合在线美利坚| 国产午夜无码视频免费网站| 青青草原亚洲在线视频| 最新中文字幕一区二区| 曝光无码有码视频专区| 无码国产日韩精品一区二区| 一二三四在线观看视频韩国| 人妻熟女一区二区三区app下载| 一本大道东京热无码中字 | 99国产精品视频无码免费 | 亚洲一区二区三区偷拍厕所 | 国产一在线精品一区在线观看| 国产精品亚洲精品日产久久久| 女女同恋一区二区在线观看| 激情综合色五月丁香六月亚洲| 在线观看精品视频一区二区三区| 国产精品国产自产拍高清|