（江蘇畜牧獸醫(yī)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇泰州 225300）

卵黃免疫球蛋白(卵黃抗體)制劑，是指從免疫禽蛋中提取出的針對特定抗原的免疫球蛋白，可抑制致病性大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌等腸道致病菌的生長。雞蛋中富含IgY，利用超免疫雞可將特異性抗體穩(wěn)定持續(xù)地傳遞至卵黃中的特性，采用生物技術(shù)從產(chǎn)蛋雞卵黃中制備特異性多克隆抗體，具有成本低，產(chǎn)量高的特點。IgY廣泛用于動物保健和疾病治療。

一、lgY的抗病作用機理

IgY可與特異性菌毛抗原結(jié)合減少或阻斷特異性菌毛與宿主腸上皮的結(jié)合，使產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(ETEC)不能在小腸定植，不能積累大量的腸毒素，從而防止腹瀉的發(fā)生；抗特定病原菌的IgY可直接粘附于病原菌的細胞壁上，改變病原菌細胞的完整性，直接抑制病原菌的生長；一部分抗特異病原的IgY在腸道內(nèi)被消化酶降解為結(jié)合片段(Binding fragment)，這些片段含有抗體的末端高度可變的小肽，即Fab部分。這些小肽很容易被腸道吸收，進入血液后能與特定病原菌的粘附因子相結(jié)合，使病原菌不能粘附易感細胞而失去致病性，從而可對非腸道病原菌發(fā)揮抑菌作用。這些Fab部分還能與宿主血液中球蛋白末端相結(jié)合，使其免遭機體破壞。

IgY可以中和仔豬大腸桿菌毒素，從而起保護作用(Yokoyama等，1992)。體外試驗表明，經(jīng)噴霧干燥的含抗K88菌毛抗體的蛋黃粉能阻礙K88在豬小腸粘膜的粘附(Jin等，1994)。IgY具有被動免疫效果，是由于它能像初乳中的抗體一樣通過小腸上皮進入機體，同時IgY和抗原的親和力遠比哺乳動物抗體和同種抗原的親和力強(Yokoyama等，1993),雞抗豬大腸桿菌IgY能明顯抑制大腸桿菌在豬腸粘膜上的粘附作用，抑制大腸桿菌在體內(nèi)的生長(Yokoyama等，1992)。

二、IgY作為新型飼料添加劑的應(yīng)用

宋迎春對豬的研究表明，飼喂含抗尿素酶IgY顯著提高了飼料轉(zhuǎn)換率，日增重也得到了改善。Yokoyama等證明，將抗產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(ETEC)的IgY飼喂新生的小豬和小牛，均可防止ETEC引起的腹瀉，起到被動保護作用。Yokoyama等(1992)研究證實，口服抗致病性大腸桿菌K88、K99、987P的IgY可防止新生仔豬發(fā)生腹瀉。羅函祿（1997）研究表明，高免IgY添加于飼糧中，防治仔豬輪狀病毒腹瀉取得了滿意的效果。

三、IgY預(yù)防仔豬腹瀉的的免疫學(xué)效用

徐福洲等(2002)用K88、K99、987P標準菌株制備單價菌體油乳劑滅活苗，免疫產(chǎn)蛋雞，將提純后的IgY對攻毒的新生仔豬口服治療，結(jié)果顯示治療組未出現(xiàn)死亡病例，而對照組仔豬死亡率為33%～67%。李國 平 等 (2002)用 K88、K99、987p和F41標準菌株制成多價菌體油乳劑滅活苗，對蛋雞免疫后收集高免卵黃，提純后精制成抗大腸桿菌特異性高免IgY并應(yīng)用于臨床。結(jié)果表明:每頭新生仔豬口服2～4 ml該IgY可有效預(yù)防仔豬大腸桿菌性腹瀉，且安全性很好。高云英等（2003）用K88、K99、987P標準菌株和地方分離菌株制成多價菌體油乳劑滅活苗，免疫商品蛋雞，收集高免蛋制備多價IgY。經(jīng)預(yù)防、攻毒試驗及臨床治療效果觀察，對新生仔豬免疫保護率可達90%以上，3日齡仔豬攻毒保護率達98%以上，3～11日齡仔豬臨床治愈率達95%以上。

