章小軍 丁曉美

(江蘇省泰興市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 江蘇泰興 225411)

我國乙肝病毒人群攜帶率大約為10%,乙型肝炎是目前流行最廣泛、危害最嚴(yán)重的病毒性肝炎之一。乙肝病毒主要通過血液傳播、性傳播及非消化道傳播。我們應(yīng)用膠體金試紙條對(duì)轄區(qū)內(nèi)人群進(jìn)行篩查,并與ELISA法進(jìn)行比較,分析二者在結(jié)果上有何差異,然后將強(qiáng)陽性的10份標(biāo)本作倍比稀釋分析二者靈敏度的差異。

1 材料與方法

1.1 材料

膠體金試紙條為艾康生物技術(shù)(杭州)有限公司乙肝病毒表面抗原(HBsAg)膠體金法診斷試劑,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑為上海榮盛生物技術(shù)有限公司乙肝病毒表面抗原診斷試劑,所有試劑均在有效期內(nèi)。

1.2 標(biāo)本來源

1.2.1 我院所屬轄區(qū)內(nèi)的各類人群共360例,分別采集末梢血與靜脈血。

1.2.2 取HBsAg強(qiáng)陽性樣品10例,分離血清1m L,再用生理鹽水作倍比稀釋(原液1∶1；1∶2；1∶4至1∶512)[2]。

1.3 方法

2種方法均嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作。

1.4 結(jié)果判斷

(1)膠體金試紙條。試紙條在檢測(cè)線和對(duì)照線位置出現(xiàn)兩條紫紅色線結(jié)果為陽性,僅在對(duì)照線位置出現(xiàn)紫紅色線結(jié)果為陰性,試紙條上對(duì)照線位置未出現(xiàn)紫紅色結(jié)果為無效。(2)ELISA法樣品A值S/CO≥1.0者HBsAg為陽性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

表1結(jié)果采用χ2檢驗(yàn),表2結(jié)果采用配對(duì)t檢驗(yàn)。

表1 人群篩查結(jié)果

2 結(jié)果

2.1 人群篩查結(jié)果(表1)

從表1可看出,360例人群用ELISA法檢測(cè)HBsAg,其中陽性34例,陽性率9.44%;膠體金試紙條檢測(cè)HBsAg,其中陽性32例,陽性率8.89%,2法結(jié)果經(jīng)c2檢驗(yàn),P>0.001,結(jié)果顯示2種方法測(cè)定的HBsAg結(jié)果間差異無顯著性。

2.2 將倍比稀釋后的標(biāo)本分別用ELISA法和膠體金試紙條檢測(cè)HBsAg結(jié)果(表2)

兩法結(jié)果經(jīng)配對(duì)t檢驗(yàn),ELISA法與膠體金試紙條比較靈敏度有顯著差異(P＜0.001)。

3 討論

ELISA法具有較高靈敏度、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),是目前實(shí)驗(yàn)最常用的檢測(cè)HBsAg的方法,但是該方法易受加樣、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間、洗滌徹底性等諸多因素的影響,而且操作步驟較多,實(shí)驗(yàn)過程較長,因此不適用于急診及無償鮮血現(xiàn)場(chǎng)的篩查。膠體金試紙條法具有操作簡(jiǎn)便、快捷、可單份檢測(cè)、便于保存、不需特殊設(shè)備等優(yōu)點(diǎn),在臨床對(duì)HBsAg初篩,急診及無償鮮血現(xiàn)場(chǎng)的篩查方面有實(shí)用價(jià)值,可避免無效采血造成的浪費(fèi),節(jié)省大量的人力、物力[3]。目前,國產(chǎn)的HBsAg膠體金試紙條檢測(cè)靈敏度已達(dá)到1ng/m L。但由于膠體金顯色需要較高濃度的標(biāo)記物,故其靈敏度會(huì)受到一定限制,在HBsAg濃度較低時(shí)易出現(xiàn)假陰性,造成漏檢[1],為避免假陰性的產(chǎn)生最好用ELISA法進(jìn)行HBsAg測(cè)定。對(duì)溶血標(biāo)本尤其是大量溶血標(biāo)本用膠體金試紙條檢測(cè)HBsAg對(duì)檢測(cè)結(jié)果有顯著影響,應(yīng)避免使用。

[1]莊昕,姚宗蓓,楊蘭萍,等.膠體金免疫分析法檢測(cè)HBsAg效果評(píng)估[J].上海預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2004.5.

[2]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:618～621.

[3]邢培清,溫濤,方建華,等.膠體金免疫層析法檢測(cè)HBsAg在無償獻(xiàn)血中的應(yīng)用研究[N].河南醫(yī)學(xué)院研究,2003,(121):17～19.

表2 將倍比稀釋后的標(biāo)本分別用ELISA法和膠體金試紙條檢測(cè)HBsAg結(jié)果