陳德經(jīng)
(陜西理工學(xué)院 陜西省資源生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,陜西 漢中 723001)
大鯢黏液、皮膚及肉中氨基酸分析
陳德經(jīng)
(陜西理工學(xué)院 陜西省資源生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,陜西 漢中 723001)
通過(guò)對(duì)大鯢黏液、皮膚及肉中的氨基酸分析,為其開發(fā)利用提供依據(jù)。采用氨基酸自動(dòng)分析儀分析,結(jié)果表明:大鯢黏液及皮膚、肉中氨基酸含量分別為77.30%、70.96%、70.76%,氨基酸種類相同,但不同種類的含量有較大差異。
大鯢;皮膚;黏液;肉;氨基酸分析
中國(guó)大鯢(Andrias davidianus Blanchard)俗名“蛙蛙魚”,屬于兩棲綱、有尾目、隱鰓鯢科,為國(guó)家二級(jí)保護(hù)動(dòng)物[1]。大鯢為肉食動(dòng)物,其肉細(xì)嫩,味道鮮美,含有優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)、豐富的氨基酸和微量元素[2-3]?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為,經(jīng)常食用可以聰明益智、延緩衰老、提高造血和免疫功能,對(duì)防止心腦血管系統(tǒng)、惡性貧血和惡性腫瘤有很好的作用[4]。鯢皮粉拌桐油可以治療燒傷、燙傷,尤其是對(duì)面部的燒燙傷的治療不留疤痕[5]。大鯢皮膚黏液細(xì)胞中釋放黏糖蛋白后,與水結(jié)合即成黏液,覆蓋在上皮游離面,形成了一道天然的防護(hù)屏障[6]。黏液主要成分為黏多糖蛋白和纖維物質(zhì),還有多種激素,及“蛙皮素”,具有較強(qiáng)的抗菌作用,可預(yù)防麻風(fēng)病、老年癡呆和防治癌癥[7];目前,對(duì)大鯢皮膚的黏液、皮膚及肉中氨基酸種類及數(shù)量的關(guān)系研究未見(jiàn)報(bào)道,本研究旨在為其應(yīng)用提供一定依據(jù)。
1.1 材料、試劑與儀器
大鯢(人工養(yǎng)殖子二代) 陜西漢水大鯢開發(fā)有限公司。
鹽酸、氫氧化鈉、檸檬酸鈉、茚三酮(均為分析純);氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)液 美國(guó)Sigma公司;高純氮?dú)?99.99%)。
FA2004N電子天平 上海精密科學(xué)儀器有限公司;1-2LD型真空冷凍干燥機(jī) 德國(guó)Marin Christ公司;DZF-6050型真空干燥箱 上海一恒科技有限公司;L-8900全自動(dòng)氨基酸分析儀 日本日立公司。
1.2 分析測(cè)定
1.2.1 材料取得與干燥
大鯢黏液是從飼養(yǎng)池中每周撈取黏液一次,用無(wú)菌水清洗瀝干、稱質(zhì)量,放入玻璃皿中,冷凍干燥;從延髓處死大鯢(體質(zhì)量520g)一條,剝離皮與肉,分離脂肪組織,分別取皮與肉切碎放入玻璃皿中稱質(zhì)量,進(jìn)行冷凍干燥。冷凍干燥真空度60Pa后,溫度恒定在-58℃,干燥至質(zhì)量恒定,分別稱取黏液、皮和肉的干質(zhì)量,計(jì)算含水量。用粉碎機(jī)分別粉碎裝入干燥瓶中冷藏備用。
1.2.2 材料水解
稱取一定量干燥大鯢黏液、皮膚、肉,分別置入水解管內(nèi),分別用10mL 6mol/L鹽酸,加入新蒸餾的苯酚3滴,冷凍3min,再接到抽真空,然后充入高純氮?dú)猓俪檎婵粘涞獨(dú)?,重?fù)3次,在充氮?dú)鉅顟B(tài)下封口水解管,放在110℃恒溫干燥箱內(nèi),水解22h后,取出冷卻。打開水解管,將水解液過(guò)濾后,用去離子水
次沖洗水解管,將水解液全部轉(zhuǎn)移到50mL容量瓶?jī)?nèi)定容。吸取濾液1mL于5mL容量瓶?jī)?nèi),用真空干燥箱在50℃干燥,殘留物用1mL鹽酸水解,再干燥,反復(fù)兩次,最后蒸干,用1mL pH2.2的檸檬酸緩沖液溶解,供儀器測(cè)定用。
1.2.3 氨基酸自動(dòng)分析檢測(cè)
準(zhǔn)確吸取0.200mL氨基酸標(biāo)準(zhǔn)液,用pH2.2的緩沖液稀釋到5mL,標(biāo)準(zhǔn)稀釋濃度為5.00nmol/50μL,作為上機(jī)測(cè)定用的氨基酸標(biāo)準(zhǔn),使用氨基酸自動(dòng)分析儀以外標(biāo)法測(cè)定試樣測(cè)定液的氨基酸含量。式中:X為氨基酸含量/%;1/50為折算成每毫升試樣測(cè)定的氨基酸含量/(μmol/L);109為將試樣含量由納克折算成克的系數(shù);5為標(biāo)準(zhǔn)液氨基酸濃度/(nmol/50μL)。
