柯伙釗， 陳文娟， 吳水華， 羅明可

(福建生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院，福建福州350002)

金線蓮素有“金草”、“神藥”、“烏人參”等美稱［1］，為蘭科開唇蘭屬［Anoectochilus roxburghii(Wall.)Lindl.］的全草［2］，中文學(xué)名是花葉開唇蘭。全草入藥，味甘、性平，具有清熱涼血、除濕解毒的功效，是一種多年生珍稀名貴的中草藥，民間常用于治療肺結(jié)核咳血、腎炎、膀胱炎、重癥肌無力、遺精、風(fēng)濕性及風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、小兒驚風(fēng)、婦女白帶以及毒蛇咬傷等癥［3］。金線蓮主要分布在我國亞熱帶地區(qū)，其中以閩、浙、贛、臺(tái)為主要產(chǎn)地［4］，特別在臺(tái)灣地區(qū)倍受青睞，被稱為“藥中之王”。目前，我國對(duì)該植物的研究主要集中在人工栽培、組培、藥理等方面，其有效成分與揮發(fā)性成分的研究報(bào)道較少。本實(shí)驗(yàn)對(duì)臺(tái)灣組培金線蓮揮發(fā)油成分進(jìn)行研究，為國家中藥材規(guī)范化種植基地中藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 儀器及材料

1.1 儀器 美國Agilent公司6890N Network GC Systerm氣相色譜儀，5975B Inert xl MSD質(zhì)譜儀，7683B Series進(jìn)樣系統(tǒng)，色譜柱為 VF5MS(0.25 mm ×30 m，0.25 μm);AL204 型電子天平(梅特勒-托利多);KQ-100B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);AKRY-UP-Ⅲ-10艾柯超純水機(jī)(成都康寧實(shí)驗(yàn)專用純水設(shè)備廠);水蒸氣蒸餾裝置。

1.2 試劑與材料 臺(tái)灣組培金線蓮鮮草，購自福建省漳州市豐田花園。正己烷、乙醚(重蒸)均為分析純;超純水。

2 方法及條件

2.1 揮發(fā)油的提取 精密稱取臺(tái)灣組培金線蓮鮮草兩份，各50 g。用剪刀剪成約5 mm長小段，置研缽中搗爛，加入少量水轉(zhuǎn)移至500 mL圓底燒瓶中，室溫超聲30 min，用水蒸氣蒸餾法進(jìn)行提取，控制流速3d/2s，蒸餾4 h，餾出液用重蒸乙醚萃取3次，萃取液中加適量無水CaCl2干燥過夜，過濾，濾液濃縮后備用;同前法處理另一份鮮草，餾出液改用重蒸正己烷萃取。

圖1 乙醚萃取金線蓮揮發(fā)油總離子流圖

2.2 氣相色譜條件 色譜柱:VF5MS石英毛細(xì)管色譜柱(0.25 mm ×30 m，0.25 μm);載氣為氦氣，柱流量為 1.0 mL/min;不分流進(jìn)樣;進(jìn)樣量為1 μL;升溫程序:45℃(保持8 min)，以6℃/min到285℃(保持12 min)，共計(jì)60 min;進(jìn)樣口溫度250℃。

2.3 質(zhì)譜條件 離子源為EI源;電子轟擊電壓70 ev;離子源溫度230℃;四極桿溫度為150℃;傳輔線溫度:280℃;溶劑延遲3.0 min;質(zhì)量掃描方式為SCAN;掃描范圍15～500 aum;NIST107標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜檢索庫。

3 結(jié)果及討論

3.1 樣品的測定結(jié)果 取金線蓮全草中提取的揮發(fā)油通過上述GC-MS條件分析，得到總離子流色譜圖(見圖1、圖2所示)。根據(jù)NIST標(biāo)準(zhǔn)譜庫檢索，從乙醚萃取的揮發(fā)油中檢出42種成分，鑒定出39種組分，按面積歸一化法計(jì)算，各樣品已鑒定的成分占揮發(fā)油總量的98.479%，見表1所示。正己烷萃取的揮發(fā)油中檢出24種成分，鑒定出23種組分，按面積歸一化法計(jì)算，各樣品已鑒定的成分占揮發(fā)油總量的99.147%，見表2所示。

