摘 要 小批量制備質(zhì)譜純鯊魚(yú)肝鐵蛋白(Liver Ferritin of Sphyrna zygaena, SZLF)。在弱酸介質(zhì)(pH 1.0)中,天然電泳結(jié)果顯示,SZLF蛋白質(zhì)亞基20 min后開(kāi)始解離。選用透射電子顯微鏡跟蹤SZLF亞基解離與重組裝全過(guò)程和蛋白殼與鐵核尺寸變化, 發(fā)現(xiàn)SZLF在亞基酸解離過(guò)程中,隨著pH值的降低,鐵核和蛋白殼的尺寸呈現(xiàn)相同的變化趨勢(shì),這種變化趨勢(shì)可能與鐵核內(nèi)層鐵的釋放和蛋白殼的解離與去折疊有關(guān)。SZLF蛋白殼的重組裝過(guò)程則是一個(gè)快速過(guò)程,并且是由松散熔球態(tài)向緊密態(tài)轉(zhuǎn)變的過(guò)程。SZLF由單類(lèi)型亞基組成,而馬脾鐵蛋白(Horse Spleen Ferritin , HSF)由H和L兩種亞基類(lèi)型組成。在基質(zhì)pH 3.0條件和激光輔助下,混合HSF和SZLF仍然可釋放各自的亞基且形成準(zhǔn)亞基離子,供基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜分析,說(shuō)明此時(shí)SZLF的亞基間相互作用強(qiáng)度減弱但并沒(méi)有去折疊。TEM技術(shù)在鐵蛋白解離和重組裝過(guò)程中的應(yīng)用,為進(jìn)一步研究鐵蛋白納米包裝的過(guò)程和機(jī)理提供新穎的、可行的和更加直觀(guān)的研究手段。
關(guān)鍵詞 鐵蛋白; 電子顯微鏡; 亞基解離與組裝; 基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