曾 選 ,習永生,甘雪華 ,丁洪慧,陸 瑤
(1、江西省婦幼保健院檢驗科,江西 南昌 330006;2、江西省腫瘤醫(yī)院放射科,江西 南昌 330029)
胎兒的紅細胞最主要含有血紅蛋白F(HbF)(>99%),而成人紅細胞中大部分為血紅蛋白A(HbA),血紅蛋白F含量<1%。由于血紅蛋白F抗堿和抗酸能力很強,應用洗脫和染色方法可使HbF呈鮮紅色,含其它血紅蛋白的紅細胞只留下淡影的細胞膜,利用此方法不僅能區(qū)別含HbF的紅細胞,而且能定量分析含HbF的紅細胞比例,為準確診斷妊娠期孕婦陰道出血是否有胎兒血,供臨床醫(yī)生采取及時正確治療措施提供診斷依據(jù)。現(xiàn)把實驗結(jié)果報告如下。
1.1 對象 2008年3月份到2010年6月份由于妊娠期陰道出血到我院就診的門診或住院孕婦113例,懷孕21周至臨產(chǎn)。
1.2 試劑和儀器 80%乙醇、酸性緩沖液、蘇木素染色液、伊紅染液。OLYMPUS CX21型光學顯微鏡。
1.3 方法 嚴格按照全國臨床檢驗操作規(guī)程第三版要求操作[1]。無菌采集孕婦陰道流出血,用枸櫞酸鈉抗凝,制備血涂片,自然干燥1h,用80%乙醇固定5分鐘,水洗干燥后進行酸洗脫和染色。干燥后在油鏡下觀察和計數(shù),含有HbF的紅細胞呈鮮紅色為陽性,只留下淡影的細胞膜為陰性。
通過檢測113例妊娠期陰道出血的孕婦陰道血HbF紅細胞,4例HbF紅細胞比例>17%,說明胎兒在宮內(nèi)有出血現(xiàn)象,其中1例孕周33+4周的孕婦其陰道血含HbF紅細胞比例達到71%,送院前陰道已出血,胎心音異常,2小時后胎心消失,胎兒因失血而很快死在宮內(nèi),經(jīng)B超證實胎兒已死亡,失去搶救胎兒的機會。另外3例診斷及時,孕周大于35周,立即終止妊娠,行剖宮產(chǎn)手術(shù),新生兒及時搶救,得以存活。其余109例HbF紅細胞比例<6%,結(jié)合臨床指針、胎心監(jiān)護、B超等檢查診斷陰道出血不是胎兒血。
正常胎兒血的紅細胞特點為整個胚胎發(fā)育過程中,胎兒造血系統(tǒng)一直處于活躍狀態(tài)。隨胎齡的增加,胎血中的血紅蛋白含量逐漸升高。胎兒第一代紅細胞的形成主要在卵黃囊的血島[2],人胚卵黃囊造血功能持續(xù)8~12周;妊娠第4周肝臟開始造血。紅細胞發(fā)育過程中形態(tài)變化由大到小。正常人因不同發(fā)育時期,紅細胞中的Hb類型有所不同,由胚胎型Hb向胎兒型血紅蛋白,最后向成人型Hb轉(zhuǎn)換[3]。直到胎兒出生時HbF仍為臍血Hb的主要成分。胎兒的紅細胞最主要成份血紅蛋白F(HbF)含量>99%,而成人紅細胞中大部分為血紅蛋白A(HbA),血紅蛋白F含量<1%孕婦自身患有再生障礙性貧血、溶血性貧血、β珠蛋白生成障礙性貧血等血液病以及在懷孕過程中出現(xiàn)的胎兒-母體輸血均會引起母體外周血出現(xiàn)少量的HbF紅細胞,在陰道出血時即使沒有胎兒血經(jīng)洗脫和染色后乃有少量陽性紅細胞,造成難以診斷,筆者采取在取陰道血的同時采集母體外周血一份一同做HbF檢測,如果陰道血的HbF紅細胞含量大于外周血的HbF紅細胞,即可診斷有胎兒血;陰道血的HbF紅細胞含量與母體外周血持平,結(jié)合臨床指針、胎心監(jiān)護、B超等檢查可排除胎兒宮內(nèi)失血。
妊娠期陰道出血是否含有胎兒血,胎兒血紅蛋白是診斷的決定性因素[4],對于臨床處理病情起到十分關鍵的作用。筆者通過2年多的時間對113例陰道出血的孕婦進行HbF紅細胞的檢測,其結(jié)果與臨床診斷和病人病情一致。妊娠期陰道出血時檢測出含胎兒血 (陰道血HbF紅細胞含量高于外周血),說明胎兒在宮內(nèi)有出血現(xiàn)象,結(jié)合B超診斷,如果提示胎兒還活著,孕周大于35周,立即行剖宮產(chǎn)以結(jié)束妊娠,挽救孕婦和胎兒的生命為第一。經(jīng)檢測陰道血為母體血,不含胎兒血,妊娠在35周前,胎兒未達到成熟,陰道出血量不多,情況穩(wěn)定的孕婦可采取期待療法進行治療。
HbF的洗脫和染色方法以及抗堿試驗,可快速確定母體血中是否含過多胎兒紅細胞,有助于對分娩前胎兒晚期出血做出迅速判斷[5],為鑒別妊娠期陰道出血時是否含有胎兒血提供診斷依據(jù)。該方法操作簡便、檢測快速、結(jié)果準確、方便開展,對臨床幫助很大,為臨床醫(yī)生采取準確、果斷治療措施提供依據(jù),降低胎兒和孕產(chǎn)婦死亡率意義非常大。
[1]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版,南京:東南大學出版社,2006:184-185.
[2]戴旻笙,傅慶詔,陳菊芳,等.血紅蛋白F及紅細胞直徑測定及意義[J].中華婦產(chǎn)科雜志,2000,35(4):234-235.
[3]沈柏均主編.人類臍血:基礎與臨床[M].天津:天津科學出版社,1995:16.
[4]段如麟,陳解民,徐增祥.婦產(chǎn)科急癥學[M].第1版,北京:人民軍醫(yī)出版社,1998:45.
[5]程 偉.人胎兒血紅蛋白的檢測及其臨床意義[J].中國實驗診斷學,2009,13(10):1474-1475.