2.1 大鯢黏液、皮膚和肉的比例
表1 大鯢黏液、皮膚和肉的比例Table 1 Proportions and moisture content of mucus, skin and flesh in giant salamander
大鯢各部分的含量及含水量見(jiàn)表1。由表1可以看出,大鯢皮膚在鮮大鯢中占了近20%,肉60%,內(nèi)臟、脂肪、骨骼約占20%。黏液每次收集僅占質(zhì)量的0.012%,黏液的含水量96.65%,肉的含水量也較高,皮膚含水量較低。
2.2 氨基酸含量測(cè)定結(jié)果
大鯢黏液、皮膚及肉的測(cè)試液分析后,計(jì)算得氨基酸含量見(jiàn)表2。
由表2可知,在大鯢黏液、皮膚和肌肉中均檢測(cè)出17種氨基酸,氨基酸含量均在70%以上,黏液中有較高含量的氨基酸是大鯢不斷分泌黏液形成黏液保護(hù)系統(tǒng)的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。這些氨基酸中谷氨酸、脯氨酸,甘氨酸的含量最高,其中谷氨酸在黏液、皮膚和肌肉含量均高,脯氨酸、甘氨酸在皮膚和黏液含量遠(yuǎn)高于肌肉,與皮膚、黏液含有糖蛋白和膠原蛋白有關(guān)。大鯢的氨基酸中人體必需的8種氨基酸,除色氨酸因水解未檢到,其余7種氨基酸,賴氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、纈氨酸在黏液和肉含量分別占總氨基酸34.49%、35.92%,高于一般動(dòng)物肉中的含量[8]。
表2 大鯢皮膚黏液、皮膚和大鯢肉氨基酸含量(干質(zhì)量)Table 2 Amino acid composition of skin mucus, skin and flesh of giant salamander
大鯢黏液、皮膚、肉中氨基酸含量高達(dá)70%以上,共有17種,含量十分豐富。黏液中氨基酸含量比皮膚、肌肉還高,是大鯢分泌黏液形成自身保護(hù)系統(tǒng),具有抗菌、治療疾病和燙傷作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。大鯢黏液和肌肉中必需氨基酸,除色氨酸因水解未檢到,其余7種必需氨基酸含量分別達(dá)到34.49%、31.89%。因此,大鯢皮膚、肉具較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,大鯢黏液具有更重要的藥用價(jià)值,人工養(yǎng)殖的大鯢可以科學(xué)地開發(fā)利用。
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Analysis of Amino Acids in Mucus, Skin and Flesh of Giant Salamander
CHEN De-jing
(Bio-resource Key Laboratory of Shaanxi Province, Shaanxi University of Technology, Hanzhong 723001, China)
In order to provide theoretical
for the exploitation of giant salamander, amino acid analysis of the mucus, skin and flesh of giant salamander was performed using an automatic amino acid analyzer. Total amino acid contents in the mucus, skin and flesh of giant salamander were 77.30%, 70.96% and 70.76%, respectively. Although the same types of amino acids were found in the three materials, the contents of each amino acid were different.
giant salamander;skin;mucus;flesh;amino acid analysis
Q517
A
1002-6630(2010)18-0375-02
2010-06-25
陜西省社會(huì)發(fā)展項(xiàng)目(2008k16-07)
陳德經(jīng)(1961—),男,副教授,碩士,研究方向?yàn)槭称飞锛夹g(shù)。E-mail:cdjslg@126.com