摘 要 建立了一個超聲功率-超聲時間的安全區(qū)域，在此范圍內進行超聲波輔助酶解時，能避免超聲波隨機斷裂蛋白質；在此安全區(qū)域內采用響應面法獲得最佳超聲功率和超聲時間。建立了超聲波輔助Urea-Free試劑結合熱變性快速酶解蛋白質的方法，將蛋白質依次進行10 min超聲波浴輔助Urea-Free還原烷基化反應、90 ℃熱變性15 min， 超聲波輔助胰蛋白酶酶解15 s。應用此快速酶解方法鑒定3種典型標準蛋白質(牛血清白蛋白、細胞色素Ｃ和肌紅蛋白)，在25 min內達到與傳統(tǒng)整夜酶解方法相同的鑒定結果，并獲得更高的序列覆蓋率。

關鍵詞 超聲波輔助； 熱變性； 蛋白質； 酶解； 質譜