張立杰 彭軍

內(nèi)皮素-1與腫瘤壞死因子在分泌性中耳炎中的表達(dá)研究

張立杰 彭軍

目的 探討內(nèi)皮素-1(ET-1)、腫瘤壞死因子(TNF-α)在分泌性中耳炎(OME)中的表達(dá)及相互關(guān)系。方法 檢測63例(76耳)OME患者血漿與中耳積液中ET-1、TNF-α的含量，同時(shí)選擇28例健康人血漿作對照。結(jié)果 OME患者血漿中ET-1、TNF-α的含量高于對照組(P＜0.05)，黏液性積液組ET-1、TNF-α的含量高于漿液性積液組(P＜0.05)，且 ET-1含量與 TNF-α含量呈正相關(guān)(r=0.567，P＜0.05)。結(jié)論 ET-1、TNF-α可能參與分泌性中耳炎的致病過程，是OME發(fā)病過程中重要的致炎因子之一，其含量可能預(yù)示病變的轉(zhuǎn)歸。

腫瘤壞死因子-α;內(nèi)皮素-1;中耳炎，伴滲出液;中耳積液

分泌性中耳炎(otitis media with effusion，OME)是中耳的常見病及多發(fā)病，其發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜。本研究通過觀察分泌性中耳炎(OME)患者不同病變期中耳積液中內(nèi)皮素(ET-1)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的變化，來探討致炎因子在OME發(fā)病中的作用，從而為OME的預(yù)防和治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本文選擇2006年3月至2007年3月于我院就治的OME患者63例，男36例，女27例;年齡18～55歲，平均年齡41.7歲;單耳50例，雙耳13例。鼓膜穿刺抽出液均＞0.1 ml，黏液性積液29耳22例(黏液組)，漿液性積液47耳4

例(漿液組)。OME患者的診斷均符合:均有聽力下降和耳悶塞感;聽力損失氣骨導(dǎo)差距15～32 dB;中耳分析均呈“B”型鼓室圖，排除研究前2個(gè)月使用腎上腺皮質(zhì)激素、抗組胺及抗生素藥物，不伴變應(yīng)性鼻炎、支氣管哮喘及嚴(yán)重全身疾病。另選擇同期門診體檢健康28例作為對照組，其性別比、年齡與病變組患者有可比性。

1.2 標(biāo)本收集、制備和檢測方法 清晨抽取3組受檢者空腹肘靜脈血3 ml，置于含肝素抗凝劑的離心管中，搖勻、離心、分離血清，-20℃低溫保存?zhèn)錂z。中耳積液標(biāo)本在嚴(yán)格無菌下鼓膜穿刺抽出積液，均行封口、標(biāo)記，存放-30℃凍存待測。采用ELISA、法國DIACLONE公司提供的試劑盒檢測血清TNF-α;放射免疫法、福建邁新公司提供的試劑盒檢測ET-1。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用方差分析和 q檢驗(yàn)，相關(guān)性檢驗(yàn)采用Spearman分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組血漿ET-1和TNF-α比較 漿液組和黏液組血漿中ET-1、TNF-α含量均高于對照組(P ＜0.05)。見表1。

表1 3組血漿TNF-a和ET-1含量比較±s

表1 3組血漿TNF-a和ET-1含量比較±s

注:與對照組比較，*P＜0.05

組別 ET-1(ng/L) TNF-α(ng/ml)漿液組(n=41) 40±5* 0.55±0.13*粘液組(n=22) 40±7* 0.56±0.20*對照組(n=28) 22±7 0.24±0.11

2.2 2組中耳積液中ET-1和TNF-α比較 黏液組中耳積液ET-1和TNA-α含量高于漿液組(P＜0.01)。見表2。黏液組

ET-1與TNF-α含量呈正相關(guān)(r=0.567，P ＜0.05)。

表2 2組中耳積液中ET-1和TNF-α含量比較±s

表2 2組中耳積液中ET-1和TNF-α含量比較±s

注:與漿液組比較，*P＜0.01

組別 耳數(shù) ET-1(ng/L) TNF-α(ng/ml)漿液組(n=41) 47 72±8 0.79±0.13粘液組(n=22) 29 94±11* 1.19±0.20*