李學(xué)伍等（2000）用K88、K99、987P和F41菌毛蛋白苗免疫產(chǎn)蛋雞，將高免卵黃液去脂噴霧干燥后對新生仔豬進行口服治療，結(jié)果表明多價IgY粉可使攻毒仔豬獲得較好的保護，保護期持續(xù)10～14 d，對自然發(fā)病的仔豬治愈率高達97.7%。Yokoyama等（1992）將提純的ETEC宿主特異性菌毛K88、K99、987P制成單價菌毛蛋白苗，免疫蛋雞獲得IgY粉末，ELISA檢測結(jié)果表明，抗K88、K99、987P的 IgY能夠特異性地與相應(yīng)的菌毛抗原作用，用IgY對不同ETEC菌株攻毒的新生仔豬進行口服治療，治療組仔豬服用效價為625和2 500的抗體后全部存活，而對照組仔豬死亡率超過80%。Jin等（1999）將一種K88+ETEC地方株培養(yǎng)后，提取和純化菌毛，與佐劑充分乳化免疫蛋雞，收集高免卵黃并噴霧干燥制成IgY粉，體外試驗表明:該IgY粉能阻礙K88+粘附到豬小腸黏膜上，而且能迅速與該菌株結(jié)合，15 min即可使仔豬獲得最大程度的免疫保護。Marquardt等(1999)在此基礎(chǔ)上，采用同一抗原免疫母雞后獲得抗K88菌毛的IgY，用于治療K88+攻毒的新生(3日齡)和斷奶后(21日齡)仔豬，結(jié)果表明:新生仔豬用IgY治療后24 h內(nèi)均被治愈，而用安慰劑(不含K88抗體的卵黃粉)治療的仔豬繼續(xù)腹瀉死亡率達62.5%；斷奶仔豬飼喂IgY后僅出現(xiàn)短暫腹瀉，未出現(xiàn)死亡病例且體重明顯增加，而對照組出現(xiàn)嚴重腹瀉和脫水癥狀，且48 h內(nèi)即有仔豬死亡。在商業(yè)性豬場的飼糧中添加抗K88、K99菌毛的IgY，能降低早期斷奶(14～18日齡)仔豬的腹瀉發(fā)生率。

四、IgY對仔豬腹瀉的治療效用

IgY與母豬初乳中的抗體具有類似的功能，且與菌毛抗原的親和力遠遠超過母乳和高免血清中抗體與抗原的親和力，對控制腸道疾病更有利。由于仔豬消化系統(tǒng)尚未發(fā)育完全，口服的IgY能夠很容易透過新生仔豬的腸壁，且在仔豬整個消化道內(nèi)均能保持活性，如果吸收初乳的同時口服特異性IgY，被動保護作用將顯著增強。

肖馳等(1998)利用IgY預(yù)防仔豬大腸桿菌性腹瀉，具有很好的效果，對仔豬黃痢的治愈率高于慶大霉素、土霉素和痢特靈。李學(xué)伍等(2000)將抗仔豬大腸桿菌IgY制成干粉，對發(fā)病仔豬的治愈率最高可達97.7%，比藥物治療的治愈率高21.2%。李國平等(1998)對已發(fā)病的黃、白痢仔豬肌注高免卵黃液4 ml，連續(xù)2次，發(fā)現(xiàn)有明顯的治療作用，且未發(fā)現(xiàn)毒副作用。

Yokoyama等(1992)研究結(jié)果表明，給新生仔豬口服1012CFU/ml的K88, K99，和 1010CFU/ml的 987P,然后口服4 ml效價分別為1:156,1:625和 1:2500的 K88、 K99和987PIgY液。在IgY效價高于1:625以上時，能有效防治仔豬腹瀉，降低死亡率，改善糞便的粘稠度。

Imberechts等給斷奶仔豬飼喂抗F18的雞IgY，每只豬每天給予30 g凍干的全雞蛋，在開始后的16 h所有的仔豬給飼大腸桿菌。飼喂雞IgY蛋仔豬大腸桿菌的排出減少，腹瀉率下降，體重增加。李國平等(2002)試驗證明，初生仔豬每頭注射或口服2～4 ml精制雞抗豬大腸桿菌IgY可有效預(yù)防仔豬大腸桿菌性腹瀉，且在出生36 h內(nèi)IgY不被分解，口服和注射效果無差異。

陳魯勇等選用21日齡的早期斷奶仔豬160頭，每組80頭，分別飼喂基礎(chǔ)日糧和基礎(chǔ)日糧加0.1%卵黃抗體粉。結(jié)果表明：21～35日齡階段，試驗組比對照組平均日增重高15 g（P<0.05），采食量高 24 g/d（差異不顯著），料重比下降，腹瀉率下降 9.9%（p<0.05）；35～ 70日 齡階段，試驗組比對照組平均日增重高65 g（差異不顯著），采食量下降15 g/d，料重比低，腹瀉率下降1.5%（p<0.01）。張守全等、王建明等的研究也得出相似的結(jié)論，證實了IgY防治仔豬細菌性腹瀉效果確切。

宋維平等用豬流行性腹瀉病毒對仔豬進行攻毒實驗，對腹瀉仔豬口服IgY液治療，研究結(jié)果也表明治療組腹瀉癥狀明顯減輕，多數(shù)在5 d后恢復(fù)正常，死亡率僅是16.7%；而對照組呈水樣腹瀉，最后脫水衰竭而死，死亡率為100%，二者的極顯著差異表明，IgY對病毒性腹瀉同樣具有良好療效。

總之，隨著對卵黃免疫球蛋白研究的不斷深入，這種新型生物活性物質(zhì)由于能夠預(yù)防和治療多種動物細菌性和病毒性疾病，并具有促生長作用，而且無任何毒副作用，在很大程度上可替代抗生素和化學(xué)合成藥物，在未來的動物生產(chǎn)和獸醫(yī)診療中必將有著更廣闊的應(yīng)用前景。

（略）