烏蘭巴依爾， 周文婷， 楊永新， 王雪飛， 阿不來(lái)提·阿布力孜， 依巴代提·吐呼提， 艾尼瓦爾·吾買爾*

(1.新疆巴州衛(wèi)生學(xué)校，新疆庫(kù)爾勒841000;2.新疆醫(yī)科大學(xué)，新疆烏魯木齊830054)

榅桲(Cydonia oblanga Miller，COM)在我國(guó)有著悠久歷史，是薔薇科(Rsaceae)榅桲屬(Cydonia)的果樹［1］，是維吾爾醫(yī)應(yīng)用歷史悠久的常用藥材之一。維文名為比葉(Biye)，別名為蠻檀，英文名Quince。據(jù)《新疆維吾爾藥志》及《維吾爾常用藥材學(xué)》記載，榅桲Cydonia oblanga Miller除了降血壓、調(diào)血脂等作用外，還有補(bǔ)血、補(bǔ)腦、補(bǔ)腎、止咳、止瀉、利尿、治胃病、肝病、頭暈、心慌、治療月經(jīng)不調(diào)、心臟病等功效，其溫中解暑、消食除脹，治療中暑吐瀉，消化不良、關(guān)節(jié)疼痛等疾?。?］。

本課題組前期通過(guò)對(duì)榲挬提取物的藥理實(shí)驗(yàn)研究，發(fā)現(xiàn)COM具有強(qiáng)大的抗凝血和纖溶作用。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究榲挬提取物的抗動(dòng)、靜脈血栓作用和對(duì)大鼠血漿中6-酮-前列腺素 F1a(6-keto-PGF1a)，TXB2的影響。

1 儀器、材料、動(dòng)物

1.1 藥品與試劑 榅桲提取物(新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院藥理教研室提供)，阿司匹林(Sigma，No 2000641)，銀杏葉片(天津天士力制藥有限公司，批號(hào)259)，6-keto-PGF1a放免試劑盒(北京普爾偉生物科技有限公司，批號(hào)S 10950216)，TXB2放免試劑盒(北京普爾偉生物科技有限公司，批號(hào) S 10950213)。

1.2 儀器 BL1500電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)，KH-120M型臺(tái)式高速離心機(jī)(上海安亭科技儀器廠)，秒表(上海秒表廠)，分析天平(梅特勒-托利多儀器廠)，SK8210HP超聲儀(上海科導(dǎo)儀器廠)，自動(dòng)放免儀(中國(guó)科大中佳公司)。

1.3 動(dòng)物 Wistar大鼠，♂性，49只，體重300～350 g，清潔級(jí)，均由新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證字號(hào)(SYXK2003-0001)。

2 試驗(yàn)方法

2.1 榅桲水提取物對(duì)大鼠頸動(dòng)脈栓塞的影響［3-5］Wistar大鼠，♂性，49 只，體重300 ～350 g，隨機(jī)分為7個(gè)組:生理鹽水組(假手術(shù)組)，模型組，榅桲提取物小、中、大劑量(20、40、80 mg/kg)組，阿司匹林組(5 mg/kg)和銀杏葉片組(20 mg/kg)，連續(xù)灌胃給藥14 d，在末次給藥1 h后，后腹腔注射3%巴比妥0.5 mL/100 g，將麻醉大鼠，在無(wú)菌條件下，將大鼠仰臥位固定于解剖架上，頸部剪毛，常規(guī)碘酒酒精消毒，鋪巾后沿頸前正中線做長(zhǎng)約3 cm切口，分離其左頸總動(dòng)脈2 cm，其下置小片塑料薄膜(3 cm×1.5 cm)用于保護(hù)血管周圍組織，將血管測(cè)溫儀置于已分離的頸動(dòng)脈遠(yuǎn)心端，記錄其溫度后將吸有40%FeCl3溶液的小濾紙片(1 cm×1 cm)敷于左頸動(dòng)脈上［6-9］。