3 討論

內(nèi)皮素是目前已知的最強(qiáng)的縮血管物質(zhì)之一，包括三種異構(gòu)肽。其中ET-1由內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，ET-1除表達(dá)于非血管細(xì)胞外，是惟一存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞的內(nèi)皮素［1］。而引起ET-1分泌的確切機(jī)制尚不明確，但缺氧、腫瘤壞死因子(TNF)、白介素-1(IL-1)等［2］因素可促進(jìn)ET-1的釋放。有報(bào)道其與呼吸系統(tǒng)的變態(tài)反應(yīng)密切相關(guān)。其參與OME的作用機(jī)制鮮有報(bào)道［3］。

Demaria等［4］在對中耳積液的細(xì)胞學(xué)分析中發(fā)現(xiàn)其內(nèi)部存在大量的單核巨噬細(xì)胞，可能是中耳局部產(chǎn)生TNF-α的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)，另一個(gè)可能的來源是巨細(xì)胞，這種細(xì)胞在OME患者的中耳黏膜中數(shù)量增加。研究表明，TNF-α的生物學(xué)作用主要通過兩種細(xì)胞表面受體介導(dǎo)，即TNFR1及TNFR2，前者起主要作用。TNF的細(xì)胞毒性作用可能是通過這兩種受體由多種信號途徑介導(dǎo)的，包括蛋白激酶和磷脂酶A2途徑。通過氧自由基產(chǎn)生引起DNA斷裂，導(dǎo)致靶細(xì)胞凋亡［5］。在體內(nèi)，低水平的TNF-α在組織修復(fù)、炎癥應(yīng)答中起作用，對機(jī)體有利;高水平TNF-α的慢性刺激和釋放可引起組織免疫病理及炎性介質(zhì)的瀑布樣連鎖反應(yīng)，使血管通透性增加、局部黏膜水腫，從而導(dǎo)致中耳積液形成。而黏液性中耳積液中高濃度的TNF可能是分泌性中耳炎經(jīng)久不愈的一個(gè)因素。本文研究結(jié)果與國外文獻(xiàn)報(bào)道大致相同［6-8］。

本研究中，分泌性中耳炎患者的血漿中ET-1和TNF-α含量均高于健康人;同時(shí)黏液性中耳積液中ET-1和TNF-a均高于漿液性中耳炎，且ET-1與TNF-α呈正相關(guān)(r=0.567，P ＜0.05)。由此推測其可能的作用機(jī)制為:(1)中耳內(nèi)存在ET受體，在缺氧狀態(tài)下及腫瘤壞死因子的作用下ET與效應(yīng)細(xì)胞上的ET受體結(jié)合，激活磷脂酶A2產(chǎn)生花生四烯酸，刺激內(nèi)皮細(xì)胞前ET-源的mRNA基因表達(dá)，促進(jìn)ET-1的釋放。(2)強(qiáng)烈的縮血管作用又抑制了中耳黏膜對積液的再吸收，從而致分泌物增多。

綜上所述，ET-1及TNF-α作為炎癥介質(zhì)參與了中耳炎的發(fā)生，并是OME中重要的致炎因子。在分泌性中耳炎發(fā)生時(shí)，中耳黏膜在病毒或細(xì)菌的作用下，大量的單核巨噬細(xì)胞浸潤后釋放TNF-α，致局部黏膜水腫、血管通透性增加，咽鼓管水腫阻塞，中耳積液潴溜;TNF-α及缺氧促進(jìn)ET-1的釋放，致黏膜內(nèi)血管收縮，抑制中耳積液的吸收，形成惡性循環(huán)，進(jìn)一步使黏液分泌增多［9］。因此，ET-1和TNF-α在OME的發(fā)生發(fā)展中具有重要的臨床意義。

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1002-7386(2010)03-0322-02

063001 河北省唐山市人民醫(yī)院耳鼻喉科

2009-08-09)