圖2 正己烷萃取金線蓮揮發(fā)油總離子流圖

續(xù)表1

表2 正己烷萃取金線蓮揮發(fā)油的化學(xué)成分及相對(duì)百分含量

3.2 討論 通過采用GC-MS法首次分析了臺(tái)灣組培金線蓮的揮發(fā)性成分，并且比較了不同有機(jī)溶劑萃取所得揮發(fā)油的化學(xué)成分。由表1可知，乙醚萃取所得臺(tái)灣組培金線蓮的揮發(fā)油中，主要成分為烷烴類、脂肪酸、酮類、醇類及酚類化合物，分別占揮發(fā)油的86.131%、3.375%、2.476%、2.230%和2.113%，還含有一些酯類及單帖類化合物。由表2可知，正己烷萃取所得臺(tái)灣組培金線蓮的揮發(fā)油中，主要成分為烷烴類、酚類、脂肪酸及酯類化合物，分別占揮發(fā)油的25.226%、23.879%、21.348%和20.281%。如2-甲氧基-3-烯丙基苯酚(20.541%)、4-甲氧基-苯甲酸丙酯(11.937%)、棕櫚酸(10.741%)、亞油酸(10.607%)和亞麻酸甲酯(4.063%)等。通過比較不同有機(jī)溶劑萃取的揮發(fā)油化學(xué)成分的差異可知，采用正己烷萃取揮發(fā)油，可得到含量較多的脂肪酸類化合物，但低沸點(diǎn)化合物幾乎沒有;采用乙醚萃取揮發(fā)油可以得到大量的低沸點(diǎn)化合物，但脂肪酸類化合物很少。

文獻(xiàn)［5］報(bào)道從海南栽培金線蓮中提取揮發(fā)油的化學(xué)成分，主要成分分別為正十六烷酸(25.22%)、(Z，Z)-9，12-十八碳二烯酸(15.35%)、(Z，Z，Z)-9，12，15-十八碳三烯酸甲酯(13.64%)和(Z，Z)-9，12-十八碳二烯酸甲酯(6.47%)。文獻(xiàn)［6］報(bào)道從福建省漳州市南靖縣金線蓮中提取揮發(fā)油的化學(xué)成分，主要成分為十八烷酸(48.699%)和正十六烷酸(23.544%)。尚未見從臺(tái)灣金線蓮揮發(fā)油中檢出十六酸甲酯與大量的烷烴類化合物的相關(guān)文獻(xiàn)，這可能與不同地區(qū)的金線蓮所含揮發(fā)性成分差異較大有關(guān)?？梢?，研究不同地區(qū)金線蓮揮發(fā)油中的主要成分對(duì)開發(fā)具有地方特色的中草藥意義重大。

［1］黃慧蓮，劉賢旺.美葉奇藥金線蓮［J］.植物雜志，1999，23:8.

［2］黃慧蓮，劉賢旺.金線蓮無根苗的壯苗促根試驗(yàn)研究［J］.中國野生植物資源，2001，20(6):74.

［3］中國科學(xué)院植物研究所.中國高等植物圖鑒［M］.第5冊(cè).北京:科學(xué)出版社，1980.

［4］孔祥海.“藥王”金線蓮的自然資源初步研究［J］.中草藥，2001，32(2):155-157.

［5］韓美華，楊秀偉，靳彥平.金線蓮揮發(fā)油化學(xué)成分的研究［J］.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2006，18:65-68.

［6］蔡金艷，張勇慧，吳繼洲.藥王金線蓮揮發(fā)油及石油醚提取物的氣相色譜-質(zhì)譜-數(shù)據(jù)系統(tǒng)聯(lián)用測定［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2008，19(7):1550-1552.