假手術(shù)組用吸有生理鹽水的小濾紙片敷于左頸動(dòng)脈上。記錄從敷上濾紙片開始頸總動(dòng)脈表面溫度突降所需時(shí)間，即頸總動(dòng)脈血栓形成時(shí)間，即為堵塞時(shí)間(occluson time，OT)。用濾紙吸取殘血，稱血栓重量及計(jì)算血栓抑制率。

表1 榅桲提取物對(duì)FeCl3致大鼠頸動(dòng)脈栓塞形成的影響(±s，n=7)

表1 榅桲提取物對(duì)FeCl3致大鼠頸動(dòng)脈栓塞形成的影響(±s，n=7)

與模型組比較，*P＜0.01。

/%生理鹽水組組別 動(dòng)物數(shù)/只 劑量/(mg/kg) OT/min 血栓重量/mg 抑制率7----模型組 7 - 8.71±1.20 15.15±0.59 -銀杏葉片組 7 20 15.77±4.07* 7.14±1.23* 52.90*阿司匹林組 7 5 19.49±2.52* 6.40±1.53* 57.76*小劑量組 7 20 26.96±3.85* 9.93±1.72* 34.44*中劑量組 7 40 33.28±5.98* 6.96±1.62* 54.04*大劑量組 7 80 40.74±5.80* 5.37.±1.48* 64.52*

2.2 榅桲提取物對(duì)大鼠靜脈栓塞的影響［6-10］Wistar大鼠，♂性，49只，體重300～350 g，動(dòng)物分組，給藥，麻醉方法同2.1項(xiàng)。在無(wú)菌條件下，將大鼠仰臥位固定于架上，腹部剪毛，常規(guī)碘酒酒精消毒，鋪巾后沿腹部正中切開大鼠腹壁，分離下腔靜脈，并于左腎靜脈下方預(yù)置絲線，備結(jié)扎用。結(jié)扎下腔靜脈關(guān)閉好腹腔，結(jié)扎后4 h重新打開腹腔，于結(jié)扎線下方2 cm處夾閉血管，同時(shí)結(jié)扎靜脈側(cè)枝，縱行剖開血管，觀察有無(wú)血栓形成，若血栓形成，用濾紙吸取殘血，稱血栓重量及計(jì)算血栓抑制率。結(jié)果見表2。

表2 榅桲提取物對(duì)大鼠靜脈栓塞的影響(±s，n=7)

表2 榅桲提取物對(duì)大鼠靜脈栓塞的影響(±s，n=7)

與模型組比較，*P＜0.01。

抑制率/%生理鹽水組組別 動(dòng)物數(shù)/只劑量/(mg/kg)血栓重量/mg 7---模型組 7 - 19.35±9.51 -銀杏葉片組 7 20 7.76±2.43* 59.88*阿司匹林組 7 5 6.53±1.77* 66.27*小劑量組 7 20 10.89±4.02* 43.74*中劑量組 7 40 7.46±2.20* 61.43*大劑量組 7 80 4.96±2.13* 74.35*

2.3 榅桲提取物對(duì)對(duì)大鼠TXB2和6-kato-PGF1a含量的影響［11-12］Wistar大鼠，♂性，49只，體重300～350 g，動(dòng)物分組，給藥，麻醉及手術(shù)方法同2.2項(xiàng)。在無(wú)菌條件下，造模90 min后，快速分離腹主動(dòng)脈，取一次性1 mL注射器吸取消炎痛-EDTA.Na2液約1 mL備用，取一次性3 mL抽血管快速腹主動(dòng)脈穿刺取血3 mL，即刻將消炎痛-EDTA.Na2液0.2 mL注入抽血管內(nèi)，顛倒混勻，4℃離心3 500 r/min，15 min，分離血漿，-20℃保存。采用放射免疫法檢測(cè)大鼠血漿中的6-酮-前列環(huán)素(6-keto-PGF1a)、血栓素B2(TXB2)含量。結(jié)果見表3。

表3 榅桲提取物對(duì)大鼠血漿中TXB2和6-kato-PGF1a含量的影響(±s，n=7)

表3 榅桲提取物對(duì)大鼠血漿中TXB2和6-kato-PGF1a含量的影響(±s，n=7)

