梁 鑫,漆 著,單旭東,黃明孔,余 顏
(成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心 610041)
睪丸活組織直接鏡檢法診斷無精子癥患者的臨床意義
梁 鑫,漆 著,單旭東,黃明孔,余 顏
(成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心 610041)
目的探討睪丸活組織直接鏡檢法診斷無精子癥患者臨床意義。方法對(duì)47例無精子癥患者進(jìn)行睪丸活組織檢查,同一部位取睪丸組織兩份,一份做常規(guī)病理組織學(xué)檢查,另一份將組織撕碎后,立刻在倒置顯微鏡下檢查有無精子及活動(dòng)精子,然后對(duì)兩種方法所得結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果47例中,病理組織學(xué)檢查可見精子生成16例(34.0%),組織撕碎后直接鏡檢發(fā)現(xiàn)精子30例(63.8%)。后者精子檢出率明顯高于前者。結(jié)論與常規(guī)病理組織學(xué)檢查方法相比,直接鏡檢法能更好地反映睪丸內(nèi)有無精子或活動(dòng)精子,且簡單易行。在進(jìn)行病理學(xué)檢查的同時(shí)取睪丸組織直接鏡檢,可為準(zhǔn)備進(jìn)行卵胞漿內(nèi)精子注射(ICSI)治療的患者提供更為確切的依據(jù)。
睪丸活檢;直接鏡檢;無精子癥
當(dāng)前,無精子癥患者的診治依然比較困難,如何進(jìn)行科學(xué)的估計(jì)、摸索一種行之有效的方法指導(dǎo)患者進(jìn)一步檢查治療是擺在廣大男科醫(yī)生面前的一個(gè)難題。本研究主要目的是尋求一種合理的臨床診斷方法來指導(dǎo)患者的進(jìn)一步治療。作者在經(jīng)過倫理委員會(huì)同意及患者的知情同意后,對(duì)無精子癥患者進(jìn)行睪丸活檢,以探討直接鏡檢法診斷無精子癥患者臨床意義。
1.1 一般資料 無精子癥患者47例,年齡21~42歲,平均31.4歲,全部由本院男科醫(yī)生進(jìn)行體檢。納入標(biāo)準(zhǔn):一側(cè)睪丸體積大于或等于8 mL,外周血染色體檢測(cè)正常,2次以上射出精液經(jīng)離心后檢查均未發(fā)現(xiàn)精子者。
1.2 方法 用微創(chuàng)手術(shù)方法在一側(cè)同一部位取睪丸組織兩份,一份做病理檢查,另一份立即鏡檢,如果發(fā)現(xiàn)有活動(dòng)精子,則不再提取另一側(cè)睪丸組織。如果一側(cè)直接鏡檢未發(fā)現(xiàn)活動(dòng)精子,則同法取另一側(cè)睪丸組織檢查。常規(guī)病理檢查的睪丸組織取出后立即置Bouin′s液中固定,送病理科,石蠟包埋組織切片,常規(guī)HE染色,鏡下觀察。直接鏡檢法由本院生殖中心實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),將取出的睪丸組織立即放在 HEPES緩沖的HTF培養(yǎng)液中洗去血細(xì)胞后,將組織置于培養(yǎng)皿中,加少量培養(yǎng)液,用折彎的1 mL空針針頭先將組織割成數(shù)段,然后再進(jìn)行擠壓磨碎,最后在倒置顯微鏡(×200)下檢查有無精子及活動(dòng)精子。兩種檢查先互盲,待出具正式報(bào)告后匯總比較。
47例經(jīng)兩種方法檢測(cè)所得結(jié)果見表1。直接鏡檢法的精子檢出率(63.8%)高于病理檢查法,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=8.344,P=0.004)。
表1 47例兩種方法檢測(cè)結(jié)果比較[n(%)]
我國男性不育的致病原因較多,其中很大一部分是無精子癥所致[1]。盡管超聲檢查可作為一種無創(chuàng)傷性的診斷睪丸疾病的方法[2],但是睪丸活檢仍是無精子癥病因診斷的主要方法之一。睪丸活檢雖為創(chuàng)傷性檢查,但能客觀地反映睪丸的生精狀況,對(duì)男性不育的臨床診斷、病因分析及治療措施的選定具有重要的臨床價(jià)值[3-4]。有研究表明,無精子癥患者血清FSH、LH、T和抑制素B水平及睪丸大小并不能完全預(yù)測(cè)能否從睪丸獲得精子[5]。卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射術(shù)(ICSI)前進(jìn)行睪丸活組織檢查,查出是否有精子或活動(dòng)精子對(duì)于無精子癥的治療很有必要,防止在輔助生殖技術(shù)(ART)治療中男方因取精失敗而造成不育,增加夫婦經(jīng)濟(jì)上的損失和精神上的壓力[6]。
