胡國(guó)海,解成駿,李洪潮

(1.文山州生物資源開(kāi)發(fā)研究中心,云南文山 663000;2.文山學(xué)院生化系,云南文山 663000)

中藥石斛為蘭科 (Orchidaceae)石斛屬 (Dendrobium)多種植物的總稱,全世界已發(fā)現(xiàn)石斛植物約 1 000種,我國(guó)約 76種,其中藥用的石斛屬植物約 39種。在我國(guó),石斛供藥用始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,因其具有補(bǔ)虛、益胃生津、滋陰清熱、清陰明目、抗癌、消炎鎮(zhèn)痛、增強(qiáng)人體的抗病免疫能力等特殊功效,成為我國(guó)珍稀名貴中藥,而被列為上品[1]。目前,在眾多藥用石斛植物中僅鐵皮石斛(D.officinale)、細(xì)莖石斛 (D.moniliforme (L.)Sw)(又稱銅皮石斛)等少數(shù)石斛植物作為原料藥生產(chǎn)[2]。細(xì)莖石斛是一種名貴中草藥,具有清音明目等功能,不僅含有多糖、生物堿、氨基酸、酚類[3],還含有許多人體必需的微量元素,微量元素對(duì)于人體機(jī)理活性的提高,具有很好的調(diào)節(jié)作用。由于石斛極高的藥用價(jià)值,野生的石斛資源已瀕臨滅絕,利用組培技術(shù)快速繁殖種苗,通過(guò)人工種植對(duì)細(xì)莖石斛的開(kāi)發(fā)利用和野生資源保護(hù)具有重要意義,開(kāi)展本研究對(duì)細(xì)莖石斛種植具有一定指導(dǎo)意義。本文對(duì)文山學(xué)院文山州生物資源研究開(kāi)發(fā)中心種植一年的細(xì)莖石斛,用火焰原子吸收光譜法測(cè)定其 9種微量元素含量。

1 實(shí)驗(yàn)原料、試劑及設(shè)備

1.1 樣品來(lái)源及處理

本實(shí)驗(yàn)所用的細(xì)莖石斛為文山州生物資源研究開(kāi)發(fā)中心種植一年的鮮樣。將鮮樣用超純水洗凈,稱量質(zhì)量,記錄。置于恒溫干燥箱內(nèi),設(shè)定溫度為11～120℃,將鮮樣烘干至恒重為止。將干樣用組織搗碎機(jī)搗碎,過(guò) 40目標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)篩,樣品置于干燥器內(nèi)備用。

1.2 儀器及試劑

GGX-6塞曼火焰原子吸收光譜儀;鋅、鐵、錳、銅、鎳、鉻、鎘、鈷、鉛元素空心陰極燈;電子天平;恒溫干燥箱;電爐;馬福爐;組織搗碎機(jī)等。

硝酸為優(yōu)級(jí)純;測(cè)定分析用水均為去離子水;標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液 1 000 mg/L,國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心。

1.3 樣品處理分析方法

準(zhǔn)確稱取兩份質(zhì)量為 2.000 g的細(xì)莖石斛干樣品,用定量濾紙包好,放入坩堝,置于電爐加熱直到炭化完全,移至馬福爐內(nèi),在 550℃下恒溫 6 h,使樣品完全灰化。取出坩堝冷卻后,加入 5 mL 1∶1的 HNO3溶解樣品,反復(fù)洗滌 3次,轉(zhuǎn)移至 100 mL容量瓶中,定容,按同樣的方法制備得到空白樣。[4]

1.4 原子光譜的工作條件

用 GGX-6塞曼火焰原子吸收光譜儀,采用空氣—乙炔火焰測(cè)定,實(shí)驗(yàn)儀器最佳的工作條件,見(jiàn)表1。

2 結(jié)果與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制

配制一系列不同濃度的鋅、鐵、錳、銅、鎳、鉻、鎘、鈷、鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液,按表 1工作最佳條件進(jìn)行測(cè)定并繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線,結(jié)果見(jiàn)表 2。

2.2 精密度實(shí)驗(yàn)

用樣液在不同的時(shí)間重復(fù)測(cè)定 5次,測(cè)得其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差的結(jié)果見(jiàn)表 3。

表1 儀器最佳工作條件

表2 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線線性范圍及相關(guān)系數(shù)

表3 精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果 (n=5)

2.3 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

取硝化后的樣品溶液,對(duì)金屬元素用一次標(biāo)準(zhǔn)加入法來(lái)進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn),結(jié)果見(jiàn)表 4。

表4 各元素回收率

2.4 樣品測(cè)定結(jié)果

按照上面步驟制備好的細(xì)莖石斛樣品,分別用塞曼原子吸收分光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)定,測(cè)得結(jié)果換算成鮮樣見(jiàn)表 5。

表5 換算成鮮樣結(jié)果 (ug/g)

3 討 論

本文用干灰化法處理樣品,實(shí)驗(yàn)對(duì) 9種微量元素測(cè)定的平均相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為 1.14%,加標(biāo)回收率在 101.1%～107.3%之間,結(jié)果表明本方法切實(shí)可行。文山學(xué)院人工種植的細(xì)莖石斛中微量元素含量次序如下:Fe>Mn>Zn>Cu>Ni>Co>Cr>Pb>Cd;其中 Fe、Mn、Zn元素含量較高,有毒元素含量較低,進(jìn)一步說(shuō)明了細(xì)莖石斛的藥用價(jià)值,并對(duì)深入研究細(xì)莖石斛人工種植提供了參考。

[1] 丁亞平,楊道麒,吳慶生.安徽霍山三種石斛總生物堿的測(cè)定及其分布規(guī)律研究 [J].安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1994,(4):503-506.

[2] 沈宗根,呂洪飛,程存歸.3種石斛屬植物和細(xì)葉石仙桃的紅外光譜分析和鑒定[J].西北植物學(xué)報(bào),2008,(1):97-102.

[3] 吳慶生,楊道麒,于力文.中藥霍山石斛的微量元素分析及 TE圖譜鑒定 [J].微量元素與健康研究,1995,(1):31-32.

[4] 李桂華,劉軍深,王玉寶,等.火焰原子吸收法測(cè)定食用仙人掌中微量元素含量[J].光譜學(xué)與光譜分析,2005,(12):2079-2081.