與模型組比較，*P＜0.05。

組別 動(dòng)物數(shù)/只劑量/(mg/kg)6-keto-PGF1a/(pg/mL)TXB2/(pg/mL)7 - 593.96±357.89 242.20±117.40模型組 7 - 267.22±255.05 717.32.±299.21銀杏葉片組 7 20 498.80±30.98* 255.25±199.68*阿司匹林組 7 5 170.60±103.77 78.21±42.47*小劑量組 7 20 558.52±314.22 411.01±225.02中劑量組 7 40 334.77±156.02* 191.55±154.36*大劑量組 7 80 384.42±334.22* 91.59.±62.04生理鹽水組*

3 結(jié)果

3.1 榅桲水提取物對(duì)大鼠頸總動(dòng)脈栓塞的影響結(jié)果如表1顯示，與模型組相比，榲桲提取物各劑量組均顯著延長(zhǎng)OT，顯著減輕動(dòng)脈血栓重量(P＜0.01)。榲桲提取物小、中、大劑量組的血栓抑制率為34.44%、54.04%、64.52%。表明榅桲提取物能延長(zhǎng)OT，抑制動(dòng)脈血栓形成。

3.2 榅桲提取物對(duì)大鼠靜脈栓塞形成的影響 結(jié)果如表2顯示，與模型組相比，榲桲提取物各劑量組顯著減輕靜脈血栓重量(P＜0.01)。榅桲提取物小、中、大劑量組靜脈血栓抑制率分別為43.74%、61.43%、74.35%。表明榅桲提取物能顯著抑制靜脈血栓形成，且呈較好的量效關(guān)系。

3.3 榅桲提取物對(duì)大鼠血漿中TXB2和6-kato-PGF1a含量的影響［13，14］結(jié)果如表 3 顯示，與生理鹽水組相比，模型組6-keto-PGF1a含量顯著降低(P＜0.05)，且TXB2含量顯著升高(P＜0.05);與模型組相比，榲桲提取物小、中、大劑量組均明顯降低TXB2含量，升高6-keto-PGF1a的含量(P＜0.05)。

4 討論

FeCl3可損傷血管內(nèi)皮損傷誘發(fā)血小板黏附和聚集，促進(jìn)血栓形成。靜脈結(jié)扎使局部血流瘀滯都能引起血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，低氧，可激活凝血因子和凝血酶在局部達(dá)到凝血過(guò)程所需的濃度，啟動(dòng)內(nèi)源性凝血系統(tǒng)，內(nèi)皮細(xì)胞變性壞死，使血管內(nèi)皮下的膠原暴露于血流，可激活內(nèi)源性和外源性凝血途徑使凝血酶、凝血因子活化，使凝血功能亢進(jìn)。因血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷使PGI2合成減少，血漿TXA2合成增加，進(jìn)一步促進(jìn)血小板黏附和聚集，TXA2-PGI2間平衡失調(diào)，可引起血管收縮，血小板聚集，促進(jìn)血栓形成。

榅桲提取物各劑量組與模型組比較，均顯著延長(zhǎng)了OT(P＜0.01);顯著減輕動(dòng)脈和靜脈血栓重量(P＜0.01)。均明顯降低TXB2含量(P＜0.05)，升高血漿中6-keto-PGF1a的含量(P＜0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果充分證明，榅桲提取物具有抗血栓作用，其作用可能是通過(guò)抑制TXA2合成酶，從而使TXA2生成減少，提高6-kato-PGF1a而產(chǎn)生PGI2的途徑增強(qiáng)，從而維持TXA2-PGI2間平衡，促進(jìn)血管擴(kuò)張，抑制血小板聚集而抑制血栓形成。榅桲提取物抗動(dòng)脈血栓作用與抑制血小板黏附和聚集有關(guān);抗靜脈血栓形成作用與抑制凝血酶、凝血因子有關(guān)。榅桲提取物具有較強(qiáng)的抗動(dòng)、靜血栓作用，在抗血栓方面有一定的開發(fā)利用價(jià)值。

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