自從1992年ICSI開展以來,睪丸活檢已從一種診斷方法變成了治療手段[7]。本研究結(jié)果顯示,直接鏡檢法可見精子的患者,病理檢查中也發(fā)現(xiàn)精子,但在病理檢查中未發(fā)現(xiàn)精子的一部分患者中,直接鏡檢時(shí)卻可見精子。病理組織學(xué)檢查診斷有精子生成者為34.0%,無精子者為66.0%,而直接鏡檢法分別為63.8%和36.2%,說明直接鏡檢法在反映睪丸內(nèi)有無精子方面更為準(zhǔn)確,可以防止因病理檢查漏診的患者失去獲得血親后代的機(jī)會(huì)。二者差異可能與切片數(shù)量不夠、被觀察組織的大小及范圍等有關(guān)。
在用手術(shù)方法取得睪丸組織行病理學(xué)檢查的同時(shí),做一次直接鏡檢,是十分有意義的,一則可以及時(shí)了解睪丸內(nèi)有無精子或活動(dòng)精子,二則可為以后是否可做ICSI提供重要信息。此外,若只在病理檢查中見到了精子,而未必一定有活動(dòng)精子,需要謹(jǐn)慎施行ICSI治療。作者就見到只在病理檢查顯示有精子而進(jìn)行ICSI的患者中,有2例未能找到足夠的活動(dòng)精子行ICSI,經(jīng)低滲膨脹試驗(yàn)(HOS)[8],確認(rèn)不活動(dòng)精子中有存活精子后行ICSI,其受精率相當(dāng)?shù)?。因此作者認(rèn)為,直接鏡檢法具有簡便、快速、結(jié)果準(zhǔn)確率高、可確認(rèn)活動(dòng)精子等優(yōu)點(diǎn)。
一次睪丸活檢后對(duì)術(shù)側(cè)睪丸局部所帶來的影響需經(jīng)6個(gè)月方能消除。若左右兩側(cè)睪丸同時(shí)活檢,手術(shù)取精行ICSI與前次睪丸活檢的時(shí)間間隔較短,可能對(duì)獲得足夠數(shù)量成熟的活動(dòng)精子帶來困難。因此,作者的改良做法是,如果直接鏡檢法檢查到一側(cè)睪丸組織有活動(dòng)精子,則不取另一側(cè)睪丸組織,這樣可保護(hù)患者另一側(cè)睪丸免受損傷,給ICSI時(shí)手術(shù)取精創(chuàng)造較好的條件。同時(shí),有報(bào)道稱,用新鮮和冷凍的睪丸精子和附睪精子進(jìn)行ICSI的妊娠結(jié)局差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[9]。故此,為防止睪丸活檢后ICSI取精失敗,造成患者精神上的痛苦和經(jīng)濟(jì)上的壓力,也為防止反復(fù)手術(shù)取精給睪丸帶來不必要的損傷,還可將睪丸活檢結(jié)果為有活動(dòng)精子患者的睪丸組織或精子凍存,作為備用。
[1] 湯召兵,陳在賢.78例男性原發(fā)不育的染色體分析[J].重慶醫(yī)學(xué),2004,33(10):1557.
[2] 于潔.彩超在睪丸疾病診斷與鑒別診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J].重慶醫(yī)學(xué),2006,35(9):863.
[3] 佟樹文,宋旭東,唐文君,等.男性不育睪丸活檢的臨床病理分析[J].中國綜合臨床,2006,22(5):456.
[4] 陳懷波.無精子癥患者睪丸活檢的臨床意義——附 70例報(bào)道[J].中國男科學(xué)雜志,1998,12(4):236.
[5] Hauser R,Botchan A,Yogev L,et al.Probability of sperm detection in nonobstructive azoospermic men undergoing testicular sperm extraction procedures unrelated to clinical parameters[J].Arch Androl,2002,48:301.
[6] Seo JT,Ko WJ.Predictive factors of successful testicular sperm recovery in nonobstructive azoospermia atients[J].Int J Androl,2001,24:306.
[7] 趙紫東,薛生娟,王宏,等.睪丸活組織玻璃壓片鏡檢對(duì)無精子癥的診斷價(jià)值[J].中國男科學(xué)雜志,2007,21(2):48.
[8] 世界衛(wèi)生組織.人類精液及精子——宮頸黏液相互作用實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)手冊(cè)[M].4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2001:24.
[9] 歐建平,李陽,莊廣倫.無精癥睪丸活檢病理學(xué)特點(diǎn)及對(duì)男性不育診治的指導(dǎo)意義[J].中華泌尿外科雜志,2004,25(5):354.
R698.2;R361.2
B
1671-8348(2010)09-1118-02
2009-09-09
2009-10-19)
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