改良Hodge試驗檢測肺炎克雷伯菌中的碳青霉烯酶：必須注意假陽性結(jié)果

Modified Hodge test for carbapenemase detection inK.pneumoniae：attention to the false positive results

肺炎克雷伯菌引起的感染為臨床治療帶來了巨大的挑戰(zhàn)。碳青霉烯類抗生素是治療產(chǎn)超廣譜B內(nèi)酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌感染的最重要的抗生素。但目前該菌對碳青霉烯類抗生素的耐藥性呈逐漸上升趨勢,其主要的耐藥機制是產(chǎn)生 Amb ler A類碳青霉烯酶尤其KPC酶或Amb ler B類金屬B內(nèi)酰胺酶如IMP和VIM型酶。此外,細菌產(chǎn)生ESBL和(或)Am pC酶合并外膜孔蛋白缺失亦能導致對碳青霉烯類抗生素耐藥。

作者選擇28株對碳青霉烯類抗生素敏感性降低的肺炎克雷伯菌,進行藥敏試驗、同源性分析、改良H odge試驗和PCR法檢測碳青霉烯酶基因。結(jié)果顯示28株細菌對亞胺培南、美羅培南和厄他培南的敏感率分別為93%、57%和11%。PFGE同源性分析28株細菌可分為7種不同的基因型。厄他培南和美羅培南改良H odge試驗檢測結(jié)果顯示分別有7株或6株為產(chǎn)碳青霉烯酶株。用高接種菌量法則可檢出15株或12株產(chǎn)酶株。所有菌株均不能水解亞胺培南。PCR檢測結(jié)果顯示,所有菌株均未檢測到碳青霉烯酶基因,96%(27株)的菌株產(chǎn)CTX-M型ESBLs,其中2株同時產(chǎn)GES-1型酶。SDS-PAGE電泳結(jié)果顯示,除1株細菌同時表達OmpK35和OmpK36 2種外膜孔蛋白外,其余菌株均缺失至少1種外膜孔蛋白。

以上結(jié)果表明采用改良Hodge試驗檢測細菌產(chǎn)碳青霉烯酶可能產(chǎn)生假陽性結(jié)果,細菌產(chǎn)ESBLs酶(尤其CTX-M型酶)同時伴有外膜孔蛋白缺失常可導致細菌對碳青霉烯類抗生素敏感性降低,這一點在產(chǎn)ESBLs菌高發(fā)地區(qū)應(yīng)引起注意。

[1]Carvalhaes CG,Picao RC,Nicoletti AG,et al.Cloverleaf test(modified H odge test)for detecting carbapenemase production inKlebsiellapneumoniae:be aw areof false positive results.JAn t-i m icrob Chemother,2010,65(2):249-251.

[2]Girlich D,Poirel L,Nordm ann P.Do CTX-M B-lactamases hydroly se ertapenem?JAntim icrob Chemother,2008,62(5):1155-1156.

胡付品摘譯 朱德妹審校

2010-04-29

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